实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问索莱宝SOD测活性试剂盒来测试我们纯化出来的蛋白样品，但是要怎么计算它的酶活呀

高山云初

套用公式计算没问题，一般有几个单位足够了

4 回答563 围观

问请问一般常用的JNK抑制剂是用什么呀？用于动物身上文献上查到SP600125 用在细胞上的

高山云初

有D-JNKI-1 (AM-111) 、SU3327 ，SP600125也可用。

4 回答704 围观

问raw264.7细胞由IL-4诱导向M2型极化的方法

周末也要努力呀

可以使用以下方法：1. 培养基准备：使用DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素。2. 细胞培养：将RAW264.7细胞在培养皿中以37°C、5% CO2的条件下培养至80-90%的密度。3. 细胞处理：将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次，然后加入IL-4（10 ng/ml）处理培养基中。将细胞继续培养24-

4 回答3461 围观

问求助问一下这油脂块一样的东西是污染了吗，刚复苏就有，感觉是悬浮的，可以洗掉，貌似也不怎么影响细胞生长，但是养几天就会出现

周末也要努力呀

建议离心时候加PBS多洗几次，更换培养基

5 回答455 围观

问H2SO4（1+1）是指98%优极纯和水1:1混合是不是没有100%的硫酸

高山云初

100%的硫酸只是理论上的数值

4 回答658 围观

问两个基因一起做干扰过表达的实验步骤

feixue7758527w

希望对你有用第一步:选择目标基因首先需要选择要过表达的目标基因。这个基因可以是已知的,也可以是未知的。如果是已知的基因,可以通过文献调研或数据库查询来获取该基因的序列信息。如果是未知的基因,可以通过基因组测序等方法来获取该基因的序列信息。第二步:构建表达载体表达载体是将目标基因导入到细胞中的工具。常用的表达载体有质粒、病毒和细胞质注射等。在构建表达载体时,需要将目标基因的序列克隆到载体中,

3 回答1131 围观

问脉动真空灭菌器的选型依据

周末也要努力呀

在贵实验室购买器材平台搜索后按照销量排序，选择价格合适销量高厂家有售后保证的

3 回答396 围观

问做相对定量时，不同样本的cDNA可以稀释成不同的倍数吗？

周末也要努力呀

可以稀释成不同倍数，与结果无显著影响

3 回答580 围观

问抗血清的倍比稀释问题

周末也要努力呀

最好是稀释后逐步稀释，这样误差小一点

3 回答523 围观

问wb条带异常，求大神解惑

feixue7758527w

没有目标条带啊，你还是看看抗体的问题，尤其是一抗是不是有问题了

4 回答358 围观

问为什么用DMEM培养细菌，培养出来，血清瓶里变红了

橙汁儿青柠味

dmem里面含有酚红，细菌会是ph值升高，所以变红了

9 回答1068 围观

问请问各位用什么药物诱导细胞氧化应激而建立氧化损伤模型呢？🙏

高山云初

可以用过氧化氢来诱导细胞氧化应激

3 回答1345 围观

问请问用DNS法（3,5-二硝基水杨酸法）测定绿豆叶片或茎的还原糖时样品应该怎么处理磨样然后离心吗

土井挞克树

研磨，分离，萃取，离心之后收集

3 回答565 围观

问求助🆘细胞种板后，想计算细胞培养板里每个孔的细胞数，应该如何操作？

huarenqiang5

计算方法：（4个大正方形内之细胞数目之和×稀释倍数× 104）/4=每 mL 悬液中的细胞数目。

5 回答1928 围观

问求助🆘细胞铺板前进行了计数，根据计数结果进行铺板，之后细胞长满后每孔的细胞数量还用计数吗？

Keven轩

一般不需要了，除非显微镜下明显看出细胞死了很多

8 回答638 围观

问哪位大佬有“吸头规格和移液器量程适配”这块儿的文档或者知识库呀，分享一下，不剩感激

周末也要努力呀

一般来说，吸头的容量应该小于或等于移液器的量程。例如，如果移液器的量程为0.1-1 mL，那么适配的吸头容量应该小于或等于1 mL。如果吸头的容量为2 mL，那么它就不适合与该移液器一起使用。

4 回答643 围观

问该实验中重铬酸钾可以用丙酮代替吗，去除脂肪用？胰蛋白酶过程是否可以通过使用梯度甘油进行透明来代替？

huarenqiang5

可以用丙酮代替重铬酸钾以去除脂肪。

5 回答483 围观

问关于真核胞内表达蛋白的纯化

周末也要努力呀

对于胞内表达的蛋白纯化，可以采用以下步骤：1. 细胞破碎：将表达目标蛋白的细胞收获后，通过超声波破碎或其他方法破碎细胞膜，释放细胞内的蛋白。2. 蛋白提取：使用适当的缓冲液提取蛋白，可以加入一些辅助剂如盐、洗涤剂等，有助于蛋白的溶解和稳定。3. 清除细胞碎片：通过离心或其他方法，将细胞碎片和细胞核等杂质清除，得到较为纯净的蛋白上清。4. 亲和纯化：如果目标蛋白具有特定的结构或功能域，可以利用亲和纯

3 回答2055 围观

问请问RNA-seq技术的具体流程是怎样的？有哪些文献可以参考？

huarenqiang5

1. workflow进行差异表达基因分析的前提是，获取代表基因表达水平的矩阵。因此在进行分析前，必须知道基因表达矩阵是如何产生的。在本教程中，将会简要的介绍从原始测序读数到基因表达计数矩阵过程中，所采取的不同步骤。下图是整个分析过程的流程图。2. RNA提取与文库制备在对RNA 进行测序前，必须从细胞环境中提取和分离出RNA 制备成cDNA 文库。下面将介绍涉及的许多步骤，其中还包括了质量检查，

4 回答1073 围观

问想问一下，构建含特定RNA序列的质粒与含该RNA表达蛋白序列的质粒，在构建过程中，序列选择有何不同。

周末也要努力呀

在构建含特定RNA序列的质粒和含有该RNA表达蛋白序列的质粒的过程中，序列选择有一些不同之处。1. 含特定RNA序列的质粒：在构建含特定RNA序列的质粒时，需要选择一个适合的载体质粒，该质粒应具有适当的启动子和终止子，以确保RNA序列能够被正确转录和翻译。此外，还需要选择一个合适的选择性标记，如抗生素抗性基因，以便在细胞中筛选和维持质粒。2. 含有该RNA表达蛋白序列的质粒：在构建含有该RNA表达

3 回答398 围观

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