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实验问答

25,171,483 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问3T3脂肪细胞诱导：每次加诱导剂确实很小心沿着边儿加的，加完了有不少絮状卷边，怎么办

土井挞克树

可以适当把诱导剂稀释一下再加。

4 回答660 围观

问3T3脂肪细胞诱导：脂肪细胞诱导成功有什么很明显的现象吗？显微镜下能明显看到脂滴吗？培养基颜色会变化明显吗？

loveliufudan

在成功诱导3T3成为脂肪细胞后，通常会出现以下明显的现象：显微镜下能看到脂滴：成熟的脂肪细胞通常含有丰富的脂滴，这些脂滴在显微镜下可见，且大小和数量与细胞成熟度相关。当细胞诱导为脂肪细胞后，显微镜下能够观察到明显的脂滴形成。细胞形态变化：3T3细胞在诱导成脂肪细胞后，形态通常会发生明显的变化，细胞变得更大、更圆，呈现出脂肪细胞的典型形态特征。培养基颜色变化：在脂肪细胞诱导过程中，由于诱导剂中含有不

4 回答768 围观

问PCR 目的基因扩增

huarenqiang5

考虑以下几点原因：引物没有设计好、模板浓度过低、温度过高等。

3 回答1391 围观

问聚类分析和多重对应分析（MCA）

huarenqiang5

1.聚类通过把目标数据放入少数相对同源的组或“类”(cluster)里。分析表达数据。 (1)通过一系列的检测将待测的一组基因的变异标准化，然后成对比较线性协方差。 (2)通过把用最紧密关联的谱来放基因进行样本聚类，例如用简单的层级聚类(hierarchical clustering)方法。这种聚类亦可扩展到每个实验样本，利用一组基因总的线性相关进行聚类。 (3)多维

3 回答2750 围观

问求助投过“中药药理与临床”的大神

sswei

样本数太少，对实验结果的可信度低，建设加大样本量，来提高实验的可靠性。

4 回答337 围观

问世界中医药投稿

sswei

该刊的审稿周期有些长，需耐心等待。

4 回答692 围观

问ERK、JNK WB条带趋势

huarenqiang5

想要验证对MAPK信号通路的影响，建议做磷酸化的WB比较好。

3 回答1998 围观

问求助免疫电镜

loveliufudan

免疫电镜是一种结合免疫学和电子显微镜技术的方法，用于检测细胞或组织中的特定蛋白质或抗原。以下是一般的免疫电镜步骤：制备样品：样品可以是细胞或组织，需要进行固定和包埋处理。固定通常使用戊二醛或氧化亚铊等交联剂。包埋处理通常使用树脂，如Epon或Araldite。切片：用超薄切片机将包埋样品切成70-100纳米的薄片，然后将其放在电镜网格上。抗体标记：将特定的抗体与金颗粒等标记物结合。抗体可以是单克隆

2 回答652 围观

问HTR-8/SVneo细胞未做任何处理，老是漂一层死细胞，有黑点沉渣

sswei

可能原因有：1，培养液有毒。2，PH有异常。3，细胞对添加剂较敏感。4，培养环境的影响。

4 回答561 围观

问流式细胞仪

sswei

流式细胞仪操作注意点:1. 因实验需保证待检测样品细胞为单细胞悬液，因此在细胞培养、制备阶段，贴壁细胞需用先用胰酶消化成单个细胞，而后再后收集待测样品细胞；胸腺、脾脏和淋巴结等外周免疫器官，主要由免疫细胞组成，只需直接将脏器经钢网研磨即可制成单细胞悬液；实体脏器肺脏、肝脏和肿瘤组织内含有较多的结缔组织，而实体脏器细胞之间一般结合紧密，所以直接简单的将脏器进行研磨是无法得到理想的单细胞悬液的，因此，

4 回答585 围观

问包埋切片

huarenqiang5

切片一般是横着切，切片及染色肾组织要求为未经任何处理的新鲜组织，应立即送入恒温冷冻切片机（cryostat）内，将肾组织放置于金属托上，周围添加OCt 　compound 包埋剂（如无包埋剂，滴加数滴生理盐水亦可），迅速冷冻至-20℃，切出3~5μm厚的冰冻切片附贴于载玻片上，至少需切10张以上备用。

3 回答878 围观

问石蜡切片制备请教，该如何处理样本？

sswei

将蜡温调至高石蜡熔点1-2°C浸泡，至次日包埋。或可以将固定后的样本停在75%或85%中时间长一点（根据自己的时间调整），后边的程序不用改变，这样对免疫组化和分子病理检测的影响相对较少。

3 回答528 围观

问如图，pcr结果曲线一直不超过0，且呈现负值的原因？

huarenqiang5

你的这个情况主要考虑是设置的问题导致，建议重新设置一下。

3 回答249 围观

问同源重组连接问题

loveliufudan

从你提供的信息来看，可能有以下几个原因导致你的载体体和目标片段同源重组连接不成功：同源重组效率低。同源重组是一种复杂的过程，很容易受到多种因素的影响，如DNA序列相似性、长度、GC含量、连接比例、转化复苏等。如果同源重组效率很低，那么单菌落的数量就会很少，甚至没有。建议检查DNA序列和GC含量，同时考虑优化连接比例、增加转化量等措施来提高同源重组效率。质粒不稳定。质粒构建成功后，可能存在不同程度的

3 回答1585 围观

问电镜分析

huarenqiang5

绿色和红色分别是溶酶体和蛋白颗粒。

2 回答476 围观

问关于干细胞成骨分化

土井挞克树

目前看成骨分化的不错，可以继续诱导看看

3 回答552 围观

问ROC曲线联合后面积反而小了？

loveliufudan

当联合诊断时，ROC曲线面积小于某个单独指标的ROC曲线面积，可能是由于联合诊断的方法不当，或者指标之间存在一定的相关性。以下是可能的解决方案：检查联合诊断方法是否正确。在联合诊断中，可能需要使用特定的计算方法，如逻辑回归、支持向量机等。如果方法不当，可能会导致ROC曲线面积的下降。检查指标之间的相关性。指标之间存在一定的相关性可能会影响ROC曲线的面积。在这种情况下，可以使用因子分析或者其他方法

3 回答2083 围观

问求助：多水平重复测量数据分析

huarenqiang5

这种情况可以使用非参数统计法进行分析。

3 回答376 围观

问image Pro plus

sswei

可能存在两个软件之间相互不兼容，建议重新下载安装调试。

4 回答1485 围观

问求助：使用lipo3000向hepg2细胞内转染siRNA失败

loveliufudan

根据你提供的实验步骤和结果，我可以提出一些可能需要改进的方面：细胞密度：你使用的细胞密度可能需要调整。对于HepG2细胞，推荐的密度是每孔5-8万个细胞。如果使用的细胞太多，可能会影响转染效率。转染试剂：你使用的是Lipo3000试剂，可能需要考虑更换其他转染试剂进行比较。例如，使用RNAiMAX试剂或者JetPRIME试剂等。需要注意的是，不同的试剂可能适用于不同的细胞类型，需要根据自己的实验条

4 回答3390 围观

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