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做SDSPAGE跑蛋白胶,我的基因预测出来的蛋白是10kda,用的载体是pgex,26kDa,跑出来的胶图是35kda左右

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_iebbil42

可能是因为基因表达,然后没有终止子,连带着载体一起表达了吗,如果是的话,有什么解决办法没有,或者不解决会影响蛋白吗


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3 个回答

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dxy_fd6s0pm7

有帮助

没有终止子会使后续基因也跟着目的基因一起表达出来、可以利用分子生物学的方法如无缝克隆将终止子给加到载体目的基因的末端。

其次可能是因为目的蛋白有翻译后修饰、如果目的蛋白被修饰或者说有二聚体等形式的存在也会导致目的蛋白比预期大的情况、可以查找文献或对蛋白进行预测、进一步了解要检测的目的蛋白

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土井挞克树

有帮助

可能是载体表达了或者形成聚合体了,可以加沉默基团看一看

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高山云初

有帮助

会把载体上的所有基因表达一遍,当然,基因本身不受影响。

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