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问
跑wb遇到了一些问题?
juyue2010
查询一下这种细胞常用内参,可能是你稀释比例有问题,或抗体失效
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问
elisa检测炎症因子
juyue2010
检测组织表达,肠腔属于体外了。
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问
做免疫组化,不同组织怎么取材,才能有代表性?
土井挞克树
给你推荐一篇文章,这篇文章里面很全
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问
免疫组化,特征性如何,什么情况会出现假阳性?
土井挞克树
1. 消除病理性色素的影响: 当所检动物由于出血等原因造成吞噬含铁血黄素细胞增多时,为防止其与 DAB 显色呈现的黄褐色发生混淆,优先选用AEC显色剂。组织固定时间过长时,切片中容易产生福尔马林色素颗粒,影响结果观察,取材时应充分用流水冲洗,以消除影响。 切片制作不当引起的非特异性着色 在严重变性、坏死及炎性病灶处,在胶原纤维和结缔组织部位,在切片裱贴不平、折皱处以及组织边缘部位常会出现非特异
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问
免疫组化,一般切多少张片子,组织没有固定,冻融过,还能用吗?
土井挞克树
10-15个吧 ,没有固定冻融过最好不用了
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问
免疫组化,是否能够定量,怎么实现?
土井挞克树
可以的,先把免疫组化做了然后 用imageJ 分析
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问
心脏导管取血,经过大的血管怎么避免血管内皮损伤?
土井挞克树
操作轻柔,减少与内壁的摩擦。多加练习
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问
流式细胞检测什么时候需要去黏连?什么时候用fsc的信号去黏连,什么时候用荧光信号去黏连?
土井挞克树
在流式检测中,我们需要进行单细胞分析,有时样品中会混有两个或多个细胞的聚集体,这个时候需要去粘连
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问
检测胞内蛋白的表达水平用WB和流式细胞仪的区别是什么?
土井挞克树
WB是金标准,流式可以检测细胞膜和细胞内蛋白
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问
细胞转染,免疫共沉淀的相关问题?
juyue2010
若不是分泌蛋白,它会在细胞膜外,取细胞裂解液
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问
AnnexinV 检测细胞凋亡,流式结果图怎么看?
土井挞克树
在二维散点图上,PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞,annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞,而双染是凋亡中期的。需要在散点图上先画出4个象限,位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂,在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。
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问
当分子A被敲低或敲除时,分子B可以替代分子A的作用,此时分子A和分子B是什么关系,替代关系吗?
juyue2010
不是替代,是补偿或代偿关系,生物中很常见。
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问
同一批小鼠细胞,可以用不同品牌的抗体一起孵育吗,会不会有排斥的情况?
土井挞克树
不要一起孵育,可以用剥离Buffer处理后再加另外一种抗体,在同一张膜上显色,配方园子里有;多抗是有可能有多条带的,和它是多克隆抗体有关,特异性差,会有交叉反应。
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问
我想一次染小鼠免疫细胞,包括b,t,巨噬细胞,单核细胞,孵育抗体的次序有要求吗?
土井挞克树
这个应该不分先后顺序,都可以的。
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问
流式细胞术散点图参数中FSC-A与FSC-H是什么意思
土井挞克树
fsc代表的是forward scatter,这个参数和细胞的大小成正比。A 是area的缩写,H是height的缩写。这是机器在记录信号时所采用的参数(不显示在用户界面,一般在调试机器的时候可以显示)每个细胞通过激光的时候,机器都会记录一个波状信号(一个拱形的信号),H就是这个拱的高度(代表的是信号的强度),A就是这个拱的曲线下面积,代表信号强度和细胞大小的关系。其实还应该有一个参数W,是wid
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问
流式做细胞凋亡怎么设门?
土井挞克树
通过流式细胞术分析细胞样品时,欲获得更加准确的分析结果,应用最优化的设门策略非常重要。要考虑的因素包括:1) 排除细胞碎片2) 应用合适的荧光阴性对照3) 排除死细胞4) 如果合适,使用一种共享标志物(比如 CD45 白细胞标志物或与之等效的泛-细胞群标志物)染色5) 设置必需的荧光分析点图
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问
内源性过氧化物酶的灭活时间和浓度是什么?
土井挞克树
(1)一般3%过氧化氢灭活时间短点,可以10min左右;而0。3%过氧化氢则可以适当延长封闭时间,一般10~30min。
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问
Triton-X100的必要性是什么
土井挞克树
1、能溶解脂质,以增加抗体对细胞膜的通透性;2、百分之一的TritonX100常用于漂洗组织标本;3、百分之零点三的TritonX100常用于稀释血清;4、百分之零点一的TritonX100常用于环介导等温扩增,配制BSA。
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问
中药成份分析,指纹图谱
Dr_劉医生
建议做质谱分析就行,适用性广;指纹图谱麻烦, 但特异性强
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问
ELISA洗板时的问题
土井挞克树
当然有影响,实验步骤一定要严格操作。
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467 围观
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