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小鼠脑片 Nav1.6 染色
实验小助理静静
已通过审核,谢谢您的经验分享~
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问
蛋白不进胶
bamboopiggy
是不是你的lysis 坏了,或者是5xSDS的SDS坏了,导致蛋白没有裂解开?
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问
流式,凋亡,BD C6流式细胞仪,凋亡试剂盒Elabscience
Eason老歌迷
如果你做了几次都是这样,可能跟几方面有关系:所用细胞状态欠佳、干预因素的浓度或者干预时间还需要优化、收集细胞期间操作不恰当对细胞的损伤等等。
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问
粪便DNA提取过程中需要无菌操作吗?比如说提取过程中的枪头需要高压灭菌处理吗?
whilt-shirt
最好还是灭菌的枪头,避免DNA酶的影响
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问
N糖分析时,G1F旁有三个峰,质谱显示分子量是一样的,所以存在3种G1F异构体吗?可能是怎么样的连结方式?
Eason老歌迷
三个峰?想问一下你用的什么柱子?另外如果你的峰拖尾的很厉害,那么在后一个峰中很可能包含有你的单抗分子。可能并不一定是三种异构体,如果可以的话,建议你做三次重复实验看看。
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问
原核蛋白pET32a诱导表达
Eason老歌迷
也有可能是分子伴侣。也可以你的目的蛋白有降解了。
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问
等电聚焦电泳
丁香清香
等电 聚焦 电泳的详细讲解:https://www.biomart.cn/experiment/430/465/471/16149.htm https://www.bilibili.com/video/BV15L4y1q7B1?spm_id_from=333.337.search-card.all.click
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问
WB目的条带应该有两条,但是只出来一条
麻黄连翘赤小豆
蛋白降解,可以重新提取蛋白,或者胶的质量问题,没跑出来,或者换个显影液
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问
白介素6的WB检测
还在陆上surg
这个要看你的实验设计,一般来说两个都可以检测。
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问
为什么敷出来的wb条带是这个样子的,会变成浅条带
麻黄连翘赤小豆
板子没夹好,再跑一次就行了,转膜不均匀,滤纸可以换一下新的排除滤纸的问题
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蛋白互作调控
Eason老歌迷
这个很好理解啊,细胞调控又不是光只有它两个蛋白,还有c还有d,可能c,d影响着a,b之间的这种作用呢
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有没有伙伴做短链脂肪酸干预细胞的,怎么配置里面的短链脂肪酸,比例是多少?
Eason老歌迷
短链脂肪酸(SCFA)又被称作挥发性脂肪酸(VFA),评价标准在于碳链中碳原子的数量,我们将碳原子数量在2-6之间的有机酸称为短链脂肪酸,其名称分别为,乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸。具体的配制方法,请参考这篇文献方法部分”短链脂肪酸影响B细胞表观遗传修饰以调节抗体应答‘’
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问
请问为什么IP的igg会出现目的条带呢
你好几和户
原因可能是没洗干净,随便再用几种其它抗体,可能也能检测到类似条带。
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问
猪FUT1基因上游非编码区-1150~50bp区域有启动子活性。这串数字怎么得到的?
bamboopiggy
是在基因组里,从你的start code开始,往上游数1150个bp为-1150,50是从start code开始往下游数50bp
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问
如何找孕激素受体基因亚型B的启动子序列?+331位点该怎么找😵
Eason老歌迷
去ncbi,输入孕激素受体基因亚型B,然后打开人种属的基因,点击mrna和蛋白,找到它的转录方向,转录方向上游2000个即为启动子序列。
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问
要看一株放线菌是否产生某种物质,从代谢通路方面如何分析
Eason老歌迷
你可以上kegg,metacyc网站上查一下这种物质所在的代谢通路,然后找一下上下游,然后进行验证。
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问
国标23527中蛋白酶活力计算公式中A1稀释液得活力是怎怎么计算来的?
Eason老歌迷
”蛋白酶K酶活力及杂质检测方法编制说明”这篇文献有详细讲解。酶活力单位定义:在蛋白酶的最适反应温度和pH 条件下,1 min 水解蛋白质底物释放1 μmol 显色呈福林试剂阳性的氨基酸的酶量,即为1个酶活力单位,以U 表示。酶活力计算公式:从L-酪氨酸标准曲线上读出样品的最终稀释液酶活力。样品的酶活力按下式计算:X :样品酶活力 (U/g );A :由L-酪氨酸标准曲线读出的最终稀释液酶活力(U/
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问
96孔板和6孔板药物浓度一样,肿瘤细胞抑制率不同
认真搞科研的小王
同样接种密度下,6孔板与96孔板总接种量是否相同?可能是由于6孔板细胞量较96孔板高,低浓度与中浓度剂量达不到抑制效果,应提高剂量
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问
关于中药有效成分提取后药理有没有合适的细胞实验?
认真搞科研的小王
看有效成分主要针对哪种疾病,选择合适细胞。推荐选择肿瘤细胞
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问
细胞凋亡实验对照组凋亡率非常高
认真搞科研的小王
细胞培养时间是否过长?可调节培养时间接种量是否合适,接种量过大会导致细胞密度过大进而导致细胞凋亡
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