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实验问答

25,332,379 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问ChIP-nexus和ChIP-exo和普通的ChIP有什么不一样？

bamboopiggy

CHIP-nexus 是能够在基因组中精确定位转录因子结合位点的新技术，该技术分辨率很高。CHIP-exo（ChIP外切酶），应用于各种蛋白因子结合在基因组上结合位置的鉴定，以达到碱基对水平的分辨率。c

3 回答1571 围观

问什么情况下要做ChIP-seq，什么情况下做EMSA？两者有何区别？

bamboopiggy

chip-seq得到的数据比较多，emsa可以对chip-seq找到的序列进行验证，最好两个都做。

3 回答2215 围观

问为什么瓶装PBS那么贵？

bamboopiggy

瓶装的要在无菌环境中生产，还要罐装，当然贵啊。你买的粉，自己配，如果你算算，会发现，不买粉，直接自己称量各组分来配的话，更便宜。

4 回答581 围观

问如何选择合适的elispot试剂盒，要做疫苗抗体效价检测

天一湖医者

1、查找待测样本的蛋白浓度　可以通过NCBI的文献，给出的蛋白表达量参考值来比较elisa试剂盒给出的样本值与报道值是否一致。2、试剂盒的应用种属、检测样本的种类　　除试剂盒特别说明外，一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有：血清和血浆（不同抗凝剂），细胞上清，和细胞裂解液，试剂盒中不同样本的稀释液不混用。3、•.检测范围： •建立线性范围：需测定9-11个浓度水平，每个浓度水平重复测定3-4

2 回答568 围观

问最近养细胞总是出现霉菌污染，换了培养基，重新复苏还是会有，大概是什么原因呢？

秋秋欣欣

环境有问题，孵箱以及培养房都灭菌

5 回答555 围观

问做小干扰之后跑pcr，这个结果意思是没干扰成功么

秋秋欣欣

没差异就是没干扰成功啊，干扰成功表达量会下降

4 回答430 围观

问血液流变学检测哪一种方法更合理？

Eason老歌迷

血液黏度是血液最基本的流变特性。血液黏度测定包括全血黏度和血浆黏度测定。血液黏度的单位以 mPa·s表示。血液黏度测定的方法主要分两大类，一类是毛细管黏度测定法，另一类是旋转式黏度测定法。我觉得第一类方法更合理。

2 回答590 围观

问血液流变学检测怎么保证准确性？

Eason老歌迷

为保证检测的准确性，应特别注意采血时间及摄食时间。在采血方式上，也应注意避免造成血粘度误差的因素，如采血时压脉带的压力大小、血管受压时间长短等均对血粘度检测结果有所影响，血管在较高的压力下受阻时间长，则血液会有所浓缩。抗凝剂的正确使用也是保证检测准确性的关键之一。因草酸盐或枸橼酸钠等抗凝剂可引起细胞的形态改变、影响红细胞的聚集性和变性能力，导致血粘度检测不准确。

2 回答577 围观

问RT-PCR的相关问题？

bamboopiggy

只合成第一链就可以做RT-PCR，随着扩增过程，会形成第二链的。

3 回答635 围观

问原核表达蛋白诱导问题？

申东熙老伯

如果未+IPTG与+IPTG组诱导结果没有差别的话，很有可能蛋白直接没有诱导出来，换个载体重新构建质粒导入新的感受态细胞试着再诱导一下看看，诱导温度和转速还有时间一般不会对诱导结果造成太大差异。

4 回答1419 围观

问关于RNA提取的问题？

bamboopiggy

跑胶的结果，准确，胶回收不同长度的片段，有不同程度的损耗。

3 回答590 围观

问动物实验给药浓度体积配置

bamboopiggy

0.2ml/10g则相当于20ml/kg，药物浓度为：20mg/ml. 但是灌胃的药，你最好配个高浓度的饿母液，然后现用现稀释。一般小鼠给药前不用禁食，但是你最好规律时间给药（如上午都上午，下午都下午），从而达到合适的药物浓度。

4 回答7255 围观

问条件培养基的制备过程中的坑！

bamboopiggy

1000rpm，10min或者是3000rpm，5min就可以。)后0.22um滤器过滤，这些的目的都是去除培养基中的细胞。不需要测定营养物质的消耗，条件培养基，主要是收集细胞分泌的促增殖的物质，来促进细胞增殖的。

2 回答2527 围观

问求助|TLR抑制剂（TAK-242）和激动剂（CRX-527）的用法

天一湖医者

TLR抑制剂（TAK-242）常用剂量为0.5mg/kg。激动剂（CRX-527）常用剂量为5-10ug/kg

2 回答682 围观

问求助：皮质酮损伤细胞造抑郁症模型，皮质酮应该怎么溶啊？

秋秋欣欣

先用促溶剂后，再加定溶剂：因为我们的实验中用到了DMSO（二甲基亚砜），它是一种促溶剂，所以我们在溶解皮质酮时，先用少量的DMSO（也就几滴）使皮质酮微溶，再加其他试剂（比如d-Hanks、生理盐水、无水乙醇（可能有影响）等）定容配制皮质酮溶液。

2 回答2606 围观

问小鼠肺洗液怎么做Elisa，稀释方法和血清一样么

bamboopiggy

稀释方法是一样的，但是要做个预实验看看需不需要稀释

2 回答712 围观

问在做流式时，如何解决非特异性染色的问题？

秋秋欣欣

降低抗体浓度可以减少非特异性染色

3 回答598 围观

问用GFP的抗体去做磷酸化蛋白的wb，会出现两条带吗

bamboopiggy

会出现两条带，磷酸化的和total的。

3 回答620 围观

问查找相关序列求助！！！

bamboopiggy

找到那些代谢酶的基因序列，然后跟你的基因组DNA进行比对就可以

2 回答738 围观

问水化上样缓冲液II 和III在哪里用

天一湖医者

一般用于二维电泳和双向电泳实验。

2 回答496 围观

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