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问
小鼠C57的mcao MCAO模型
Dr_劉医生
线栓进血管之前得自己做好进栓深度标记的,不是都按照阻力来判定是否还能进,别出现严重缺血还进线
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问
提取RNA做逆转录,然后用逆转录的c DNA做荧光定量PCR。结果发现没有扩增成功,一直在0上下波动,是什么原因呢?
灵枢天问
是不是你的SYBR出了问题,失效了或者提出来的RNA降解了
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问
求助,HepG2细胞长得好慢
juyue2010
铺细胞不能太稀,会导致细胞生长缓慢,铺的数量一致,做到可控。
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问
提前质粒的时候,提好多次,浓度很低,需要怎么办?
Dr_劉医生
第一个保证菌体充分裂解释放了,第二个增加菌体悬液的量
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问
Irs和pirs蛋白电泳
bamboopiggy
降低胶浓度,我记得这个蛋白分子量过100了,你用8%的胶试试。
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问
求助|大肠杆菌诱导后菌液保存
juyue2010
可以-80冻存,但最好现提现做,长时间冻存,会对蛋白活性有影响。
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问
线粒体dna
Dr_劉医生
可以,线粒体DNA本具有高拷贝数,且稳定,可以用rt-PCR检测,而且一般都会用sanger和高通量测序来对比序列
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问
CNV拷贝数变异 作图
Dr_劉医生
可以按肿瘤类型进行聚类分析,CNV在同一区域也可以进行对比
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问
慢病毒求助
bamboopiggy
用小鼠的转录本,然后找其中最长的一个就可以。
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问
文献看到的图像问一下这个图怎么看,Vcetor代表啥
juyue2010
+号代表含有这个东西,vector是空载体
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问
请问下这个circo图该怎么看啊
Dr_劉医生
这是典型的细胞聚类的circo图,看细菌和细胞类型的相互作用。你在网上看到的那是常规的外圈染色体和基因的,用R作图的时候都是可以修改外圈的数据信息。推荐你看下这篇文章的figure1A,和你这个是一样;“Tumor microenvironment characterization in gastric cancer identifies prognostic and immunotherapeu
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问
中文综述投稿
灵枢天问
如果要求不是特别严格的话可以试试大学学报这些
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问
免疫组化染色中有杂信号怎么办?
土井挞克树
1.抗体问题一抗用多克隆抗体容易出现非特异性染色,建议用高纯度,高效价的针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。单克隆抗体很贵,不过结果真的很好。尤其是背景非特异性染色不会太深。真是一分价钱一分货。一抗过期也会造成杯具,所以要注意抗体的有效期。2.抗体浓度过高/孵育时间过长一抗浓度太高也是出现非特异性染色的常见原因。解决的办法就是预实验。每次使用新抗体前应该多做预实验,摸索出最理想的工作浓度,
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问
第二次pcr跑出来的条带和第一次pcr跑出来的位置不一样,这是什么原因?
灵枢天问
可能是第一次的RNA有降解,逆转录出来的模板本身就有问题,所以p出来条带也有问题,太小了,你可以发个图片过来看看
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问
表中流式细胞仪给出的平均值是什么意思,是怎样得到的?
juyue2010
每个细胞测了多次荧光,取的平均荧光值
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问
流式细胞术实验中细胞无法标记怎么解决?
juyue2010
抗体选择不合适,蛋白有构象,你的抗体是否适合流式
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问
悬浮细胞铺板不均匀有什么好的解决办法吗
juyue2010
细胞吹吸均匀后铺板,缓慢画8字摇匀,
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问
在进行免疫荧光实验中,为了获得良好的荧光效果,在染色时有什么技巧吗?
土井挞克树
1. 设置对照:可以使用阳性和阴性对照来确定结果的准确性,并帮助确定任何问题的来源。 2. 样品和试剂的存储:由于 IF 中所用抗体和实验样品的荧光性质,因此必须适当存储。最好将荧光抗体和经过 IF 处理的样品都保存在完全黑暗的环境中。使用琥珀色或铝箔覆盖抗体管。3. 使用适当的固定剂:醛可用于标记膜结合抗原或细胞骨架抗原,并应用于核蛋白或线粒体蛋白。醛固定后的样本需要抗原修复和打孔渗透步骤才能正
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问
做免疫组化,比如做 A基因,那么A基因在呼吸系统和生殖系统用的一抗和二抗是一样的吗?
juyue2010
一样的,一抗针对的是A基因,与它在哪个器官表达没有关系,二抗一般为种属抗性,只与你一抗来源有关
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问
引物是经过PAGE纯化的,为什么还有碱基缺失或插入?
dxy_j7jezao0
与它的纯化回收方式有关,更换其它高纯度纯化方式
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