实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问细胞传代第二天贴壁正常生长，第三天全飘起来了，可能是什么原因呀

Keven轩

血清添加浓度或量不足，或者是有细胞污染

6 回答2492 围观

问流式检测血小板活化实验方法和步骤。

静心观照

血小板活化检测靶点：CD41 或 CD61，CD62p，CD63；血小板活化检测标本：柠檬酸钠抗凝全血；推荐抗体组合管号 FITC PE1 Mouse IgG1 Mouse IgG12 CD41或CD61 CD62p3 CD41或CD61 CD63检测步骤抽取静脉血 2 mL，柠檬酸钠抗凝。血液采集后 1 小时内进

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问实验室的擦镜纸是做什么用的跟无毛纸什么区别

静心观照

擦镜纸使用长纤维的麻、纯棉或化学木浆抄造，抄纸时不加填料，不需要压光。纸质均匀、洁白、轻、薄、柔软，不掉毛、不掉屑；具有很高的表面强度和柔软性能。用于包装和擦拭精密器械的一种薄页型纸。适用于擦拭显微镜、照相机镜头镜片、电视荧屏、医疗器材等。

3 回答1545 围观

问PD0325901 使用浓度

huarenqiang5

PD0325901浓度非常低时(10 nM)也明显抑制携带BRAF突变的PTC细胞生长，且同样浓度时只稍微提高携带RET/PTC1重排的PTC细胞生长。

3 回答261 围观

问组织切片免疫荧光的表达量是看亮度还是看染色密度的？

huarenqiang5

组织切片免疫荧光的表达量一般情况下是看亮度，而不是看染色密度。

3 回答324 围观

问我的细胞养不了几天就会出现黄色的团块这是什么污染呢？

feixue7758527w

这个很有可能是离心后没有清理干净细胞杂质或者死细胞的，或者细胞状态不好，换一种培养基看看吧

3 回答3584 围观

问两个组别的同一目的条带在wb中位置不同（内参齐平）

科研小dog

两个组别，是细胞不同还是组织来源不一样呢？相同蛋白在不同类型细胞和组织，受到不同修饰或者是其他原因的影响，有可能分子大小是会不一样的，这就会导致目的条带不在同一个位置上。

3 回答1201 围观

问为什么全菌的蛋白条带总是糊成一片，不是清晰的条带？而且诱导的蛋白和纯化蛋白条带不一致是怎么回事，一个是纯化蛋白，一个是诱导后全菌

huarenqiang5

主要考虑可能是上样量过多或样品弥散导致。

3 回答408 围观

问构建进化树的序列是随便找的吗?

高山云初

当然不是随便找的1）在不同物种之间具有足够的变异性，以便能够区分不同物种之间的差异2）在不同物种之间具有足够的保守性，以便能够找到共同的演化关系。

3 回答501 围观

问细胞铺板选择什么培养基？我看有些师姐用不同的培养基，不太明白，如何区别完培，基培，无抗完培等培养基呢？

静心观照

DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12等都是应用非常广泛的基础细胞培养基。1.RPMI-1640 Medium：广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。2.Mini

3 回答1355 围观

问人工尿液配完之后放3-8度冰箱可以存放多久

sswei

人工尿液配完之后放3-8度冰箱可以存放6个月

3 回答348 围观

问鉴定到的蛋白与凝胶电泳图谱中估测分子量差异很大的原因？或者为什么SDS-PAGE胶上不同位条带的质谱鉴定结果中含有同一个蛋白？

huarenqiang5

由于体内或者体外因素，导致同一蛋白存在不同形式的修饰、剪切或者降解，从而形成凝胶电泳图中能够看到的存在差异分子量的蛋白条带。然而这些蛋白在质谱鉴定时会同时指向数据库中同一个、全长的、无修饰的蛋白理论序列。因此会出现凝胶电泳图中的蛋白分子量（实际分子量）与鉴定的蛋白分子量（理论分子量）不同的情况。

4 回答719 围观

问蛋白组学如何快速建立方法？如果给第三方公司做，成本很高。但是自己做建立方法又很难很慢，如何解决这两者之间的矛盾？

huarenqiang5

你可以先借鉴一下这篇文章，《蛋白质组学研究的基本步骤》。然后决定是给第三方公司做还是自己建立。

4 回答260 围观

问RNAi常用是脂质载体（效率太低）电转（毒性太大）病毒（效率加安全），能不能设计一些特异性连接的小分子蛋白辅助脂质连接或者其它法

huarenqiang5

使用 Lipofectamine 2000 在 96 孔板中进行 Stealth RNAi 或 siRNA 反向转染。

3 回答318 围观

问请问诸位老师，定量蛋白质组学的抗病毒天然免疫通路蛋白泛素化研究，最近有什么新的学科进展？谢谢

huarenqiang5

研究新进展，可以看一下这篇文章《Tankyrases inhibit innate antiviral response by PARylating VISA/MAVS and priming it for RNF146-mediated ubiquitination and degradation》，该研究使用生化纯化方法，首次发现VISA能够被Tankyrase 1 (TNKS1，PARP5a

3 回答315 围观

问LX-2细胞造模求助

feixue7758527w

我觉得你可以考虑一下TGF刺激作用的，是否考虑一下提高一下刺激强度看看。

3 回答582 围观

问B细胞V区突变检测

loveliufudan

首先，您需要收集小鼠的脾脏或淋巴结样本，然后进行单细胞分离和排序，以获得单个免疫球蛋白基因重组细胞（GC细胞）。接下来，您可以使用PCR或测序技术来分析V区的突变。这涉及到从GC细胞中提取DNA、扩增V区的DNA片段，并使用测序方法来确定突变的位置和类型。最后，您可以进行数据分析以解读突变结果。

3 回答487 围观

问流式分选特定B细胞求助!

土井挞克树

接下来用流式分选，然后做免疫荧光。

4 回答787 围观

问人外周血PBMC培养

dxy_p7z7tnt

你好，想请问一下你是从人的血液中分离出来的PBMC吗？？血液这个货号能推荐一下吗

3 回答13327 围观

问如何可以调齐内参，总是调不齐，有什么好方法吗？

n0y0j7

首先测浓度测准，然后每次实验条件一样，包括电压电流，用的夹子，滤纸张数，等。

5 回答582 围观

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