• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        求助关于免疫实验抗原的问题?

        相关实验:免疫荧光技术

        user-title

        心细北方

        灭活内源性酶用的3%过氧化氢为啥要用甲醇配置,有的说可以保护抗原固定组织,要是有固定组织的作用,我把这一步放在抗原修复后封闭之前是不是会导致修复的抗原变性?

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        此用户已注销

        有帮助

        由于组织在甲醛或多聚甲醛在固定中,发生蛋白之间交联及醛基的封闭作用,从而掩盖抗原决定簇。通过抗原修复,使得细胞内抗原决定簇重新暴露,提高抗原检测率,常用方法通常使用高压加热修复,使用高压加热修复对修复温度和时间的把握十分重要,温度越高修复时间越短,温度与修复时间呈负相关。修复结束后注意室温冷却,让蛋白自然复性。另外,大家尽量使用过量的抗原修复液,防止高温液体挥发干涸,对切片造成不可逆影响。

        user-title

        冷泉港蛋白

        有帮助

        甲醇不能固定组织。只有一个羟基,很稳定,没法和蛋白的侧链发生反应。

        固定:简单来说就是化学交联。常用多聚甲醛的醛基和蛋白的氨基进行化学反应,实现分子内和分子间的共价交联。

        固定的作用:蛋白分子结构被固定住,不会再有构象的改变和分子移动,蛋白酶也不能发挥作用了,蛋白不会被酶解。

        user-title

        麻黄连翘赤小豆

        有帮助

        用甲醇配置过氧化氢更适合保护抗原和固定组织,但过氧化氢的作用是为了防止内源性过氧化物酶和生物素的干扰

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序