实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问qpcr结果_溶解曲线

bamboopiggy

感觉是加样不稳，或者是cDNA的质量有问题。

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问壳聚糖有还原性吗？会还原二价铜离子吗？

Eason老歌迷

没有。但是它壳聚糖可以吸附铜离子。

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问病例组和正常人的qPCR结果数据应该怎么处理呢

bamboopiggy

感觉你看的这两种方法都有问题，应该是每个样本的Δct减去这个均值得到ΔΔct。然后计算得到2的ΔΔct，然后可以用t-test进行组间比较就可以。

3 回答615 围观

问流式分析求助

Eason老歌迷

7AAD就行。上下相差很接近。

1 回答308 围观

问子宫masson

Eason老歌迷

masson染色对固定要求比较特别，最好用Bouin固定，最好是石蜡切片，形态好，特备是肾组织，一般多采用2um。如果已使用甲醛类固定剂，建议制片后进入Bouin液再固定过夜，这样片子更易着色。

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问变异链球菌究竟是好氧菌还是厌氧菌？为什么文献里和菌种购买网站不一样？

天一湖医者

一般来说，变异链球菌属于厌氧菌。

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问请大佬看一下qpcr amplification plot曲线

天一湖医者

一是扩增信号太弱，经系统矫正后，就产生这样抖啊抖的线，小 V 建议大家提高模板浓度重复实验。二是仪器本身的问题，可能在扩增过程中仪器出现了波动或者本身该检测孔出现了异常。

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问阿霉素大鼠尿蛋白差异太大怎么办？

Eason老歌迷

个人感觉是你的鼠尾注射没有操作好。说到底尾静脉注射技术就像投篮一般，有的时候蒙一下能进，或者手感热的时候连续进球，但其他时候还是不够稳定。如果想要提高成功率还是需要在找对方法的情况下，经常练习手感。至于姿势问题大家不必拘泥，我也只是把对我而言最合理的姿势分享给大家，各位在练习的过程中也可以微调，毕竟无论教科书般的投篮姿势还是端尿盆儿，只要能进球就好。

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问提RNA后测浓度，260/280在 2.16，260/230在1.47这个RNA还能用不，用于逆转录

bamboopiggy

凑合能用吧，260/230 1.47 有机溶剂污染，可能测到的rna的浓度比实际的浓度要高

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问问一个离大谱的问题吧，细胞培养箱里有芥末油味怎么去除

bamboopiggy

把孵箱里的东西都拿出来，把孵箱内壁和搁板都擦干净了试试。实在不行放点活性炭吸一吸

3 回答293 围观

问诱导小鼠体内巨噬细胞的极化

Eason老歌迷

具体参看这篇文献，Physical Confinement in Alginate Cryogels Determines Macrophage Polarization to a M2 phenotype by Regulating a STAT-Related mRNA Transcription Pathway。

1 回答801 围观

问细胞DNA的提取一般用什么方法？

bamboopiggy

看你的实验目的，有专门提细胞genomic DNA的kit，如果是单纯做个genotyping，可以用鼠尾裂解液。

3 回答531 围观

问fish技术是基因扩增吗？

天一湖医者

是的，荧光原位杂交技术（FISH）是目前临床病理诊断中一种重要的辅助技术，主要用于基因的扩增、易位和融合，在淋巴造血系统和软组织肿瘤中应该较为广泛。

2 回答774 围观

问请问大神们，我的病毒不含药筛靶点，想通过荧光抗体染色后流式分选，那细胞结合过荧光抗体，功能还正常吗？我的是Jurkat 细胞

Eason老歌迷

没问题吧，功能应该都和之前一样正常，给你看看流式的原理图。

1 回答373 围观

问请问有人在用CAR慢病毒转染Jurkat 细胞吗？为什么转染之后扩增这么难，还死了一大片。

Eason老歌迷

正常，这跟细胞上病毒受体表达的多寡以及细胞的抗病毒能力有关，这两个原因一般无法克服。给提供几个常见的解决方法。一个是加助侵染试剂。二是浓缩病毒，4摄氏度，10K蛋白截留柱离心浓缩，提高病毒滴度后在感染，可以提高感染阳性率。三是分选阳性细胞，一般情况下，慢病毒感染Jurket、THP1这种有免疫能力（指的是分子免疫抗病毒能力）的细胞，基本上不可能做到100%感染，如果你感染以后有分选标签，做一个流式

2 回答1056 围观

问A260/A280 、A260/A230 有何意义？

bamboopiggy

260/280代表的是样品在260nm处的浓度，和280nm处浓度的比值，一般在1.8-2.0之间比较好，低了代表有蛋白质对核酸的污染，260/230代表的是有机溶剂的污染

4 回答7904 围观

问spss方差分析的题怎么做

Eason老歌迷

成对样本统计量均值 N 标准差均值的标准误对 1 治疗前 122.1000 10 11.31813 3.57911 治疗后 112.1000 10 16.17577 5.11523 成对样本检验成对差分 t 均值标准差均值的标准误差分的 95% 置信区间下限上限对 1 治疗前 - 治疗后 10.00000 11.95361 3.78006 1.44890 18.55110 2.

2 回答499 围观

问WGCNA分析时，软阈值是如何选择的？

Eason老歌迷

具有生物学意义的是R2>0.8 部分会提高阈值到0.9 同时保证连通性较高，没有高于0.9的直接用0.8的吧取4计算看看结果好坏。

2 回答2742 围观

问请教各位大神！请问96孔板培养细胞为什么会出现以下情况呀！？

秋秋欣欣

感觉像是你细胞之前消化后没有吹散

4 回答434 围观

问高尔基染色

Eason老歌迷

你可以看看说明书。一般动物不能灌注，（灌注会造成阴性结果）直接处死取脑，水洗一下，放入1，2混合液，（24小时换液），避光，室温14天。

3 回答1972 围观

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