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问
流式细胞术检测胞内因子
Eason老歌迷
可以参考这篇文献”检测靶向治疗后急性T淋巴细胞白血病的试剂组合物及其应用的制作方法”,讲的很详细。
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问
流式凋亡检测细胞不分群
Eason老歌迷
如果细胞不分群有两种可能,一是试剂的问题;二是细胞本身的原因,比如贴壁细胞在消化过程中产生损伤,导致非特异性染色,使得分群不明显。
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问
低内毒素质粒抽提如何降低RNA污染
Eason老歌迷
冬天提取质粒DNA的时候,直接把快速质粒DNA小量试剂盒放到恒温箱里温育(反正Buffer II冬天会结晶,就是需要提前温育的)到37℃后再使用。把实验室的空调开高一些,等温度升高后再做实验(记得有一年实验室一直不能重复出用户投诉的RNA污染结果,现在怀疑和空调温度打得太高了也有一定的关系)。不要急着做实验,把养好的细菌凉一凉再做(等个4~5个小时,因为细菌在不良的生长环境下会减少新陈代谢,RNA
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问
神经节细胞有没有培养方式?
Eason老歌迷
具体可以参考这篇文章“各类神经细胞的培养方式”,这篇文章里讲了很具体的神经节细胞的培养方法和注意事项。
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问
请教一下DMSO诱导HL60成中性粒细胞时,HL60每毫升细胞数多少合适呀
Eason老歌迷
一般HL60每毫升细胞数为1-2x10的六次方。这篇文献”DMSO诱导HL60转化为类中性粒细胞的实验研究”,讲的很详细。
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问
HL60诱导中性粒后用病毒转染
Eason老歌迷
可能是你的病毒浓度太高,毒力对细胞生长有影响。
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问
请问sh-sy5y用维甲酸诱导浓度
Eason老歌迷
你这个可能是药物浓度给高了,细胞发生了死亡,不贴壁。
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问
二代慢病毒质粒
bamboopiggy
你可以试试2:1:1,我一般用的是这个浓度,病毒的产量还可以。
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问
牙髓干细胞转染
Eason老歌迷
细胞转染实验的终浓度建议采用50-100nM,浓度过高导致细胞毒性。对于21 bp的siRNA oligo,有如下简单关系:2OD=6.0nmol=80μg。一般购买2OD包装的siRNA,可以采用DEPC水配成母液后使用前稀释,对于24孔板终浓度100nM可以使用50次。
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问
关于CRPC中AR和细胞系选择
Eason老歌迷
22RV1是来自异种移植(在阉割引起前列腺癌衰退又在其父亲的雄性激素信赖型CWR22嫁接后复发的小鼠中连续传代)的人前列腺癌上皮细胞系;22RV1细胞系表达前列腺特异抗原。PC-3源于一位62岁白人男性IV级前列腺腺癌患者的骨转移灶;有低水平的酸性磷酸酶活性和5-α-*还原酶活性。
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问
免疫荧光染色准确性高吗
是个幸运的小朋友
要看选用的抗体特异性怎么样,如果特异性好,准确性就高,因此选抗体就很重要,在选抗体之前可以多看几家公司的,看看他们的说明书及模式图,有些会包含用他们公司抗体的文章,就可以去那些文章里看看这支抗体怎么样,再做决定
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问
请问细胞产生的酪蛋白在进行饥饿处理过程中不同时间点,酪蛋白的浓度如何变化?
Eason老歌迷
问细胞产生的酪蛋白在进行饥饿处理过程中不同时间点,酪蛋白的浓度会逐渐下降然后在上升。
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问
有血清换无血清饥饿后,取0h细胞培养上清用ELISA试剂盒检测酪蛋白浓度,0h浓度应是?
Eason老歌迷
有血清换无血清饥饿后,取0h细胞培养上清用ELISA试剂盒检测酪蛋白浓度,0h浓度应是0。
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问
腹腔巨噬细胞(PM)提取
Eason老歌迷
有没有之前几次提的细胞的状态的图。我感觉只有亮的圆圆的才是PM。
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问
NETs诱导
Eason老歌迷
”PMA诱导人中性粒细胞胞外诱捕网(NETS)形成的方法及其结构的研究”,你可以看看祝元峰老师的这篇文章,写的很详细。
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问
蛋白质序列
Eason老歌迷
推荐你可以用biorender软件做 也可以用ps软件做。
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问
自噬抑制剂氯喹使用
Eason老歌迷
氯喹抑制自噬,你要看你加的另外一个药,是要再自噬抑制以后再起作用,然后再加加氯喹。
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问
慢病毒感染T细胞
dxy_gwrp7ndq
由于慢病毒对该细胞有一定的毒性作用,需要调整并降低感染的MOI值,并且在感染后4小时、8 小时、12 小时对细胞进行观察,若发现细胞状态变差时,则需要立刻对细胞进行换液操作,使用新鲜的完全培养液替换病毒感染培养液。
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问
求助 | 如何用肾上腺素收缩斑马鱼黑色素细胞呢
dxy_gwrp7ndq
把表皮细胞取下来,然后浸泡即可。
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问
尼氏染色图片处理
Eason老歌迷
上图中蓝色颗粒点计数即可得到神经元细胞数目。
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