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问
蛋白质分子量很小,怎么做wb? 要验证某个细胞上有无该蛋白的存在,需要做免疫组化和western blot 试验吗?做这两个试验时的一抗和二抗可以共用吗?
周末也要努力呀
可以使用WB或者PCR验证一下,也可以搜索相关文献基础,小分子的WB需要减少转膜时间。
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问
用高效液相测红景天苷、绿原酸、迷迭香酸的含量,这些标准品用什么溶剂溶解好?多少浓度的溶剂溶解呢?
huarenqiang5
测迷迭香酸的含量一般用甲醇:0.1%三氟乙酸(40:60),流速1.0mL·min-1,检测波长330nm,柱温35℃。
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问
PMA诱导THP-1相关问题
huarenqiang5
PMA一般都是用无血清培养基。
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问
请问速眠新Ⅱ麻醉剂一般开封后能储存多长时间?
huarenqiang5
一般情况下开封后可以保存4周左右。
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问
关于WB蛋白质提取,如果是悬浮细胞或者说细胞死亡过多怎么提取(可以的话发下实验方案)?谢谢!
周末也要努力呀
悬浮细胞离心后直接加裂解液就行了,最好超声一下增加浓度
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问
PCR扩增不出来,该怎么改进?
土井挞克树
先排除一下降解问题,感觉是降解的原因所以扩增不出来
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问
蛋白质培养过后,蛋白质盐析的复原。
高山云初
注意蛋白质盐析后保管的环境,避免受热、紫外线、 X 射线、强酸、强碱、重金属(如铅、铜、汞等)盐、一些有机物(甲醛、酒精、苯甲酸)等。
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问
构建pre-miRNA过表达载体问题
高山云初
萤火虫荧光素酶基因和海肾荧光素酶基因,基因用LUC和pmirG没有什么区别。
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问
请问平板细胞克隆实验,一个孔铺多少细胞,如何给药
小小翻车鱼
在细胞克隆实验中,药物对结肠癌细胞的抑制作用通常会通过评估细胞生长、存活和凋亡等方面来衡量。以下是一些建议:1. 铺细胞的数量:根据细胞类型和生长速度,铺细胞的数量可能会有所不同。一般来说,在6孔板中铺2000-5000个细胞是一个比较合适的范围。可以先铺一个中等数量的细胞(如3000个),然后观察细胞的生长情况,根据需要调整细胞的数量。2. 给药时间:给药的时间取决于实验设计和目的。如果你希望了
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问
有人造NEC模型吗?可否交流一下。
高山云初
NEC的发病机制并不清楚,最令人困扰的是到目前为止NEC没有特异性的治疗方法,是一个难题。
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问
小鼠肾组织col i只有血管旁有显色是什么原因?
土井挞克树
染色的染剂时间不足,或者组织固定不足
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问
如何将GST标签添加至蛋白的C末端?
huarenqiang5
一般利用重组DNA技术插入到目的蛋白的C末端。
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问
为什么跑完蛋白总是靠近浓缩胶这一半胶脱不了色
huarenqiang5
考虑胶的浓度过高,建议降低浓度。
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问
组织蛋白酶酶切趋化因子实验步骤怎么做啊??大家
周末也要努力呀
组织蛋白酶酶切趋化因子实验一般分为以下几个步骤:1. 提取趋化因子:从细胞培养上清液或组织中提取趋化因子。2. 纯化趋化因子:通过某些分离纯化技术,如离子交换层析、凝胶过滤层析等,将趋化因子纯化。3. 制备底物:制备含有趋化因子底物的凝胶,如聚丙烯酰胺凝胶。4. 酶切实验:将纯化的组织蛋白酶加入含有趋化因子的凝胶中,进行酶切反应。反应后,观察凝胶中的趋化因子是否被酶切分解,从而判断组织蛋白酶对趋化
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问
关于细胞划痕能否预处理的问题
feixue7758527w
我觉得是可以的,预处理一下还是可以的,但是要注意细胞的状态和干预情况。
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问
为啥我的co-ip阴性对照有条带呢?
龙大人驾到
如果在共免疫沉淀(Co-IP)的阴性对照组中观察到条带,可能存在非特异性结合的情况。这种非特异性结合可能是由于实验条件、试剂或样品中其他成分引起的。以下是一些处理非特异性结合的常见方法:1. 优化实验条件:确保使用正确的缓冲液、温度和pH值等实验条件。适当的优化可以减少非特异性结合。2. 阻断剂:添加合适的阻断剂可以降低非特异性结合。常用的阻断剂包括非特异性蛋白质(如牛血清蛋白、鱼胶等)或非特异性
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问
NCBI引物特异性检测出现以下问题是什么原因?
loveliufudan
主要有以下几点可能原因:1. 引物设计的目标基因在NCBI的小黑麦数据库中没有存档记录。NCBI数据库中小黑麦的序列信息还不是非常完整。2. 引物的特异性不高,除了目标基因,也能识别其他非特异性序列。可以调整引物设计,增强其特异性。3. 目标基因在小黑麦中的表达丰度较低,NCBI中没有收录到这一基因的序列信息。可以考虑在更广泛的数据库或转录组数据库中检索。4. 引物设计的参数需要优化,如Tm值、G
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问
怎样肉眼估计培养皿中细胞密度百分比?
qtt0208
看视野中细胞与空白的占比,细胞占满一般视野就是50%,这个是大概值,如果要准确值还是建议消化下来混匀后用细胞计数板或者细胞计数仪
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问
肠类器官培养总是失败
刘小畅FV4X
同学你好,请问你现在培养有好转吗? 我遇到的问题和你类似,苦恼中…
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问
牙囊细胞培养求助
土井挞克树
这个不是牙囊细胞,细胞团可能是炎性细胞
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