在进行免疫荧光实验中，为了获得良好的荧光效果，在染色时有什么技巧吗？

首先你选择的荧光染色剂要和你后面机器拍片的显微镜对应，还有就是洗涤的时候要确保洗干净要不然片子会花。

抗体的浓度、孵育时间、温度需要优化，同时选择好的二抗。

1. 设置对照：可以使用阳性和阴性对照来确定结果的准确性，并帮助确定任何问题的来源。

2. 样品和试剂的存储：由于 IF 中所用抗体和实验样品的荧光性质，因此必须适当存储。最好将荧光抗体和经过 IF 处理的样品都保存在完全黑暗的环境中。使用琥珀色或铝箔覆盖抗体管。

3. 使用适当的固定剂：醛可用于标记膜结合抗原或细胞骨架抗原，并应用于核蛋白或线粒体蛋白。醛固定后的样本需要抗原修复和打孔渗透步骤才能正确检测抗原。如果使用单克隆抗体推荐有机溶剂用于组织固定。甲醇适用于冷冻样本的固定；丙酮固定对组织学保存效果较好。