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qPCR熔解曲线都是乱的,荧光信号强度也不高,9个孔4个过不了阈值没Ct,为什么?
Eason老歌迷
可能是反应体系污染,结合NTC和NRC结果确认污染情况,建议从水,引物,酶和环境等逐一排除污染。也可能是试剂暴露在强光或高温下导致试剂失效,建议用新的试剂做对比实验。或者是仪器长时间未校准,建议定期进行仪器校准保养可能是。耗材与仪器不匹配,需确认对应仪器对耗材的要求。
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问
中文文献方法学问题
Eason老歌迷
这个是属于回顾性分析。回顾性分析一般采用随机抽样的方法确定所要分析病例的范围和期限,使观察条件、病例诊断标准、病例收集标准、疗效判定标准等一致,尽量减少误差。回顾性分析的科学性虽然不如其它研究方法,但是病例资料比较容易获得。
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问
请教蛋白表达时如何使用溶菌酶
冷泉港蛋白
科研一般用超声裂解,比溶菌酶效果好。1.超声300W,超声3秒,停3秒,10分钟。应该会清亮了。2.每克菌体加20ml-50ml PBS3.变幅杆好像是选6号的吧
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问
AML12诱导脂肪变相关问题
Eason老歌迷
你下次提蛋白之前可以观察一下就是细胞,如果都死了,那蛋白也提不出来。
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问
请问怎么给药物加标签?
Eason老歌迷
你的思路是对的,可以给药物加标签,然后通过IP找到作用的蛋白。给药物加标签可能需要你从合成就特殊订制。
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问
序贯法研究药物的ED50时,相邻剂量梯度如何设置?
Eason老歌迷
可以参考这篇文献”序贯法和点斜法测定右美托咪定治疗麻醉后寒战ED50的研究”讲的很详细。
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问
大鼠IVF有人做过吗,受精率很低就一两个胚胎发育2-cell后续就卵裂了?有大佬做成功过吗?
你好几和户
不好成功,大鼠IVF精子存活时间较长,精子的存活时间较短,胚胎可以发育到囊胚(64~128-cell)胚胎有2-cell阻滞现象细,胞不易死亡,IVF容易畸形,且第二天2-cell容易死亡。
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问
重组蛋白处理细胞相关问题
Eason老歌迷
开盖之前一定要离心。先通过离心操作,将冻干粉收集于管底,避免损失很浪费。快速离心10000-12000 rpm,30 s;若没有高速离心机,3000-3500 rpm,5 min。离心之后,向冻干粉中加入提供的复溶buffer,用枪头轻轻吹打混匀,重悬至浓度不低于100 μg/mL。(比如规格为100 μg的重组蛋白,对应加入1 mL的复溶buffer溶解)。用复溶buffer直接溶解的细胞因子或
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问
流式测凋亡方法的区别?
balalaLy
tunel法容易有假阳性,做免疫荧光比较多,另外两个做流式比较多
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问
文章修改稿说明
Eason老歌迷
文章修改时是只要修改过的地方都要标红。删掉的地方还是需要用划线标记。改过的地方需要在稿件中标记修改说明。
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问
frontiers in chemistry 什么时候能收到proof
Eason老歌迷
proof是清样校对,一般在文章录用后的1-2个月收到。这是作者最后一次核对自己文章的机会,要仔细确认。一般不能加快,是出版社那边再校对。
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问
求教回顾性分析课题设计
Eason老歌迷
对于回顾性分析课题的设计,你可以参看这篇文献”回顾性调研促进课题研究设计方案的形成”,讲的很详细。
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问
请教一下大家有关于蛋白表达的问题
Eason老歌迷
基因说表达,蛋白只能说上调下降
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问
WB 生物素化后非特异性显色
Eason老歌迷
生物素化出现非特异性显色,感觉可能是你抗体选的是多抗啊。
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问
求助|人胚胎干细胞出现不明黑点,这是污染吗?
Eason老歌迷
是发生细胞污染了,感觉像是真菌污染,
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问
心肌梗死心脏取材太多,怎么处理比较好
Eason老歌迷
多聚甲醛固定,然后放—80℃冻着。
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问
IGF1R是心肌细胞中的多还是成纤维细胞中的多?
Eason老歌迷
你可以在gepia,ncbi上查看它在心肌细胞还是成纤维细胞中的表达量,对比。
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问
求助,人骨髓间充质干细胞成骨诱导实验
Eason老歌迷
看着不像是诱导成功,更像是细胞老化了啊
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问
在哪种情况下要同时进行western,southern,northern三种杂交分析?
Eason老歌迷
你可以参看这篇文章“southern、northern、western杂交应用”,讲的很不错。
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问
免疫组化实验中的抗体需要分装保存吗?
Injector2016
-最好是分装了,分装到0.6ml或PCR管里,避免反复冻融和污染
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