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脑定位注射 前囟确认
dxy_gwrp7ndq
两条脑缝相交的部位,取中间的点就可以了
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问
免疫组织化染色实验要注意哪些事项?
秋秋欣欣
1、防止假阳性与假阴性,防止操作中的污染;2、规范操作时阳性与阴性对照选用2种以上同类抗体。目前肿瘤均为相关抗原,特异性不足,多种同类抗原可提高阳性率;3、正确评价免疫组化的结果,其结果受抗体、特异性与质量、操作、标本固定等多种因素影响;4、合理选择抗体,既要符合设计要求,又要价廉物美;5、待检标本抗原保存要好,要求快速、新鲜、充分地固定,福尔马林液固定标本要做抗原修复。
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问
WB检测LC3和p62均下调,但免疫荧光定量分析Lamp1也明早下降
bamboopiggy
p62降低,LC3 II/I升高一般表示自噬增高,你看看的LC3是I高还是II高?要看二者的比值。
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问
生存分析疑问求解
汤姆卜丽波
你手算用的公式和程序设置的公式可能有些出入
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问
Graphpad prism9 怎么做出来下面的图,横坐标只显示两个变量,而不是每个柱状一个
balalaLy
可以的,新建的时候选择group,录入数据时,细胞分组输入到左侧纵列表,实验分组录入横向group列表
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问
求助:WB转膜(0.45)后MARKER变淡很多
dxy_ql0su1t7
分子量大的蛋白和marker需要转时间更长才能到膜上,0.22的膜孔小,适合小分子蛋白转膜,如果有大分子和小分子同时转膜建议分开转
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问
far western blot的marker跑出来只有一条条带怎么回事啊?
dxy_ql0su1t7
上样的样本是否经过反复冻融?是否有降解?可能需要新的样本来重复实验
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问
感受态细胞的转化,摇菌摇太久?
balalaLy
转化后摇菌是为了复苏感受态,一般摇40分钟左右,不过我做一般的转化是不摇的,直接涂板。摇太久会有杂菌或者减低转化效率
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问
PCR的对照组和空白组有什么区别?
申东熙老伯
对照分为阴性对照和阳性对照。空白对照是阴性对照的一种,指把样品换为水。阳性对照是指一定可以P出来的,结果可信的对照。
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问
关于PCR检测自动化问题
汤姆卜丽波
就是因为采样这个过程无法达到自动化呀,因为存在个体差异,全自动的话成本太高了
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问
这个是引物二聚体吗,cDNA,引物刚用过,pcr程序一样的,没问题,是什么操作还是其他原因导致的吗
bamboopiggy
不管是不是引物二聚体,这个数据不能用。你提的rna的质量如何?还有你反转的cDNA是第一次用么?如果是第一次用可能是cDNA质量不好。
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问
蛋白免疫印迹实验目标蛋白和说明书上的分子量差异很大怎么办?
dxy_ql0su1t7
可能有多个转录本,如果多次跑出来的都是一个分子量的话建议按照实际操作出来的分子量为准
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问
小鼠肺组织蛋白提取?
bamboopiggy
不锈钢珠是提蛋白的,氧化锆珠是提rna的,一般是1ml,加一大两小3个珠子。
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问
我的PCR内参有CT值,目的基因测不出CT值,请问是什么原因(有图)
Topmicro
你查到的是对的,重新设定一下阈值看看,就是将选取的荧光强度调高。
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问
转染实验开始前,需要对转染试剂本身对细胞活性的影响进行检测吗?
bamboopiggy
如果第一次用,还是检测一下比较好,否则正式开始实验了,如果有问题,就会措手不及。虽然一般转染试剂的毒性都不是太高。
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问
请问大佬,我做自噬相关的通路
bamboopiggy
你敲除A,自噬升高,说明A是抑制自噬的,你加入自噬抑制剂,如果在A的上游,那可能A有改变,否则不会有改变
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问
特异性基因敲除鼠鉴定问题
bamboopiggy
你cd4上的特异性敲除,用鼠尾是鉴定不出来的(只能鉴定出是f/f,还是f/+,没法鉴定是否敲除了),你最好直接拿你跑wb的组化,取一部分进行鉴定。
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问
求助 | 大鼠灌注的时候灌pbs的时候流速先快后慢,对结果有啥影响,是哪里出问题了呢
bamboopiggy
可能是哪里堵了,如果pbs灌注不充分,会有血液残留,影响将来的组化结果。
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问
利用CRISPR进行基因敲除能不能敲除第一个外显子即ATG所在的外显子
bamboopiggy
这个技术上是可以敲掉的,但是一般进行基因敲除会从二号外显子开始进行。
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问
各位大佬,如果大肠在一个培养箱培养,会不会交叉感染?为什么食品粉碎机和手部大肠会来回感染?怎样清理干净?
dxy_n4jex0k8
培养的时候可以用封口膜封好,培养结束后用酒精擦拭一下,用完的器具和台面可以高温灭菌和照紫外30min以上。
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