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问
流式,凋亡,BD C6流式细胞仪,凋亡试剂盒Elabscience
Eason老歌迷
如果你做了几次都是这样,可能跟几方面有关系:所用细胞状态欠佳、干预因素的浓度或者干预时间还需要优化、收集细胞期间操作不恰当对细胞的损伤等等。
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问
N糖分析时,G1F旁有三个峰,质谱显示分子量是一样的,所以存在3种G1F异构体吗?可能是怎么样的连结方式?
Eason老歌迷
三个峰?想问一下你用的什么柱子?另外如果你的峰拖尾的很厉害,那么在后一个峰中很可能包含有你的单抗分子。可能并不一定是三种异构体,如果可以的话,建议你做三次重复实验看看。
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问
原核蛋白pET32a诱导表达
Eason老歌迷
也有可能是分子伴侣。也可以你的目的蛋白有降解了。
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问
smad2/3
Eason老歌迷
http://www.phosphosite.org/proteinAction?id=540&showAllSites=true。不同的磷酸化位点产生的功能请详细看此链接吧。如果你不研究具体的磷酸化途径,是可以的。
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问
邻联茴香胺甲醇溶液会在磷酸盐缓冲溶液中析出,有什么解决办法呢?
Eason老歌迷
你可以过滤一下,这样就可以把杂质过滤掉。跟你介绍一下我们实验室配的过程吧,称取125mg邻联二茴香胺于50mL棕色容量瓶中加25mL甲醇,振摇使其溶解,加50mg活性炭,振摇5min过滤,取20.0mL滤液置于另一50mL棕色容量瓶中,加盐酸(1+11)至刻度。临用时现配并避光保存。
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问
WB目的条带应该有两条,但是只出来一条
麻黄连翘赤小豆
蛋白降解,可以重新提取蛋白,或者胶的质量问题,没跑出来,或者换个显影液
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问
白介素6的WB检测
还在陆上surg
这个要看你的实验设计,一般来说两个都可以检测。
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问
为什么敷出来的wb条带是这个样子的,会变成浅条带
麻黄连翘赤小豆
板子没夹好,再跑一次就行了,转膜不均匀,滤纸可以换一下新的排除滤纸的问题
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问
数据分析
dxywode
你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异,就可以计算标准差了。 这么简单的统计分析,用不着SPSS吧, excel就可以解决了。
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问
蛋白互作调控
Eason老歌迷
这个很好理解啊,细胞调控又不是光只有它两个蛋白,还有c还有d,可能c,d影响着a,b之间的这种作用呢
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问
有没有伙伴做短链脂肪酸干预细胞的,怎么配置里面的短链脂肪酸,比例是多少?
Eason老歌迷
短链脂肪酸(SCFA)又被称作挥发性脂肪酸(VFA),评价标准在于碳链中碳原子的数量,我们将碳原子数量在2-6之间的有机酸称为短链脂肪酸,其名称分别为,乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸。具体的配制方法,请参考这篇文献方法部分”短链脂肪酸影响B细胞表观遗传修饰以调节抗体应答‘’
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问
猪FUT1基因上游非编码区-1150~50bp区域有启动子活性。这串数字怎么得到的?
bamboopiggy
是在基因组里,从你的start code开始,往上游数1150个bp为-1150,50是从start code开始往下游数50bp
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问
如何找孕激素受体基因亚型B的启动子序列?+331位点该怎么找😵
Eason老歌迷
去ncbi,输入孕激素受体基因亚型B,然后打开人种属的基因,点击mrna和蛋白,找到它的转录方向,转录方向上游2000个即为启动子序列。
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问
要看一株放线菌是否产生某种物质,从代谢通路方面如何分析
Eason老歌迷
你可以上kegg,metacyc网站上查一下这种物质所在的代谢通路,然后找一下上下游,然后进行验证。
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问
Wb拔梳子之后发现碎胶
dxy_n0zw4do0
一般在拔梳子时,先把制好的胶板放入电泳槽中后,加上缓冲液后,如果制好的胶板比较久,可以在缓冲液稍等一两分钟,然后用两手同时均匀的用力去拔。这样胶不易碎。
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问
国标23527中蛋白酶活力计算公式中A1稀释液得活力是怎怎么计算来的?
Eason老歌迷
”蛋白酶K酶活力及杂质检测方法编制说明”这篇文献有详细讲解。酶活力单位定义:在蛋白酶的最适反应温度和pH 条件下,1 min 水解蛋白质底物释放1 μmol 显色呈福林试剂阳性的氨基酸的酶量,即为1个酶活力单位,以U 表示。酶活力计算公式:从L-酪氨酸标准曲线上读出样品的最终稀释液酶活力。样品的酶活力按下式计算:X :样品酶活力 (U/g );A :由L-酪氨酸标准曲线读出的最终稀释液酶活力(U/
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问
【求助】间接ELISA的一个空白对照孔的OD450值高过样品孔,这是咋回事呢?有改进办法不
Eason老歌迷
如果不是竞争ELSIA法的话,也是有可能的。正常情况是样品OD值和空白孔OD值都比较低,样品OD值略低于空白孔OD值。但是如果样品OD值比空白0D值低得多,恐怕就要考虑空白孔设定是否合适的问题了。
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问
冰冻切片的剩余组织提蛋白?
balalaLy
如果你的组织没有做过固定的话就还可以
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问
检索曲妥珠单抗可用官能团
Eason老歌迷
可以去这个曲妥珠单抗的药物研发公司的官网查看
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问
成品成骨诱导液加入葡萄糖溶液后,细胞卷成团块,飘起。求助?
Eason老歌迷
可能是你的诱导液的问题,细胞都死亡成团了。建议你用我这个配方试一试,含10%FBS的DMEM培养液,10mmol/Lβ甘油磷酸钠,0.05mmol/L维生素C和100mmol/L地塞米松。我记得这个公司的成骨诱导液说明书里有建议用0.1%明胶包被器皿后再铺细胞,可以降低细胞脱落的可能性。
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