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问
买的试剂盒说紫外交联120mJ,但是交联仪的参数是mJ/cm2,可以直接理解为120mJ/cm2吗?
土井挞克树
应该不是的,交联120mj的实际应该到不了120mj/cm2
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问
请问为什么结果总是残缺不清楚?
土井挞克树
胶不延续,重新配胶改变一下电离度试一下
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问
不是消化酶消化下来之后需要用不含血清的培养基终止消化吗?
ZIWENHUA
消化酶只是媒介,不用绕弯路,直接离心即可
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问
质蛋白核蛋白各组上样都是10ug。请问这个β-catenin的核质比应该怎么算?应该怎样均一化?
bamboopiggy
读取灰度值,然后胞浆三组先都和各自内参比,胞核也是先和内参比,然后用得到的比值,再每组比。得到的数值,除以ctrl组,就可以了
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问
如何从血液中提取出T原代细胞?
土井挞克树
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。
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问
中药灌胃浓度换算如何计算
麻黄连翘赤小豆
是对的,一般都是按照体表面积算,不过实验一般有低中高浓度,建议再多加几个组
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问
细胞MDA检测时要裂解多久呢?
土井挞克树
一般细胞裂解10min就可以离心取上清了
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问
pulldown,IP实验
土井挞克树
祛除非特异性杂质,不然非特异性吸附会严重影响后续实验
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问
提取病毒核酸可以使用trizol法提取吗
麻黄连翘赤小豆
可以,trizol 法适用于人类动物植物微生物的组织或培养细菌,只是在操作过程中注意事项比较多,还要在低温下操作。如果有试剂盒还是用试剂盒比较规范
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问
求助|有无大佬分享一下BV2细胞的分型免疫鉴定经验
麻黄连翘赤小豆
M1促炎M2抗炎,LPS和正常组肯定有区别表达,在此基础上,检测白介素6,12;4,10,13,炎症相关信号的激活也能说明一些问题
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问
HIE新生鼠建模(Rice-Vannucci法)不稳定,求助!!
Dr_劉医生
从图上看,脑组织的血液供应还是很足,不存在缺血的情况。建议保证在一侧颈动脉结扎完全的情况,适当降低氧浓度,但时间得注意,不要太长,可在实验中观察小鼠心脏跳动,保证避免缺氧休克。
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问
求助RAW264.7细胞培养,复苏后由亮变暗像细胞碎片,是什么问题呀?
麻黄连翘赤小豆
这浮上去的都是细胞尸体,都没有圆圆的巨噬细胞形态,重新复苏新管子
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问
信号通路
麻黄连翘赤小豆
可以查阅网药一类的文献进行综合挑选,靶点也要看测序的结果,哪个基因组表达特别明显
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问
请问大家做细胞实验是用无动物成分重组蛋白还是用传统重组蛋白
dxy_qfkx8il3
用无动物成分重组蛋白应该也可以,但感觉用传统重组蛋白稳妥一些。
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问
细胞技术
麻黄连翘赤小豆
增值的时候是会出现这些亮点的,这属于正常现象,不用管他,只要不污染就行
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问
细胞是污染了吗
Dr_劉医生
图2和图5存在分化样变化,建议重新培养,对比一下;其他的都长得挺好,背景也挺干净
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问
卵巢组织如何制备单细胞悬液呢?
你好几和户
1. 用PBS清洗组织后放置在培养皿中,用手术刀将组织粗略的切碎。2. 这一步对于提高消化效率至关重要!3. 切碎的组织转移到含有胶原酶解离液的50 mL离心管中(10 mL/组织,但这取决于组织的大小)。4. 拧紧盖子,用封口膜密封。5. 37 °C 孵育45分钟。每10分钟摇晃一次。6. 用100 μm细胞过滤器过滤。450g离心5分钟。7. 小心去除上清液,留下的液体在0.5 mL和1mL之
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问
每个孔的自由探针量是一样的,为什么片子显示的看起来不一样啊
Dr_劉医生
探针只是作为特异性抗体结合靶蛋白,探针分子量一样只是保证每孔和底物(也就是靶蛋白)结合的特异性抗体量的一致,具体WB跑出来效果,和靶蛋白结合的量是相关的。
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问
高胆固醇培养基(MRS—CHOL)怎么做成固体的,直接加琼脂就可以吗?还是有其他的固体培养基?
汤姆卜丽波
有厂家会卖如果你觉得自己调不好可以买商品化的,一般我们都是直接加琼脂,你可以做个预实验找个最佳量
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问
crispr文库,检测gRNA慢病毒文库插入细胞基因组的情况,使用的是哪对PCR引物?
滴滴胸外小张
如果是购买addgene的文库,可以在网站上找到protocol,里面有写用哪些引物去进行二代测序建库。
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