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网药加实验
汤姆卜丽波
《COMBINATORIAL CHEMISTRY & HIGH THROUGHPUT SCREENING》1.339,4区
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问
FOXO1蛋白分子结构
汤姆卜丽波
已知蛋白的话看它的结构可以上蛋白结构数据库PDB里看
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问
qPCR产物长度会影响Ct值吗
灵枢天问
qPCR扩增过程中,扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的扩增循环数(Cycle Threshold)。C代表Cycle,T代表Threshold。简单讲,Ct值就是qPCR中起始模板扩增达到一定产物量时,所对应的循环数。所谓“一定产物量”后续作进一步解释。和产物长度没关系
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问
western blot跑胶时样品涣散
汤姆卜丽波
上样量估计有点大,这种情况浓缩胶就该多配一点
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问
求助!!用ova蛋白做SDS-PAGE跑不出条带是什么情况
汤姆卜丽波
也不太可能一条都没有,是不是你操作过程中蛋白降解了
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问
wb结果成这样是什么原因呢?一共4个孔,第二个孔条带很弱,其他孔都不成条带,要么是黑坨坨,要么就像第四个孔条带只有半截
bamboopiggy
感觉你第三个孔很好,第一个孔是蛋白浓度稍微有点高,成团了,二应该就是表达量低。但是四可能是你转膜没有转好。
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问
miR的熔解曲线有问题
bamboopiggy
这个可能是你加样不稳定造成的,你最好把所有的样品和引物的mix混匀了,然后加样确定一定加进去了。
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问
引物设计时,GC含量过低提高不上去怎么办
bamboopiggy
你可以考虑酶切位点以及保护碱基里面多加几个GC就好啊。
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问
各位大神!做免疫荧光细胞染色的时候,最终拍照的时候,我们除了保证曝光时间还有光照亮度统一以外,还要统一什么?
balalaLy
看你使用的显微镜有哪些参数是可以调的,反正都要一致。先大概看一下哪组的荧光比较明显,以亮度低的未基准设置一组曝光参数,以亮度高的一组设置一组曝光参数。就是拍两组不同曝光参数的图。
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为什么我的WB跑的时候是波浪!
lagrimaOI9K
制胶不均匀,有没有可能,板子没刷干净呀~可以考虑浓缩胶稍微多一点
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问
求小鼠肝脏组织p-AKT上样量参考!
汤姆卜丽波
按照正常上样量加就可以了,不用多加
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问
Nrf2
bamboopiggy
氧化应激被认为是多种神经退行性疾病的发病机制之一,在疾病的发生发展过程中起重要作用.核转录因子E2 相关因子2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)是内源性抗氧化防御系统的关键调节蛋白,在氧化应激条件下核转录因子Nrf2 发生核转位,与抗氧反应元件(antioxidant response element,ARE)结合,启动下游大量的抗
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问
qPCR用两个内参基因
灵枢天问
你可以根据你的样品,选择表达稳定,Ct也比较合理的内参和实验组一起统计
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问
oligo的应用
灵枢天问
和引物设计一样的,先把你的序列贴上去,然后根据需求设置你的要求,然后search选择探针设计,再验证一下就可以了
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问
免疫组化平均光密度值
bamboopiggy
你应该圈出阳性的区域,然后算光密度值,否则虽然有阳性,但是平均下来,可能会低。
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问
碱基配对知识询问
灵枢天问
1.荧光dUTP与dATP配对能力更强 2.荧光dCT与dGTP配对能力更强 3.荧光dUTP与dATP的配对能力比荧光dCTP和dGTP配对能力更强 4.这方面内容的文献你要找互补配对的综述来看
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问
泛素化实验问题——泛素化条带不均匀
灵枢天问
这看起来像是显影剂没铺上或者转膜没转到
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求教氯化钴制作缺氧模型
灵枢天问
曾经看到过一篇文献Western Blot显示CoCl2浓度为200μmol/L时, HIF-1α、Tau5蛋白表达与对照组相比差异有统计学意义。可以测HE染色,cck8或者wb都可以看到缺氧模型构建好了
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问
求助贴,请问人体组织的基因测序结果能否使用动物模型进行验证?
灵枢天问
基因相似度是无法作为评判标准的因为个体差异就很大了何况是种间差异,但是你可以试用一下动物实验
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TM3小鼠睾丸间质细胞培养
灵枢天问
长不起来么。Tm3相对来说长得快但不好养,你拿到细胞的时候怎么处理的直接冻存么,养了几代存的,有可能是当时细胞状态已经不好了
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