实验问答

22,112,873 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问qpcr这样的扩增曲线是可以用的吗

bamboopiggy

ct值在21-22之间，感觉可以，但是你的图形有点奇怪，没达到平台期，反而再次升高了。你的melt curve是什么样的？

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问RAW264.7巨噬细胞极化qPCR内参

bamboopiggy

raw264.7跑realitme pcr ，文献里有人用gapdh，有人用actin，我一般用gapdh

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问smad2/3

Eason老歌迷

http://www.phosphosite.org/proteinAction?id=540&showAllSites=true。不同的磷酸化位点产生的功能请详细看此链接吧。如果你不研究具体的磷酸化途径，是可以的。

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问邻联茴香胺甲醇溶液会在磷酸盐缓冲溶液中析出，有什么解决办法呢？

Eason老歌迷

你可以过滤一下，这样就可以把杂质过滤掉。跟你介绍一下我们实验室配的过程吧，称取125mg邻联二茴香胺于50mL棕色容量瓶中加25mL甲醇，振摇使其溶解，加50mg活性炭，振摇5min过滤，取20.0mL滤液置于另一50mL棕色容量瓶中，加盐酸(1+11)至刻度。临用时现配并避光保存。

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问SW620细胞背景有黑点是污染了吗

申东熙老伯

这个黑点会动吗？如果细胞长的慢，这个黑点会动的话应该是污染。现在这个也有点像细胞碎片啊。

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问白介素6的WB检测

还在陆上surg

这个要看你的实验设计，一般来说两个都可以检测。

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问请问制备血清和血浆时离心转速和时间上如何区分

丁香清香

离心条件是一样的，只是制备方法不一样。1、血清的制备：获得的血液不能抗凝，盛于离心管或可以离心的器皿中，静置或置37℃环境中促其凝固，待血液凝固后，将其平衡后离心（一般为3000rpm，离心 5～10min），得到的上清液即为血清，可小心将上清吸出（注意切勿吸出细胞成分），分装备用。2、血浆制备：在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂（抗凝剂：血液 = 1：9，将血液加到一定量后颠倒混匀，离心（离心

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问数据分析

dxywode

你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。

3 回答702 围观

问提速的细胞DNA特别黏，加样时一加一大坨，怎么处理一下能不黏？浓度也不高，加水稀释不行，在冰箱冷冻过也不太行

bamboopiggy

感觉是你细胞的量太多了，提取的时候蛋白沉淀没有做好，粘的东西可能是蛋白，要不你过柱提dna吧

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问Wb拔梳子之后发现碎胶

dxy_n0zw4do0

一般在拔梳子时，先把制好的胶板放入电泳槽中后，加上缓冲液后，如果制好的胶板比较久，可以在缓冲液稍等一两分钟，然后用两手同时均匀的用力去拔。这样胶不易碎。

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问高糖损伤模型

dxy_gwrp7ndq

对血清比较依赖的建议使用低血清培养，完全无血清很容易导致细胞死亡

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问请问给大鼠测尿液，除了代谢笼，请问怎样收集尿液测呢？

dxy_gwrp7ndq

可以使用强制排尿法，可以将大鼠固定好后,按压骶骨两侧的腰背部或者轻轻压迫膀胱的体表部位,使其排尿后,将尿液收集到预先准备好的平皿或铝箔容器中

3 回答880 围观

问【求助】间接ELISA的一个空白对照孔的OD450值高过样品孔，这是咋回事呢？有改进办法不

Eason老歌迷

如果不是竞争ELSIA法的话，也是有可能的。正常情况是样品OD值和空白孔OD值都比较低，样品OD值略低于空白孔OD值。但是如果样品OD值比空白0D值低得多，恐怕就要考虑空白孔设定是否合适的问题了。

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问关于基因治疗和细胞治疗的区别？

bamboopiggy

基因治疗，是把你要修补的基因，注入患者体内，而细胞治疗，是把治疗性的细胞，直接输入患者体内

3 回答931 围观

问nrf2核易位抑制剂是？

bamboopiggy

ML385 能抑制NRF2的下游靶基因的表达。brusatol也是nef2的抑制剂

2 回答450 围观

问请问巢氏PCR与普通PCR相比有哪些优点？

府宅

巢式PCR操作简单，所需条件与常规PCR相同，但与常规PCR相比进一步提高了反应的特异性与灵敏性，在微生物学、生物信息学、生物医学等方面有着极其广泛的应用。例如巢式PCR技术与RFLP（限制性片段长度多态性）技术结合，通过设计高度保守序列的引物对待检物种DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行RFLP分析，从而完成DNA分子水平上的多态性检测，该法常用于流行病学的调查和临床常规检测。

3 回答1193 围观

问我想请教一下克隆扩张是什么意思呀？

balalaLy

克隆增殖就是目的基因在细菌细胞内随着细菌的克隆增殖，目的基因也得到大量克隆。

3 回答2212 围观

问冰冻切片的剩余组织提蛋白？

balalaLy

如果你的组织没有做过固定的话就还可以

3 回答1039 围观

问检索曲妥珠单抗可用官能团

Eason老歌迷

可以去这个曲妥珠单抗的药物研发公司的官网查看

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问成品成骨诱导液加入葡萄糖溶液后，细胞卷成团块，飘起。求助？

Eason老歌迷

可能是你的诱导液的问题，细胞都死亡成团了。建议你用我这个配方试一试，含10%FBS的DMEM培养液，10mmol/Lβ甘油磷酸钠，0.05mmol/L维生素C和100mmol/L地塞米松。我记得这个公司的成骨诱导液说明书里有建议用0.1%明胶包被器皿后再铺细胞，可以降低细胞脱落的可能性。

1 回答307 围观

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