多次稀释，内参基因（ct17、18）与目的基因（ct32、33）ct值相差大于10

扩增效率ok的话，都可以接受吧。相对定量，本来就是相对比较高低，

内参20左右是可以的，可能稀释倍数太大，适当减少稀释倍数；或者也有可能目的基因表达较低

我们做pcr都很少去考虑这个问题，只是单纯分析每次实验每个基因的ct值，溶解曲线那些，再有就是不同批次实验的可重复性。

内参在17-18，目的基因在32-33，这个结果是可以用的，不是非要ct值的差在10以内。

目的基因的Ct值超过30一般认为表达过低或者不表达，内参Ct值17、18是比较正常的

内参和靶基因Ct相差小于10是比较好，但不是每个样本都能满足，我个人觉得只要引物的质量还行，定量范围至少达到15~30，可以放宽到15，也就是30-15，即可仪要求某个样本的内参是15，靶基因是30，这样都在准确定量的范围，我个人觉得结果还是可信