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问
MA104细胞感染病毒
Eason老歌迷
具体可以参看这个文献,”轮状病毒感染诱导MA104细胞感染相关蛋白的分析鉴定”。感觉是你细胞生长状态不好,都老化死亡了。
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问
关于CD11b和Iba1标记活化的小胶质细胞
Eason老歌迷
cd11b和iba1组合标记可用于区分小胶质细胞与巨噬细胞。静息小胶质细胞表面标记物为 CD11b。
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问
内质网荧光染色证明内质网应激
Eason老歌迷
具体可以参看这篇文献,讲的很清楚,”内质网特异染色法在内质网应激评价中的作用”
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问
求线粒体自噬特异性抑制剂
Eason老歌迷
我们一般用3MA比较多,推荐你用这个。现在有文献已证明ULK复合物和Beclin1的正调节剂的抑制剂可阻断线粒体自噬,包括MAP激酶,JNK1,ERK和p38的抑制剂。阻断线粒体自噬也有其他方式,如class III PI3激酶抑制剂可通过抑制自噬捕获阻断自噬进程,所以说这些也可以用。
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问
关于stat3的抑制剂sh-4-54的使用情况
Eason老歌迷
好的。SH-4-54是一种高效的STAT抑制剂,其作用STAT3和STAT5的KD分别为300 nM和464 nM。用于体外研究 的话,SH-4-54在人恶性胶质瘤脑肿瘤肝细胞(BTSCs)中表现出空前的细胞毒性,而在人类胚胎星形胶质细胞中没有毒性。此外,SH-4-54有效抑制STAT3磷酸化和其下游转录靶点。用于体内研究的话, BT73原位异种移植的小鼠体内,SH-4-54 (10 毫克/千克,
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问
问p-gp逆转耐药实验阳性对照药为什么都选维拉帕米?
Eason老歌迷
因为最开始发现的第一代p—gp抑制剂就是它啊,第一代P-gp 抑制剂是一批以钙离子通道抑制剂维拉帕米和免疫抑制剂环孢菌素A为代表的口服药物。还有普罗帕酮、奎尼丁、红霉素、氯丙嗪、咖啡因、利血平、育亨宾和他莫昔芬等等。基于人空肠切片做实验,发现奎尼丁、环孢菌素A 和维拉帕米增加了空肠中罗丹明123 的累积,即这3 种药物使罗丹明123 的AUC 增加了,并且罗丹明123 的累积量的增加呈浓度相关性。
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问
western blot,请问电泳的时候总是有这些尾巴是为什么
Eason老歌迷
细胞样本的话是残存血清的原因,其次是制胶的原因,另外上样过多或者上样时候吸取的不全是上清也会造成。
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问
请教各位大神这是什么菌污染
Eason老歌迷
可能是黑胶虫污染。在细胞培养的时候,有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动,小黑点有时呈点状,有时呈小的片状,运动形式为在原地振动(类似布朗运动)。
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问
新手小白做WB,目的条带不清楚,还有趋势不对怎么回事?求帮忙
Eason老歌迷
能看到模模糊糊好几个条带,背景比较脏,建议你可以封闭时间稍微延长,然后你的抗体特异性不高,可以换一个特异性高的试试。
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问
多次稀释,内参基因(ct17、18)与目的基因(ct32、33)ct值相差大于10
n0y0j7
扩增效率ok的话,都可以接受吧。相对定量,本来就是相对比较高低,
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问
microRNA有没有转染量多促进靶基因表达,转染量低抑制靶基因表达的现象
bamboopiggy
你用luciferase实验验证一下它们之间的相互关系。microRNA mimics下调蛋白的表达,这个是定论。感觉你要么是mimics有问题,要么是你的目的蛋白的wb有问题。
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问
请问细胞杀伤肿瘤效果,除了用荧光素酶检测荧光强度,还需要用LDH和CCK8来检测杀伤效果吗?
bamboopiggy
有一个能说明问题就好。但是多种方法说明一个问题,更solid
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问
大鼠脑组织的冰冻切片
bamboopiggy
不固定,直接用蔗糖脱水,细胞的结构会损坏,不能这么做。
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问
请问提取植物总蛋白的方法有哪些?
你好几和户
提取方法主要有SDS-PAGE loading buffer煮沸法、苯酚提取法、TCA丙酮沉淀法等。
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1559 围观
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问
培养的293T细胞总是会出现如图的棒状结构,越来越多。 细胞仍然可以生长 ,求教这种是什么污染该怎么解决 谢谢~
whilt-shirt
可以用PBS多洗几遍,或者增加双抗浓度试试
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问
WB怎么做才是杂志要求的原始条带?
麻黄连翘赤小豆
蛋白分子相近的一抗最好不要放一起混,后面说不清,距离远的可以。如果只能相近的就把内参跑完,洗掉一抗然后重新孵育那个一抗。主要还是看杂志要求,不能裁膜只是相对的,看你的抗体蛋白分子量
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问
叠氮化钠在一抗稀释液中的作用
balalaLy
防腐作用。可以不加的话尽量不要加。可能会对蛋白有一定的影响。
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问
ROS检测
whilt-shirt
有可能是高浓度导致细胞全死了导致的
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问
跑蛋白封闭的时间只能两个小时吗?我做实验有时候忘记时间,封闭了3-4小时反而跑的更好看
富婆贴贴
封闭时间不是固定的,但是要超过45min
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问
apap造模肝损伤
whilt-shirt
要看一下你用的什么品系的老鼠,C57一般都是在10-20左右
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