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疑似细胞污染,但是细胞库存很少,如何拯救
汤姆卜丽波
把细胞多洗几遍然后转到6孔板里,让它长,然后再挑污染少的或者无污染的消化传代,直到没污染为止,其实很难拯救
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问
WB检测不到多种细胞内BRD4的表达
汤姆卜丽波
这种情况你可以把显示不出来的再一起做一遍,就能看出来到底是表达不高还是不表达
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问
提RNA之后,跑胶如图,想问一下是什么原因呢?(maker是一万的)
Dr_劉医生
从图片看用的是Trizol沉淀法跑的电泳图,电泳条带都没分开,marker浓度太高了,一般超过5000ng/UL就很难跑开;可以适当减少上样的量或稀释浓度
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问
跪求大佬们的回答
汤姆卜丽波
可以试试扩大样本量,也就是专家数量
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问
样本量计算
Dr_劉医生
做的是横断面还是病例对照研究,讲公式的话估计一下讲不清,可以直接用PASS软件计算;首先样本量的计算是非常基本的,买本统计学教材看下就能明白;简单举例说一下横断面研究根据灵敏度和特异性计算样本量的方法(见文末图)此外,说几个影响样本量计算的重要参数如下:①研究设计类型(如横断面研究或随机对照研究)②结局指标类型(二分类变量或连续变量)③结局指标的预计值(敏感度或特异性或平均值或AUC)④容许误差⑤
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问
OA造模的LO2细胞,用油红O染色,正常组出现假阳性是什么原因
灵枢天问
一般染色过程中可能会产生携带污染,就会导致假阳性,分开批次染色试试
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问
western操作问题
申东熙老伯
洗膜的时候可以放在一个盒子里,孵二抗的时候取决于你的两个蛋白抗体是什么抗什么。
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问
同一种细胞外泌体miRNA芯片测序结果一样吗?
cq2019
首先你要清楚这个外泌体在除对B细胞以外的细胞是否发挥功能作用以及作用的大小?相信类似的报道应该有据可循,要不然盲目做没有创新可言
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问
尾静脉注射siRNA 有一个 inVivo ready siRNAs是什么意思
灵枢天问
就是说你这个注射用的siRNA.是标准化的用于动物实验体内的
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问
6-ohda用生理盐水配,配完是橙色的能用吗?而且过了一天后发黑了
灵枢天问
刚配完就是橙色的么,你的粉末是什么颜色,有可能是粉都氧化了
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问
尼氏染色
汤姆卜丽波
可能和仪器拍摄也有关,你试试调整一下参数
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问
求助小鼠T细胞p-STAT3及STAT3流式
Dr_劉医生
可以参考一下这份材料“流式细胞术检测外周血白细胞内的磷酸化STAT3”,数据库都能下载
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问
就想问一下商品化抗体的分子量,因为要选超滤离心管的大小,但是我真不知道回答的是什么意思
灵枢天问
回答就是说你的这个抗体有两种可能的大小,一个是33一个是20你可以按照这两者买超滤离心管,分别试一下
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问
蛋白棕榈酰化
Dr_劉医生
之前听过拜谱的工程相关的讲座,棕榈酰化修饰蛋白组现在也是比较前沿的技术,相信文献你也找到过,我也附上几篇综述;主要因为技术路线都涉及质谱等仪器,导致很多实验操作都很难,可以去咨询相关生物科技公司,外包或者请教他们一下;参考文献:[1] Main A, Fuller W. Protein S‐Palmitoylation: Advances and Challenges in Studying a
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问
枯草芽孢杆菌电转
你好几和户
有以下方案,老师对照一下枯草芽孢杆菌电转化方案1 感受态细胞的制备1.1 从新鲜培养的平板上接种一单菌落至3 ml B2液体培养基中,试管(17×100 mm)。1.2 250 rpm,37℃培养过夜(16 h)。1.3 接种1.5 ml过夜培养的种子至150 ml(装于1L的三角瓶中)新鲜的B2培养基中,200 rpm,37℃培养,至菌数达到~1×108 cells/ml。1.4 将菌液冰水浴1
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问
小鼠结肠癌造模
灵枢天问
我们一般是5-7w,c57.第1天小鼠腹腔注射8ms/ kg AOM,两到三天后饲喂(1.5%)DSS1周,之后改为正常饮水一周为一个循环,大概循环一个月
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问
这个图怎么看哇,有人会吗
bamboopiggy
这个你要综合看文章和figure legend,看意思是说,蓝色的线代表的是WT加IRF8 OE的细胞的vextor,而绿色的是wt细胞加IRF8 OE的细胞
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问
老师们,请问,人外周B淋巴细胞和人B淋巴母细胞有什么区别吗?
cq2019
区别肯定是有的,外周B淋巴细胞肯定是淋巴结中B细胞经运输到外周血分化才形成的;而人B淋巴母细胞是源于并存在于淋巴结中的,其分化强度不高
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问
细胞细菌共培养
汤姆卜丽波
按照你自己细胞的状态来调整细菌浓度,做个预实验找最适浓度
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问
无缝克隆不长菌怎么办?救救孩子吧做了一个多月了
bamboopiggy
1.你是把pcr后的产物直接进行测序了?那只能说明你pcr没有问题,不能说明已经连接成功。除非是你连接以后的产物,跨接头pcr测序正确,才能说明已经成环。2.你构建的质粒确实有点大,你转化的时候,为什么不把连接产物全部转化了?而只加了2ul?建议你把连接产物全部加到50ul的感受态里面,进行转化。3.如果你长出菌落来,你可以考虑菌落pcr试试,如果跨接头测序正确,说明已经成环。
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