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科研学霸天团,48小时有问必答
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问题求解答!!!急急急急!!
麻黄连翘赤小豆
跑蛋白时间久一些,我跑凋亡通路的磷酸化蛋白都是相近的蛋白,都能跑出来,自己制胶会好一些
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问
求助|有没有能将甲鱼的肝细胞染色方法?
dxy_gwrp7ndq
取肝组织,用Bouin’ s 液固定,石蜡包埋,切片厚8um, Harris 氏苏木精染色和伊红复染
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问
用Autodock之前需要准备哪些知识
你好几和户
需要安装autodock 和autodock tools,都是免费的软件,网上搜索一下按提示进行安装即可。准备蛋白和小分子的pdb文件PDB蛋白数据库网址https://www.rcsb.org/PubChem小分子数据库https://www.pubchem.ncbi.nlim.nih.gov/准备坐标文件---AutoGrid---docking---分析对接结果---analyze
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问
小鼠支持细胞TM4转染
Eason老歌迷
推荐你看看这篇文献”小鼠雄激素受体真核表达载体的构建及稳定转染TM4细胞系的建立与鉴定”,张晓燕教授写的。
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问
口腔内不产酸不产二氧化碳的细菌
dxy_gwrp7ndq
肉毒梭菌是既不产气,也不酸的。
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问
养细胞为什么会出现这种碎片一样的东西(HCT116
Eason老歌迷
可能是你的传代时机选的不好,细胞老化成细胞碎片。可能是传代垂悬没混匀,细胞成团生长。
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问
又是自闭的一天,怎么回事?真的走一步一个坑
此用户已注销
看样子是“反影”现象,可能是信号太强,就像是照相的时候曝光过度了,建议提高一抗和二抗的稀释倍数,缩短抗体孵育时间,如果是用ECL化学发光液的话换成低敏的会改善这种现象
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问
跑了大半个月,IRF3只跑出过一次,这是抗体有问题吗?内参还算可以?
Eason老歌迷
没看出来有条带,你转完膜封闭可以用丽春红染色看一下有没有条带,或者你延长一下封闭时间,背景太脏。
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问
小白想问问各位老师WB实验中内参是在每个泳道中都加吗,还是其他
简简单单的8872
不需要单独加,同一个样品中同时检测内参蛋白和目标蛋白
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小鼠耳蜗基底膜铺片染色
Eason老歌迷
哇,染的很好看!谢谢分享。学习到了
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问
我的目的带很弱,如何加强?
此用户已注销
这种情况下可以加定量或者一抗浓度。
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问
无蛋白质的区域具有高背景
此用户已注销
如果是所有的条带都这样,就是封闭的不好,如果是有的没有,就是抗体的饿特异性不好。
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问
求助:制备了一个纯化柱,请问DBC怎么计算
Eason老歌迷
要用蛋白的纯品。C0是指穿透X%时收集的穿透样品的浓度。
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问
请问细胞在无血清高糖培养基环境中是如何去合成酪蛋白的?大概能够合成多少酪蛋白?
bamboopiggy
你问的是乳腺上皮细胞吧?乳腺上皮细胞中氨基酸会介导的酪蛋白合成。但是具体合成多少,需要你自己做实验了。
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问
求助:用了新的蛋白上样缓冲液后,SDS没有条带
冷泉港蛋白
需要知道上样缓冲液各组分及其浓度和特点,undefined上样含有4 %的sds,四度会结晶,需要恢复室温并混匀后使用。你加的上样缓冲液估计不含或含有很少的sds,不足以解离细胞或提供蛋白前进所需要的负电荷了。
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问
胰蛋白酶分子印迹洗脱相关求助?
冷泉港蛋白
一、如果要从sds-page胶条拿到蛋白:蛋白与胶条之间相互作用力很弱,也不是离子相互作用,氯化钠作用不大。方法1.切胶,研磨,溶解。参考 蛋白胶条质谱鉴定的前处理方法2.进行横向电泳二、如果要从wb膜上拿到蛋白,就比较困难了,得考虑作用力了
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问
阻断ELISA
yaonan120
1.是不是阻断剂效果不好呢2.这种情况可以说是灵敏度的问题吧,标记那边是否可以降低标记量。3.降低空白,稀释液中加点BSA可以降低空白。希望可以帮到你
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问
竞争ELISA和阻断ELISA的区别是什么呢?
天一湖医者
竞争ELISA和阻断ELISA免疫抗体检测方法都可对小反刍兽疫病毒免疫抗体进行检测,在同一块96孔酶标板中,竞争ELISA和阻断ELISA可以分别检测43份、93份和90份样品,但是竞争ELISA的操作相对比较复杂,且用时较多;阻断ELISA的操作简单,用时少。如果同时检测100份样品,竞争ELISA和阻断ELISA的准确率分别为85%、88%和95%,因此阻断ELISA的准确度和重复性均高于其竞
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镍柱纯化,bufferA冲不出来杂蛋白峰
Eason老歌迷
是不是色谱柱的问题,色谱柱对样品具有很高的选择性,如果在气相色谱仪使用中选用了与所进样品极性不相符的色谱柱,或选用色谱柱与样品会发生反应,则有可能造成样品无法正常到达检测器,从而无法出现相应的样品峰。色谱柱选用不合适原因造成的不出峰,可以通过选用与样品相适应的色谱柱解决。
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问
请问多高浓度的SDS,Triton100,NP40可以导致细胞核破裂?
bamboopiggy
不建议用sds,因为里离子型去垢剂,裂解强度比较大,一般建议用triton100 ,或np40。NP40 0.0.5% 作用5min,可以裂解掉细胞膜。
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