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刚提的蛋白,为啥会这样?
哎呀呀呀呀哎
未破碎好/loading不行/蛋白浓度太高稀释度不够?
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问
农杆菌侵染植物,污染和农杆菌如何区分
Eason老歌迷
一般很少有农杆菌污染的,你一般一次性接种农杆菌不要太多,还有就是可以在共培养时在愈伤和培养基间放一块滤纸,抑菌,减少污染。或者是你可以用0.1M的灭菌甘露醇去洗菌,效果也不错。
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问
石蜡切片昆虫组织如何固定在载玻片上?
Eason老歌迷
你可以看看这篇文献‘’石蜡切片常见的脱落原因及预防 ‘’,讲的挺好的。如果很容易脱离,可能是脱水、通明缺乏,致使白腊不能浸入牵强切出的片子,脱蜡时缩短,入水或染色后又膨胀,因而易掉落。也可能是脱水、通明过度,浸蜡时间过长或温度太高,引起安排缩短硬脆,导致切片不完好,染色时导致掉落。
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问
悬浮细胞用T25瓶养,如何分布均匀
whilt-shirt
先将细胞收集好后离心,然后用培养基混匀,种瓶后画8字
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问
小鼠眼眶后静脉丛取血求问
Eason老歌迷
小鼠眼眶后静脉丛取血,一次也就能取0.2-0.3ml。离心时在4度,离心1500rpm,5min即可。
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问
求助 我插入的目的片段是1000多的,但是PCR完跑胶条带位置在800-1000左右,而且感觉拖带严重,这是为什么呀
Eason老歌迷
如果你插入的是1000多,但是pcr跑完是800-1000,可能是发生了dna断裂或者是你酶切的不对。而你的电泳缓冲液浓度过高,或者跑胶的电压过大都会导致拖尾现象。
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问
非药物临床试验
Eason老歌迷
非药物的临床实验分组还是依靠一些指南里给出的疾病分期来分组的。比如说癌症分期就是是根据癌症发生的程度将癌症分为几个不同的时期。医生会借助X光、实验检查、CT扫描、核磁共振、活组织检查等手段来看癌症发展到了哪一时期,需要考虑的因素包括:肿瘤在身体什么部位,有多大,是否转移,癌细胞类型和异常程度。常见的分期有TNM分期,数字分期就是你说的stage,扩散位置分期。就拿你说stage来说(癌症零期(St
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问
有人投过中国临床药理学与治疗学吗?这个刊快吗?
Eason老歌迷
是叫《中国临床药理学与治疗学》吧,我投过,挺慢的,建议你慎重考虑。
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问
最近跑western blot 最后显色marker都没有,膜上一片空白
bamboopiggy
那你的蛋白显影还有吗?如果只是marker没有,可能是ph值的问题。孵育总蛋白后marker没有,那你内参条带的marker还有吗?如果所有marker都没有,可能是marker降解了
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问
麻烦大家帮我看看,这个细胞有没有污染
Gx41
看起来不像污染。可以关注一下培养基颜色及清澈度,黄色混浊考虑污染可能
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问
用4-OHT进行体外敲除
Eason老歌迷
我推荐你参看几篇文献,讲的比较全面“4-羟基他莫昔芬对体外培养前列腺平滑肌细胞的作用”、“The Hippo kinases LATS1 and 2 control human breast cell fate via crosstalk withERa”。文章方法里都讲了如何利用4-oht来做体外敲除的
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问
最近做实验结果一直不佳,想来求助各位有经验的大佬
Eason老歌迷
你要是做间接elisa实验,一定最好就是抗原蛋白质浓度不应超过 20 μg/ml,因为这将使微量滴定板上的大部分可用位点饱和,确保样品所含抗原的浓度在抗体检测范围内,不然实验结果不佳。一般构建肿瘤模型,裸鼠主要保证周龄,周龄小一点好。可能是细胞状态差,活力不好,或是肿瘤细胞不易成瘤,需加入Matrigel辅助或增大接种量或更换细胞系。也可能是小鼠周龄太大,或小鼠免疫排斥,建议更换免疫缺陷程度更大的
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问
做的甲醇水溶液组织提取物,想用冻干机冻干成粉末,但液体被真空吸走了,该怎么办?
bamboopiggy
先用氮气将液体中的甲醇充分吹走,剩余的液体再冻干
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求助去除肝组织代谢提取物中的甲醇
丁香一方
1.通过蒸馏,将甲醇提取,必要时调整气压蒸馏。2.归根结底是要冻干粉末,可以加入溶液稀释甲醇浓度,调节冰点。3.通过调整气压,来调节肝组织代谢提取物的冰点。
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问
刚刚接触免疫共沉淀,向各位老师请教这个图怎么看,谢谢!
balalaLy
MG132是防止相互结合的蛋白解聚,his-ub是加了his标签的泛素化蛋白,主要看后面两个孔的IP条带,usp26可以抑制b-catinin的泛素化
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问
16kD的蛋白湿转条件
dxy_nzwl73o5
100v 一个小时,恒压条件下。
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问
信号通路相关(细胞)
Gx41
根据相关文献确定TGF处理细胞最佳时间,处理相应时间后提取蛋白检测你的目标蛋白。
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问
看文献的时候看到了很多免疫共沉淀实验的图,想向各位老师学习一下怎么看这个结果图,谢谢!
balalaLy
图1是用usp26去拉蛋白,flag有条带,说明usp26可以把flag拉下来,即二者有结合,flag是额外加上去连在catenin下游的,usp26实际上是跟catenin结合。图2是反过来用flag去拉可以把usp26拉下来,反向证明usp26与catenin有结合。
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问
求问一下大佬,养的293t不贴壁是为啥
dxyc42u
培养皿不合适、培养基不合适(比如没有血清,或者血清错误)等,都可能出现这种情况。
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问
涂菌12小时后,细菌成一片,原因为何
慈悲为怀医德为镜
有可能是浓度太高了,建议稀释一下试试
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