sym911105
bamboopiggy
细胞内的检测需要经过适当的处理,即制成约10%的匀浆液,放置-20℃冰箱内,反复冰融3次,然后用显微镜观察细胞是否完全破碎,如不完全则继续冻融2次,再以4000转/分,离心15分钟,匀浆上清液作SOD、MDA测定。而细胞上清则无须这些步骤,直接检测即可
土井挞克树
一般细胞裂解10min就可以离心取上清了
sym911105
感谢,试剂盒没说时间,我按照体蛋白的方法裂解的,时间果然太长了....
Dr_劉医生
一般加入PBS或者IP细胞裂解液后10~15min即可,没有固定时间要求,可自行显微镜观看细胞悬液是否完全破解;但检测有一些细节,如果是用的是细胞的上清液,不建议离心和-80°冻存,可直接用试剂盒测量;若是组织匀浆,可少次冻融后,离心,再复测
sym911105
我做的是贴壁细胞,消化下来用提蛋白用的裂解液裂解的,用PBS也可以吗?