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问
或者还有什么其他更好的方法证明这个猜想吗?
土井挞克树
你需要排除蛋白的影响,不然猜想不完美
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问
C57小鼠腹主动脉瘤造模
Dr_劉医生
不建议用腹腔注射造模,常规的方法就是皮下包埋药泵,因为需要不间断持续给药;术后死亡的原因可能是你解剖埋泵的问题,说白了就是伤口要浅、要小,不要碰到血管神经,建议找个动物房的老师问问,不然你屡次操作还是同样的结果。
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问
大肠杆菌破碎率计算(镜检法)
Dr_劉医生
如是用超声波破碎细胞,可以不用染色;直接将细胞加入细胞破碎缓冲液里,用超声波进行声波破碎;是否稀释,可基于你缓冲液加入的量来决定
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问
同一个胶,同一组样品,同一个内参,不同的趋势
bamboopiggy
感觉是你的蛋白浓度不齐,你根据acin的量,再调一下。还有就是上样的枪尖,注意一下
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问
pulldown,IP实验
土井挞克树
祛除非特异性杂质,不然非特异性吸附会严重影响后续实验
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问
序列和引物blast搜索特异的,但还是能在其他菌的基因组中p出目的条带,为什么呢?
Dr_劉医生
应该是序列同源性的问题,但出现目的条带不是关键,而是条带的分子量和宽度是否和靶序列一致,
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问
大鼠circRNA预测靶miRNA用哪个软件呀
Dr_劉医生
没到用软件那步,先得检索miRNA。推荐数据库cirbank(步骤见图),打开首页后点击miRNA,输入circRNA的ID,点击search,即可。
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问
荧光定量pcr的扩增曲线是图片这样是什么原因呀?
lanlvmaomao
我觉得可以提高一下你的cdna的浓度
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问
求助|有无大佬分享一下BV2细胞的分型免疫鉴定经验
麻黄连翘赤小豆
M1促炎M2抗炎,LPS和正常组肯定有区别表达,在此基础上,检测白介素6,12;4,10,13,炎症相关信号的激活也能说明一些问题
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问
HIE新生鼠建模(Rice-Vannucci法)不稳定,求助!!
Dr_劉医生
从图上看,脑组织的血液供应还是很足,不存在缺血的情况。建议保证在一侧颈动脉结扎完全的情况,适当降低氧浓度,但时间得注意,不要太长,可在实验中观察小鼠心脏跳动,保证避免缺氧休克。
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问
免疫荧光,BSA封闭液用水配行不
Dr_劉医生
直接用水配就行了,按体积比就行,相当于稀释,看你干什么用,如果还要做PCR的话,建议最好用去离子水或者超纯水
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问
tcga中mirna数据没有正常组,都是肿瘤组,如果想做差异分析怎么办
Dr_劉医生
做阳性对照也可以,不一定非得要无疾病的空白对照。按肿瘤的类型进行miRNA数据的分层,一样可以做组间差异化分析
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问
graphpadprism 怎么把柱状图的对照组数值都变成1呀
lanlvmaomao
菜单栏的下拉选项中 可以设置y轴对照组的值为1。
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问
【求助】血清做WB的样本处理及方法
bamboopiggy
你只是要用2x甚至5x的lysis来处理血清,然后就按照正常的wb样品的步骤做就可以。
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问
细胞是污染了吗
Dr_劉医生
图2和图5存在分化样变化,建议重新培养,对比一下;其他的都长得挺好,背景也挺干净
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问
qpcr 内参ct值在15-25左右,但是目的ct值在31左右。怎么解决ct值过高问题,数据是否能用?
bamboopiggy
内参在15-25,目的在31是可以的,但是数据能不能用要看melt curve
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问
卵巢组织如何制备单细胞悬液呢?
你好几和户
1. 用PBS清洗组织后放置在培养皿中,用手术刀将组织粗略的切碎。2. 这一步对于提高消化效率至关重要!3. 切碎的组织转移到含有胶原酶解离液的50 mL离心管中(10 mL/组织,但这取决于组织的大小)。4. 拧紧盖子,用封口膜密封。5. 37 °C 孵育45分钟。每10分钟摇晃一次。6. 用100 μm细胞过滤器过滤。450g离心5分钟。7. 小心去除上清液,留下的液体在0.5 mL和1mL之
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问
每个孔的自由探针量是一样的,为什么片子显示的看起来不一样啊
Dr_劉医生
探针只是作为特异性抗体结合靶蛋白,探针分子量一样只是保证每孔和底物(也就是靶蛋白)结合的特异性抗体量的一致,具体WB跑出来效果,和靶蛋白结合的量是相关的。
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问
高胆固醇培养基(MRS—CHOL)怎么做成固体的,直接加琼脂就可以吗?还是有其他的固体培养基?
汤姆卜丽波
有厂家会卖如果你觉得自己调不好可以买商品化的,一般我们都是直接加琼脂,你可以做个预实验找个最佳量
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问
基因组DNA降解?PCR双峰?
bamboopiggy
1.你提取的液体里面加核酸酶抑制剂,2, 你pcr 的那个,可能说明你的目的片段有突变,所以成双峰
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