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新手小白做WB,目的条带不清楚,还有趋势不对怎么回事?求帮忙

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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zmp1014

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5 个回答

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Eason老歌迷

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能看到模模糊糊好几个条带,背景比较脏,建议你可以封闭时间稍微延长,然后你的抗体特异性不高,可以换一个特异性高的试试。

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求求不要翻车啦

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如果你跑完电泳后,染条带,条带很清晰,说明出现问题是在转膜。可能是转膜的时间过短,导致蛋白没有转到PVDF膜上。转膜的时候,温度越冷,转膜效果越好,我通常都会在电泳时,把Western转膜液放进四度冰箱,这样能保证转膜的效果会好很多。

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麻黄连翘赤小豆

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  1. 条带背景太暗,可以考虑换个显影液或者封闭时间缩短
  2. 趋势不对不是技术问题,要么你没有配平,要么就是这个结果,要么实验做的不准
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balalaLy

有帮助

太多杂带了,一抗浓度需要稀释一下。表达趋势要同时对内参进行比较。

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bamboopiggy

有帮助

条带不清楚,可能是抗体不特异,趋势不对,可能是你的实验设计有问题

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