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问
新手小白WB实验内参总是跑的不好?
Eason老歌迷
这个条带最好是别用,不太好。可能是你的电泳液使用次数太多。可能是你的抗体特异性不好,出现了非特异性条带。
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问
如何提纯动物标本的目的大分子蛋白
cab2
我们取动物肝脏蛋白,用液氮把组织速冻,用pe手套包裹,用陶瓷杵敲碎,取适合大小的碎块,称重,1g加入1ml裂解液,加入3个钢珠,2大1小,研磨仪中研磨,离心,取上清
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问
求助!!!免疫共沉淀洗珠子时的去污剂SDS浓度范围
balalaLy
我用的buffer的配方一种是1%NP40+0.1%SDS或者只有1%NP40
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问
腺病毒纯化介质氯化铯梯度的配置浑浊?
Eason老歌迷
是不是溶剂的问题,你过滤一下试试看。
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问
天根质粒小提试剂盒的PD溶液怎么配?
Eason老歌迷
去蛋白液PD,一般是含异丙醇(可能50%)和sds等去污剂的水溶液。但是人家试剂公司的试剂盒里的溶液应该不会告诉你具体配方吧。
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问
细胞加干预后形态立即发生变化是什么原因 求助🆘
balalaLy
可能是干预药物浓度高了,不同批次的药物作用效果可能会有差别
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问
(求助) 有人在做基底膜体外培养的螺旋神经节 神经纤维免疫荧光染色吗?求解!
balalaLy
我4年前有做过,NF200确实不好染,实在染不好,你可以考虑换另一个Marker,或者用Neun,丁大连老师有一篇文章就是染螺旋神经节的,你可以找来看一下。
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问
我的NLRP3有两个条带是怎么回事呀?
bamboopiggy
无图,只能靠猜,你是不是灌胶或者是buffer,有新配的?或者可能是你转膜的夹子有问题了?建议你重新跑一遍再看看。
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问
请问如何鉴别糖蛋白上的糖的类型呀?
你好几和户
先做SDS-PAGE,然后进行质谱分析,得出质量指纹谱,然后区别类型。
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问
22克左右的裸鼠,皮下接肿瘤细胞,能长出瘤子吗?
balalaLy
4-6周接瘤,长10天左右再给药,就差不多了。太大了瘤子长不起来
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问
骨组织如何提基因?我在提骨结核的结核杆菌,如何提取骨细胞基因?
balalaLy
跟其它组织类似,用液氮研磨然后加trizol裂解
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问
内参的选择
Hatcher_Qin
BCA蛋白定量准确的前提下,一多一少说明UUO对你选的这个内参有影响,建议换其他内参。
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问
细胞侵袭实验
balalaLy
那些一坨一坨的东西是死细胞,细胞穿不过去饿死了。可能是因为小室底下有气泡,接触不到下室的培养基。
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问
外泌体超滤管选择
Eason老歌迷
使用100Kd超滤管浓缩细胞上清保留内管液体。我师兄发明的一种提取外泌体方法。如下:用含无外泌体血清的培养基培养细胞得到培养上清液,所述培养上清液中含有外泌体。进行第一离心处理后,取上清进行第二离心处理,然后取上清得到离心液;将所述离心液用100kd超滤管进行超滤浓缩处理,得到超滤液;将所述超滤液进行第三离心处理后,用0.22μm过滤器进行过滤除菌处理,得到浓缩液;将所述浓缩液进行第四离心处理,弃
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问
小鼠主动脉平滑肌细胞系(MOVAS)动脉粥样硬化模型。
Eason老歌迷
小鼠主动脉平滑肌细胞系(MOVAS)动脉粥样硬化模型制作:1.动物 C57BL/6J品系小鼠,9周龄,体重20g左右为宜。2.饲料 在基础饲料中添加棕榈油10%,牛奶粉4%,胆固醇2%,胆酸钠0.4%,混合磨碎制成颗粒,暴晒干燥,高温高压灭菌处理备用。喂饲上述饲料16周血清总胆固醇、游离胆固醇和甘油三酯浓度均可成倍增高,并在主动脉瓣膜和冠状动脉等部位形成典型的含大量泡沫细胞的As病变。3.特点 应
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问
可以帮忙解答一下胰腺组织取材吗
Eason老歌迷
有点像,我建议你下次连带着附近器官一起取,我们都是连带着附近的器官一起取下来,然后再进行分离,这样好辨别和分离。
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问
CAR-T细胞改造
Eason老歌迷
因为CAR主要由三个功能域构成:胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域。胞外结构域由负责识别并结合抗原的单克隆抗体的单链可变片段(scFv)及一段起连接作用的铰链区(Hinge)构成,胞内结构域由共刺激结构域和信号转导结构域构成。所以说它在细胞内,不是在细胞表面。
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问
关于实验配液的一些问题
Eason老歌迷
估计是没审核出来错误,25—ml,就是25毫升,0.2—ml就是0.2毫升。
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问
4T1尾静脉注射
Eason老歌迷
通过尾静脉注射,细胞量一般是 1 - 5 * 106 个/ 200ul。也可以通过皮下注射相同的细胞量。静脉注射转移的周期大概是 2 - 3 周,皮下注射转移的周期会增加至 3 - 4 周。你可以通过尾静脉或者皮下接种稳转 luciferase 荧光素酶,可以明显观察到荧光信号。
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问
小鼠肺灌注问题,请有经验的前辈解答!
Eason老歌迷
为了防止肺部塌陷,渗出,我们都一般用50ml的空针抽20ml的多聚甲醛,打进去,算压力20cmH20,我也在摸索,不知道行不行,以上就是我个人见解。
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