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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
如果流式细胞术检测到细胞是CD38+,但是CD138-,如何判断是否是浆细胞来源呢
Eason老歌迷
可以参看这篇文献”流式细胞术检测CD38、CD138在急性白血病、浆细胞骨髓瘤表型分析中的意义”,讲的很详细。
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问
免疫荧光: 冲洗时,用PBS和PBST效果会有差别吗?用PBST背景色会明显降低?)
冷泉港蛋白
一、会有差别,PBST会好些。二、原因在哪里?1.看下PBST比PBS多T,T是一般是TWeen 20.2.结构决定功能:TWeen 20是两性表面活性剂,一头疏水,一头亲水,因此它可以洗脱掉由疏水相互作用所产生的非特异性吸附,一定程度上降低假阳性。3.常用浓度:TWeen 20通常使用的浓度是0.1%,这与它的CMC有一定关系
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问
流式细胞术检测胞内因子
Eason老歌迷
可以参考这篇文献”检测靶向治疗后急性T淋巴细胞白血病的试剂组合物及其应用的制作方法”,讲的很详细。
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问
低内毒素质粒抽提如何降低RNA污染
Eason老歌迷
冬天提取质粒DNA的时候,直接把快速质粒DNA小量试剂盒放到恒温箱里温育(反正Buffer II冬天会结晶,就是需要提前温育的)到37℃后再使用。把实验室的空调开高一些,等温度升高后再做实验(记得有一年实验室一直不能重复出用户投诉的RNA污染结果,现在怀疑和空调温度打得太高了也有一定的关系)。不要急着做实验,把养好的细菌凉一凉再做(等个4~5个小时,因为细菌在不良的生长环境下会减少新陈代谢,RNA
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问
做免疫荧光时没注意到加液体时吹起了气泡,做的片子也不太行,是气泡的原因吗?
Eason老歌迷
可能有气泡的原因!捞片时有气泡、切片有皱褶没展平等原因造成附贴不牢或附贴时切片下气泡过多都有可能导致结果不行。
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问
人原代Tenon's囊成纤维细胞Vimentin染色
Eason老歌迷
染的很好看,谢谢分享啊,学习到了!
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问
神经节细胞有没有培养方式?
Eason老歌迷
具体可以参考这篇文章“各类神经细胞的培养方式”,这篇文章里讲了很具体的神经节细胞的培养方法和注意事项。
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问
请问sh-sy5y用维甲酸诱导浓度
Eason老歌迷
你这个可能是药物浓度给高了,细胞发生了死亡,不贴壁。
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问
二代慢病毒质粒
bamboopiggy
你可以试试2:1:1,我一般用的是这个浓度,病毒的产量还可以。
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问
关于CRPC中AR和细胞系选择
Eason老歌迷
22RV1是来自异种移植(在阉割引起前列腺癌衰退又在其父亲的雄性激素信赖型CWR22嫁接后复发的小鼠中连续传代)的人前列腺癌上皮细胞系;22RV1细胞系表达前列腺特异抗原。PC-3源于一位62岁白人男性IV级前列腺腺癌患者的骨转移灶;有低水平的酸性磷酸酶活性和5-α-*还原酶活性。
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问
免疫荧光染色准确性高吗
是个幸运的小朋友
要看选用的抗体特异性怎么样,如果特异性好,准确性就高,因此选抗体就很重要,在选抗体之前可以多看几家公司的,看看他们的说明书及模式图,有些会包含用他们公司抗体的文章,就可以去那些文章里看看这支抗体怎么样,再做决定
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问
请问细胞产生的酪蛋白在进行饥饿处理过程中不同时间点,酪蛋白的浓度如何变化?
Eason老歌迷
问细胞产生的酪蛋白在进行饥饿处理过程中不同时间点,酪蛋白的浓度会逐渐下降然后在上升。
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问
有血清换无血清饥饿后,取0h细胞培养上清用ELISA试剂盒检测酪蛋白浓度,0h浓度应是?
Eason老歌迷
有血清换无血清饥饿后,取0h细胞培养上清用ELISA试剂盒检测酪蛋白浓度,0h浓度应是0。
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问
腹腔巨噬细胞(PM)提取
Eason老歌迷
有没有之前几次提的细胞的状态的图。我感觉只有亮的圆圆的才是PM。
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问
NETs诱导
Eason老歌迷
”PMA诱导人中性粒细胞胞外诱捕网(NETS)形成的方法及其结构的研究”,你可以看看祝元峰老师的这篇文章,写的很详细。
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问
蛋白质序列
Eason老歌迷
推荐你可以用biorender软件做 也可以用ps软件做。
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问
自噬抑制剂氯喹使用
Eason老歌迷
氯喹抑制自噬,你要看你加的另外一个药,是要再自噬抑制以后再起作用,然后再加加氯喹。
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问
慢病毒感染T细胞
dxy_gwrp7ndq
由于慢病毒对该细胞有一定的毒性作用,需要调整并降低感染的MOI值,并且在感染后4小时、8 小时、12 小时对细胞进行观察,若发现细胞状态变差时,则需要立刻对细胞进行换液操作,使用新鲜的完全培养液替换病毒感染培养液。
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问
求助 | 如何用肾上腺素收缩斑马鱼黑色素细胞呢
dxy_gwrp7ndq
把表皮细胞取下来,然后浸泡即可。
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尼氏染色图片处理
Eason老歌迷
上图中蓝色颗粒点计数即可得到神经元细胞数目。
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