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问
金葡PFGE一直跑不出来
土井挞克树
条带降解可能是(造成的原因是因为Tris缓冲液当中含义盐酸的成分被氧化,使得溶液从碱性变为酸性,二某些菌体本身在酸性的环境中容易被降解,造成我们在pfge条带图当中看不到相应的酶切位点。如要改善这个情况,需要加入适量的硫脲到0.5X TBE中,然后在进行电泳。因为硫脲是一种还原剂,可以中和氧化物质,从而改善条带分型或一片模糊的现象
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问
ELispot 问题分析
土井挞克树
大概率是非特异性结合,一般来说特异性结合的斑点大,非特异性结合斑点小。
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问
CHIP超声!细胞一半超过了,一半完全没超开
土井挞克树
细胞密度过高,超声就可能超不过气,建议调整细胞密度。
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问
msc细胞这样拉丝?爆炸?是什么状况啊
土井挞克树
可能是你接种密度太低。无血清培养基必须高密度接种,接种密度过低,会导致细胞长不起来,呈现拉丝状
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问
质粒测序
Dr_劉医生
28a的分子量太小了,pcr扩增结果跑不完整
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问
求助,rna跑胶条带这个样是为什么
balalaLy
提取的RNA是没有问题,提完到跑胶的过程可能出现了降解。
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问
小鼠血清效价测定完如何做趋势图
Dr_劉医生
你把各时间点的血清结果代入方程啊,用软件可以出图,需要自己修改一下
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问
怎么使用Quantity One进行wb条带的灰度分析,特别是怎么去除本底
土井挞克树
Quantity One可以直接进行灰度值的计算,去除本底在开始时可以简化。
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问
细胞WB抗体怎么选
Dr_劉医生
一抗选羊抗,兔抗或者是人源性抗体都可以,得结合文献来确定最后用哪种特异性好,另外单克隆优先
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问
质粒含量的问题
Dr_劉医生
可以用上清液测质粒DNA的含量,没啥问题
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问
小鼠GAPDH内参可以扩大鼠吗
Dr_劉医生
可以用,鼠源的管家基因都是同源的,GAPDH都可以用
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问
流式细胞术实验中,荧光弱常见原因是什么?怎么解决?
明査日月
前带现象 抗体稀释过度 细胞数量过多 抗原本身表达弱
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问
ELISA实验检测类型
juyue2010
都可以做的,分泌型的检测上清就行,膜蛋白裂解提总蛋白后检测
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问
代谢组学差异性代谢物太少
Dr_劉医生
建议初筛用倍数变化法,就是FC;因为代谢产物的倍数变化范围广,然后再用p值或者VIP来筛有统计学差异或者可能是阳性的关联代谢物
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问
制备细胞透射电镜样本的几个问题
Dr_劉医生
常规步骤都需要,先用酶消化下来大部分贴壁的细胞,再用预冷的PBS液来冲洗残留的部分细胞
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问
过氧化氢浓度检测方法是什么
Dr_劉医生
一般用DPD法和草酸钛钾法,具体步骤见附上的参考文献,分别对应1和2的方法;1. Spectrophotometric determination of trace hydrogen peroxide via the oxidative coloration of DPD using a Fenton system. Chemosphere 224 (2019) 646-652. https://
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问
转染后种瘤变黑什么原因呢?
Dr_劉医生
看着像是红黑色的组织块,种瘤后消毒有没有保证好,裸鼠恢复能力不行,个人建议还是组织出血后的表现
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问
Elisa
Dr_劉医生
没有,抗原和孔板结果本质就是蛋白质和板基质的疏水结合力,是非特异性的,根据蛋白质大小不一样可能有变化,但你的蛋白抗原也不可能变,唯一的话试一试微孔板,板基质状态不一样可能会增加结合力
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问
elisa怎么做
juyue2010
先做wb,先根据说明书进行稀释,效果不好的话,进行优化
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问
流式细胞仪算药物ic50值
Dr_劉医生
可以,但只能是间接测量,用药物抑制实验来看细胞的数量,然后用流式来检测细胞的变化数,间接推算IC50,得到数据后用graphpad prism分析就行
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