WB怎么做才是杂志要求的原始条带？

蛋白分子相近的一抗最好不要放一起混，后面说不清，距离远的可以。如果只能相近的就把内参跑完，洗掉一抗然后重新孵育那个一抗。主要还是看杂志要求，不能裁膜只是相对的，看你的抗体蛋白分子量

你的选项的C 是可以的，一定要保留原始数据，切膜一定要带至少一个条marker。不建议多次洗脱，重新孵育抗体

先孵目的蛋白，洗脱后再孵内参。不建议抗体混合后孵育，因为不能确保所有抗体每次都是只有一条特异性条带。

先正常封闭敷一抗二抗，然后开始洗脱，重新封闭敷下一个一抗二抗

转膜后整张膜，孵一抗，一抗可以混一起，然后洗膜，孵育二抗，然后洗膜，然后曝光。