求流式检测胞内抗原时打孔液的配方？

加⼊10%Triton X 100，（破膜⽤）；加⼊1 mmol/L氯化钙，（问题所在），吹打均匀，孵育1~10min，测定荧光即Fmax值。

0.1% Triton-100 1ml/管, 室温10min。

酒精固定或Triton X-100，70%的酒精固定24小时即可，不再需要再打孔。如在PI染色测细胞周期或凋亡。可以试试0.1% 皂素

我比较喜欢用tritonx100。Triton X-100是比较强烈的穿孔剂。0.1% Triton X-100/PBS（再加0.1%BSA） 是比较温和一点。浓度可适当提高。作用时间以几分钟为宜。这个时间必须要自己试。时间长了细胞易破裂，短了则打孔不够。如果你要染胞浆，则时间适当短些，如果要染内质网或核内等，由于要对两层膜性结构打孔，时间当然会长一些。你也可以试试0.1% saponin。