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问
有小伙伴知道上传蛋白质质谱数据至公共数据库需要多久时间,卡在检验这里2+小时正常吗?
Eason老歌迷
你可以重新退出重新进,刷新几次试试,因为你可能是网络延迟问题。
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问
酵母载体克隆表达zeocin抗性表达与amp抗性表达问题。
bamboopiggy
加zeocin,amp是你扩增这个质粒,在大肠杆菌里面的时候用的抗生素,而转入酵母之后,用zeocin进行筛选
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问
关于RIP求助
Eason老歌迷
是不是你的实验步骤有问题。细胞核分离和裂解物沉淀为避免污染,使用不含 RNA 酶的试剂。染色质剪切应该在液氮中冷冻一份裂解物用于对照 RNA 分离。根据所关注的蛋白质和抗体,加入的抗体量和孵育时间可能需要进行优化处理。
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问
凝胶电泳结果如图所示该怎么办
Eason老歌迷
你这是有点亮带拖尾。可能是你的引物设计不佳,也可能是PCR中DNA浓度加的太多,也可能是mg2+浓度加的太高。
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问
求助:请问细胞在无血清高糖培养基环境中合成酪蛋白的时间大约能维持多久?
Eason老歌迷
细胞在无血清高糖培养基环境中合成酪蛋白的时间大约能维持在24h左右。当无血清高糖培养基中无法使细胞合成酪蛋白时,重新换新的无血清高糖培养基能够使细胞重新开始合成酪蛋白。
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问
请各位老师帮看下这家伙算不算是自噬体谢谢!
Eason老歌迷
是的,应该是自噬体。自噬体是单层膜,内膜部分被水解,部分内膜与外膜融合。
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问
成骨细胞不贴壁是死了吗
Eason老歌迷
到不一定肯定死了,但是状态肯定是不好的。
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问
头孢曲松钠小鼠注射用法用量
Eason老歌迷
我记得实验手册上有,100mg/kg剂量注射鼠尾
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问
粪便保存问题
bamboopiggy
你可以试一下,但是感觉是被破坏掉了,下次加pbs重悬以后,就别放-20保存,要不就加点甘油再放-20冻存
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问
求助|活化的b细胞形态正常吗?
Eason老歌迷
感觉还行,还是有一些活化的细胞存在,但是形态不是太好。
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问
化合物应该是显弱酸性的,结果测的饱和水溶液的值为8.01,PH计结果三点较正,请教一下大神们可能出现的原因,谢谢。
Eason老歌迷
可能是这个化合物密封保存不佳,和空气接触,发生反应,不然它应该是弱酸性啊。
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问
请问大家PC12细胞造抑郁模型,有成功的吗 分享一下经历,我做了一年了,都没成
whilt-shirt
可以参考这篇文献:谷氨酸和皮质酮诱导的PC12抑郁症细胞模型差异性的1H NMR代谢组学研究
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问
hela贴壁细胞疑是染菌,求大神帮忙判断一下
Eason老歌迷
你可以先用显微镜观察,它有没有游动,培养基有没有混浊。我觉得可能是黑胶虫污染。
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问
实验小白求助
Eason老歌迷
文献中出现的动物给药浓度,是根据片剂药物的有效成分计算的,而不是直接根据片剂药物的重量计算的。
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问
小鼠肝脏HE染色求助
Eason老歌迷
染色不均匀的话,可能有几个主要原因。一是组织取材固定不当,如组织取材过大或过厚,不能将组织完全固定,组织切片染色后出现外周固定好的部分易着色,而中间未固定好的组织 ,细胞着色模糊,使染色不均。二是切片薄厚不均或有横纹。三是组织脱水,透明和浸蜡处理不当,组织脱水用的各级乙醇未能保证相应浓度使组织脱水不彻底,二甲苯内的时间过长组织易碎也无法切出好片子,浸蜡温度过高,组织变脆也不利切片染色。
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问
成肌细胞C2C12分化成功后,是用马血清继续培养呢,还是再换成胎牛血清培养
bamboopiggy
诱导分化成功了,就可以换成胎牛血清了,因为此时已经是肌细胞了。
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问
请问大神这是什么污染
bamboopiggy
没看出细胞污染来,可能是细胞密度太大,所以有死细胞,如果细胞增殖出现问题,可以检测一下支原体试试
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问
平板上取菌到液体培养基上的问题
bamboopiggy
你摇菌的目的是什么?如果是为了取到足够的菌,你可以做预实验试试,看5ml够不够,如果不够可以扩大到10ml啊
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问
请教,如何寻找共培养系统中癌细胞所产生小分子的机制?
Eason老歌迷
你是想向上游研究THP-1细胞与癌细胞共培养后产生a的机制,对吧?那么你就可以去string网站,进行蛋白互作预测,然后在kegg找通路,这个玩意肯定要慢慢试,挺麻烦。
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问
最近在做毕赤酵母蛋白诱导,总是失败?
Eason老歌迷
可能是有几个原因。如果用GS115表达不出蛋白,我们换成KM71H后,大部分克隆能表达。 我们尝试过在28度和室温下诱导表达,表达水平可能都不低。ph的话就选择用6.0——6.8,BMMY的pH7.0-7.5比较合适。
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