实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问药物通过miRNA发挥作用，动物分组该咋整？

balalaLy

control组，药物治疗组，miRNA干预组，药物+miRNA组。

2 回答314 围观

问shRNA的引物设计及特异性问题

bamboopiggy

最好不要用，否则如果出现脱靶效应，你没法解释。

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问qPCR探针怎么设计

天一湖医者

（1）探针的 3' 端必须保护以防止其在 PCR 扩增时延伸。可以利用 3'-脱氧腺苷、2', 3'双脱氧核苷，插人 T 或猝火染料本身封闭 3'端的磷酸基。TAMRA 或另一个猝火物对 3'端的标记可利用氨基衔接物实现。也可利用氨基衔接物在合成后以寡核苷酸标记。该法适用于除 Cy3TM、Cy5TM、Cy5.5TM、HEX 和 TET 之外的所有染料。（2）探针的 Tm 值应当比扩增引物的

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问H9c2心衰造模

bamboopiggy

心衰模型是要用动物的，H9C2是大鼠心肌细胞，而心衰是心肌梗死或病理性肥大造成的。你单用细胞不好说明问题。

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问求助！请问老鼠膈下迷走神经切断术怎么做呀，有大佬能教教我吗？

bamboopiggy

迷走神经前干（左支）通常紧贴食管前壁并略偏左侧下行，一般在切开腹膜、显露食管后即可见到。将食管拉向左侧，于食管右后方疏松结缔组织内寻找迷走神经后干（右支）。

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问跪求免疫组化定量分析软件，求推荐，求分享

bamboopiggy

你用什么软件拍你的免疫组化的图片呢？一般机器有自带的分析软件。实在不行可以用image J

4 回答649 围观

问培养脑片

bamboopiggy

人工脑脊液，充氧，切片机缺一不可。

3 回答1029 围观

问用lipo3000包病毒，把AB液混合之后才想起来加包装质粒，能包成功吗

balalaLy

不一定，病毒包装的过程步骤太多，影响因素太多，所以建议还是按照常规的步骤来，不然到时结果不行还得排除各种原因

4 回答574 围观

问内质网应激相关蛋白

whilt-shirt

有可能是抗体原因，也可能是样本问题

3 回答429 围观

问病毒包装

府宅

产毒对293T状态影响很大，48小时产毒量应该是比较大的，而细胞还不至于大部分或几乎全部飘起来。时间越往后，漂浮的细胞越多，裂解的细胞也越多，产毒量减少

3 回答649 围观

问求助各位大神：U937怎么刺激贴壁？

天一湖医者

用佛波酯（PMA）诱导人单核细胞株U937 cell，使其分化为巨噬细胞。150-200nM，48小时。

3 回答764 围观

问如何用荧光显微镜观察悬浮细胞内离子

bamboopiggy

在盖玻片上加赖氨酸等促贴壁试剂，将悬浮细胞帖壁后，再进行观察。

3 回答324 围观

问外源基因插入质粒实验

bamboopiggy

不是吧，太短了也不好，并且太短了，可以直接合成。

4 回答493 围观

问冻存液中的成分会对细胞造成损害吗

bamboopiggy

你可以，操作完第一批，就先放冰箱四度，然后继续第二批，反正细胞冻存的原则就是要慢冻，从4度开始降温。

4 回答1055 围观

问ot-1小鼠有没有pcr鉴定纯合和杂合的引物?

bamboopiggy

这个小鼠是transgenic小鼠，没法鉴定杂合纯和，只能鉴定有没有，但是如果你有的小鼠配到一起，然后得到的小鼠再跟wt鼠配，得到的小鼠都是杂合子的话，可以间接认为小鼠是纯合的。

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问化学试剂废液需要分开盛放吗？

龍B7TJ

化学试剂废液需要分开盛放，分类处置

9 回答480 围观

问求教我的CNE2消化4min后部分飘了部分吹不下来是什么情况。

bamboopiggy

CNE-2是一种被指属于学术丑闻的细胞系，因为最初它被认为是一种源自低分化人类鼻咽鳞状细胞癌组织的鼻咽癌细胞系，但是通过分析后发现它与CNE-1细胞一样，都是海拉细胞和未知来源细胞系的杂种。---你最好别用这个细胞了。但是针对你说的这个情况，可能是你细胞养的时间太长了，吹不下来的地方，不是单层细胞了。

3 回答302 围观

问免疫荧光染色免疫荧光染色

balalaLy

做细胞免疫荧光一般用24孔板就可以了，完全不会出现漂的问题。你是用24孔的玻片放到6孔板中做的吗？这样的话就很难避免了。飘起来的话要么把它压下去，要么夹起来放到新的孔里面。两面长细胞不会有影响，染完色把一面的擦掉就可以了

4 回答477 围观

问实验室温度过高、过低怎么办？可以来空调吗？

bamboopiggy

在实验室监控项目中，不同的实验室对温湿度有不同的要求，大部分实验都是在明确的温湿度环境下进行的。在医学、生物化学、仪器校准、农业、建筑和电器等领域，实验室环境条件直接影响各种实验或检测结果，每项实验都需要准确可靠的监测仪器提供准确的环境参数数据。实验室需要合适的温度和湿度。室内小气候，包括气温、、湿度、气流速度等。对在实验室工作的人员和设备有影响。夏季适宜温度18~28摄氏度，冬季适宜温度16~2

4 回答777 围观

问MCAO造模染色，发现非栓塞侧半脑不够红是为什么？

bamboopiggy

1.你染色用的ttc，用多久了？最好新配吧。2.浓度你用对了么？一般是2%的。

1 回答404 围观

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