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问
如果目标蛋白是膜蛋白或是胞浆蛋白,操作需要注意什么?
NatureBios
提蛋白根据蛋白表达位置可以选择对应的裂解液,如提胞浆蛋白的裂解液,提膜蛋白裂解或全细胞裂解液,操作上常规的注意事项那就是冰浴裂解,蛋白酶抑制剂,PMSF(磷酸化蛋白检测时磷酸酶抑制剂cocktail)等
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问
同一样品能同时提RNA又提蛋白么?这样对WB有无影响?
土井挞克树
能,完全没有问题;这是两个不同的实验
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问
做WB时我的目的带很弱,怎么加强?
NatureBios
只要有目的蛋白印迹,后面的都很好办,我们可以在上样量,一二抗的浓度,显影液灵敏度,曝光时间等几个方面着手
5 回答
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问
做WB有什么方法可以提高上样量?
NatureBios
给样本浓缩,可以用IP富集一下目的蛋白,低电压,让点样孔里面的样本往下跑一跑,再加一些样本等
4 回答
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问
抗原检测出的分子量比资料上的大,是怎么回事?
NatureBios
查看文献和数据库,目的蛋白是否有翻译后修饰现象,是否形成多聚体,有些化学键是否打开等因素
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问
为什么我的细胞提取液中没有目标蛋白?
申东熙老伯
是通过western检测到没有目标蛋白吗?可能是表达量低没检测到
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问
请问如果研究中药复方增敏吉非替尼治疗肺癌的研究可以用PC9/GR细胞系皮下植入么?还是说不可以用耐药型的细胞系有没有相关的说明。
徐彩云6
建议阅读下面的文章,讲的比较全面
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问
蛋白免疫印迹常用的标签有哪些?如何选择?
NatureBios
标签有HIS HA FLAG GST GFP RFP mCherry等会在蛋白表达时插入到表达体系中,Western blot常用的内参有actin GAPDH Tubulin,针对样本核浆膜提取的样本,也有相应的蛋白做内参
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问
流动性中有的有机溶剂是色谱级的还需要过滤和超声吗? 超纯水机出的超纯水有电导率显示,需要过滤和超声吗?
徐彩云6
样品溶液亦必须用0.45μm的微孔滤膜过滤后才能进样。
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问
用亚硝酸钠—硝酸铝—氢氧化钠测总黄酮,加到96孔板前离心分离络合物,会不会影响实验结果
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用亚硝酸钠—硝酸铝—氢氧化钠测总黄酮,加到96孔板前离心分离络合物,不会影响实验结果
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问
如何正确使用SD和SEM?T检验和方差分析的区别?
徐彩云6
SD是指某个样本的标准差,SEM是指多个样本的平均值再进行计算的 (多个样本来假设总体分布的)1.相同数据一般SEM是要比SD的值要小2.相应的作图的时候如果SD比较大,可以使用SEM替代。总之,都是对一个样本的统计分析,只是数据的统计参数不一样而已。
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问
medicine杂志投稿付费
huarenqiang5
这是给你提供了一个更加简便的支付方式,直接进入支付就行
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问
关于HL60 分化成功后的形态
徐彩云6
这个情况和细胞代数相关,你也可以加大血清浓度对比一下
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问
L929细胞培养
徐彩云6
基本上属于正常情况,不用管它。
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问
SH-SY5Y细胞出现很多亮圈是咋回事,用处理嘛
徐彩云6
属于正常情况,没有必要进行处理。
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问
bEnd.3细胞复苏后分叉,长很多触角
徐彩云6
个人觉得把血清换一下重新做一下更准确
3 回答
1293 围观
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问
怎么样确定一个载体是否适合你的宿主菌呢?
汤姆卜丽波
你做个预实验看看表不表达,表达量怎么样就知道了啊
4 回答
698 围观
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问
青霉素抑制大肠杆菌实验怎么进行
汤姆卜丽波
我们实验室氨苄青霉素浓度是浓度配制在25ug/ml
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问
粪菌移植
huarenqiang5
检测受体代谢物如果稳定就算成功
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问
ros检测趋势相反
徐彩云6
是不是加错了或是位置调换了?建议重新做一次
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