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        16kD的蛋白湿转条件

        相关实验:免疫组化

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        dxy_kntx84v

        各位大神 我要做iba1 蛋白16kD和GAPDH内参。现在配的胶是5%浓缩胶 12.5%的分离胶 。请问湿转的条件怎样比较好

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        8 个回答

        user-title

        dxy_nzwl73o5

        有帮助

        100v 一个小时,恒压条件下。

        user-title

        bocardio5927

        有帮助

        胶的浓度没问题,350mA 恒流转1-2小时都可以,0.22微米的pvdf膜

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        可以用200mA转膜1h试试。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        胶的浓度ok,用0.45um的nc或pvdf膜,300mA,转1.5h,ok

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        湿转的话200mA恒流转45min-1小时就可以了。

        user-title

        dxy_kntx84vuser-title

        我用了200mA转了45min 内参稍微有点少 但也转上去了 谢谢你

        user-title

        你好几和户

        有帮助

        一般用12%的胶,当然15%的胶也是可以的,只要你不嫌慢。电泳和转膜都是按常规条件,比如电泳电压80v-120v,只要不跑到太下面。转膜,小孔径的pvdf膜一般不怕转膜转过头,一般用250mA 2小时。

        user-title

        此用户已注销

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        我用的Bio-Rad的湿法转移,转膜的电压是100V,1h后即可

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        12%的胶可以跑了,pvdf膜72v 1.5-2h

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