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小白求助-提蛋白
NatureBios
这个是和手法有点关系,我们可以讲离心转速设高一些。动作再轻一些
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问
求助:细胞培养中出现大量的细胞死亡
土井挞克树
培养基是否清澈?首先排除一下微生物污染。
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问
请问跑胶时看到条带整体下移,下面没跑开,可能是什么问题?
balalaLy
你配胶的过程没有问题,上面的marker 也是正常的,所以不存在胶混得不均匀或者没有完全凝这样的问题。下面的蛋白没有跑开只能是胶的浓度太低跑不开。有没有可能你配胶的时候看错了用了低浓度胶的配方
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问
请问做elisa的朋友,有没有遇到移液器头掉的情况?
土井挞克树
有呀,移液器上头的时候用点力,然后选择合适的头。
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问
肠原代细胞制备时常伴有粘液且易污染问题
Dr_劉医生
能不能加点酶来去除一下粘液,至于如何避免培养细胞的污染,我只能说要严格遵循无菌操作流程,另外培养基和PBS的存放和配置都要注意,一旦发现培养箱中有污染的细胞就要尽快扔掉并对培养箱进行消毒。
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问
目前基因测序最先进的是哪种方法?
土井挞克树
目前来说,微生物基因组框架图、重测序等目前主要是基于二代测序技术,同时第三代测序技术已广泛的应用于细菌/真菌基因组测序
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问
做流式凋亡出来的图片左上和右下的细胞分布特别多。为什么呢
balalaLy
左上坏死细胞,右下早期凋亡,有可能是你操作的过程太粗暴造成细胞死亡
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问
组织取材后放固定液中固定24h后还可以做冰冻切片吗?
麻黄连翘赤小豆
可以做,但是做完需要进行保存,不能放在室温容易变质
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2777 围观
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问
小分子分泌性蛋白要怎么跑啊,一直跑不出来,好烦啊?
申东熙老伯
提高分离胶浓度,缩短转膜时间。
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问
表面等离子共振法能检测蛋白质直接相互作用吗?
Dr_劉医生
可以,表面等离子共振技术是一项用于分析生物大分子之间的相互作用的技术,它可以定性的判断两分子之间是否有相互作用,比较一种分子与其他几种分子之间相互作用的强弱。
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问
细胞给药浓度怎么计算
麻黄连翘赤小豆
按冻干粉的量算,进行CCK8梯度筛选
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问
WB小分子量蛋白曝光问题????
此用户已注销
11kDa分子量蛋白,感觉像有蛋白,因为用的是0.45uM的膜,可以换0.22uM的膜、但是转膜后丽春红染色这地方没看到蛋白。用的是湿转2h,应该可以换成半干转
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问
WB曝光后条带问题,除了背景过深,还有条带全黑。
NatureBios
这次实验有跑内参么,结果如何,全黑考虑 样本是否新鲜 更换封闭体系,延长封闭时间 增加清洗次数 换个一抗
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问
求求大神看看这是细胞污染吗?!
Dr_劉医生
片状物不是污染,背景很干净,不是污染;而且能用PBS冲洗掉,说明可能是死亡细胞
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问
裂解组织后出现粘稠物,电泳时上样孔样品分层而且有残留怎么办?
此用户已注销
RIPA裂解细胞后的粘稠物质主要是DNA,10000g以上离心五分钟就可以沉淀,取上清液。如果一次离心后还有粘稠可重复一次。
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问
请问有没有大佬做过NLRP3相关的wb?
麻黄连翘赤小豆
蛋白表达比较低转膜效率低封闭没封好
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855 围观
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问
提取骨组织RNA纯度很低
麻黄连翘赤小豆
及时研磨,取出骨组织后短时间内就提取,不然容易降解。用液氮研磨,需要及时加液氮可以减少降解,研磨充分也很重要,再提会好些
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1403 围观
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问
如何改善D-Dimer胶体金产品低浓度显色梯度?
大草原的小灰驴
严格按照说明书上的步骤操作,在其规定的时间内判定结果。反应时间延长也会导致假阳性出现。
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问
求助 结核分枝杆菌培养相关问题
大草原的小灰驴
临床上常用的结核杆菌PCR试剂盒是定性诊断结核感染的,我们用的是达安的试剂盒,但是没有鉴定具体是哪种菌的,而且标本类型有限制,比如泌尿系统结核的诊断是没有用24小时尿液做的。
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问
c显带做了半年还没做出来
大草原的小灰驴
根据片子的存放时间适当改变氢氧化钡变性的时间,片龄长的要尽量延长变性的时间,我们有时候试的片子有90至120秒就可以,但有时就是30分钟都不行。之前在湘雅听说过有过夜处理了采染上C带的。
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