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实验问答

27,851,881 科研人在看

问请问各位前辈，请问LY294002溶液如何配置呀,是先用DMSO配成母液然后再加吐温80，PEG300和水稀释吗？

huarenqiang5

先用100%DMSO溶解，然后用的时候1000倍稀释灌流。

4 回答849 围观

问各位大佬，胫骨怎么提取rna啊。

huarenqiang5

可以借鉴以下步骤和方法：小白鼠6只，雄性，4周龄，体重20-30 g。采用脱颈法处死，迅速解剖剥离双侧胫骨组织，用生理盐水冲洗干净，放于液氮中保存。1.骨RNA提取第一组(对照组):随机称取25 g的骨组织3份，在标准条件下用传统Trizol法一步裂解，氯仿纯化、异丙醇沉淀、乙醇再纯化，干燥后得到3份RNA沉淀，每份加入10uL DEPC水溶解。第二组(改良组):随机称取25g的骨组织3份放入2m

4 回答1134 围观

问RNA琼脂糖电泳四根条带?

huarenqiang5

从图片及操作综合分析考虑最后一根是降解产物。

4 回答3589 围观

问请问如果我的细胞需要经过刺激之后给药，那么在小室接种细胞时，这个细胞是给药和刺激完成后再接种到小室中

loveliufudan

这取决于你的实验设计和研究目的。如果你的目的是研究给药和刺激后细胞的生物学响应，那么你需要先刺激和给药，然后将细胞接种到小室中进行观察。如果你的目的是研究细胞在给定条件下的反应，那么你可以先将细胞接种到小室中，然后进行刺激和给药。在任何情况下，你需要注意细胞的状态和实验条件，以保证实验结果的可靠性。

4 回答280 围观

问做的胶体金试剂放久了会出现色浅？主要是什么原因？

huarenqiang5

主要原因有：1.被标记蛋白液中含有过高的盐离子。2.T线包被的抗体或者抗原的量过低或者提高胶体金的标记量过低。3.样垫的PH值，PH值越低，颜色越深，所以，包被液的PH值和胶体金标记的PH值也可以降低一下。4.使用胶体金颗粒的大小不合适，颗粒越大，颜色越深，但是，特异性会变弱。

4 回答1589 围观

问有哪些因子参与免疫球蛋白的类型转换？

huarenqiang5

主要有Th1细胞因子IL-2、IL-12、IFNγ；Th2细胞因子主要是IL-4、IL-5、IL-6、IL-10参与免疫球蛋白的类型转换。

4 回答934 围观

问像VH2-1具体是什么意思，重链可变区，那2-1是什么含义呢？

loveliufudan

“VH”表示重链可变区（variable region of heavy chain），“2”表示第二个可变区域，而“1”则可能表示第一个亚区（subregion）。重链可变区是免疫球蛋白分子中一个重要的区域，可以影响抗体与抗原的结合特异性和亲和力。

3 回答491 围观

问VH基因家族包括什么？其临床意义是什么

loveliufudan

VH基因家族是免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）的重链可变区（VH）基因的一个家族，其中包括了多个互相关联的基因。这些基因编码重链可变区域，这是Ig分子的一部分，也是抗体的可变部分，负责与抗原结合。VH基因家族是高度多样化和可变的，以便Ig分子可以结合到各种各样的抗原上。人类VH基因家族被分为7个亚家族（VH1-VH7），每个亚家族包含了多个基因。不同的VH基因家族在其序列和结构方面

3 回答3116 围观

问请问同一个逆转录试剂盒能够既做小鼠RNA的逆转录又做人类RNA的吗？

loveliufudan

一般情况下，同一个逆转录试剂盒可以用于逆转录不同来源的RNA，包括小鼠RNA和人类RNA。这是因为逆转录试剂盒中的逆转录酶通常是通用的，能够逆转录各种来源的RNA。然而，对于某些特殊的RNA，如长RNA、短RNA、mRNA等，可能需要特定的逆转录试剂盒才能更好地逆转录。此外，逆转录试剂盒的反应体系中也包含了其他辅助试剂，如缓冲液、酶切剂、核酸酶抑制剂等，这些试剂可能会对反应的特异性、效率和准确性产

4 回答443 围观

问苏木素复染过程中，如果染色不理想可以补救吗？怎么补救？

huarenqiang5

能够进行补救，染色深则分化时间稍长些即可；染色浅则再置于苏木素中染色即可。

4 回答1164 围观

问实验过程中，切片上有一些空余的地方会非特异性吸附抗体，造成后续结果的假阳性，怎么才能避免这种情况？

huarenqiang5

进行封闭后然后再进行一抗孵育这样可以有效避免假阳性的发生。

5 回答304 围观

问实验过程中，石蜡切片染色过程中总是出现脱片现象，怎么有效避免？

huarenqiang5

一般来说，如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话，如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。可以试试一下的方法：a.我们一般用APES：丙酮=1:50的处理液来处理片子，处理5min左右，然后水洗，烘干既可用于贴片。如果把水滴再处理好的片子上，水比较聚的话说明片子处理的好。b.贴片子的时候，展片的时间要把握好，不要太长，否则不利于贴牢。c.烤片子也

6 回答2994 围观

问请问这种泳道内部背景很黑是啥原因呢？跑了好几次都这样😭抗体是新配制的，用的是半干转20伏28分钟

sswei

背景黑可能有以下几个原因:1.没有封闭好,但这个可能很小2.一抗浓度太高,适当降低增加一抗稀释比例3.二抗孵育时间太长,一般室温45min,二抗切不可孵育时间太长

3 回答1218 围观

问关于IG转录的一些转录因子有哪些？作用是什么？

土井挞克树

给你分享一张图片，上面有转录因子及作用

3 回答657 围观

问IG的V（D）J模式是跟基因重排相关吗，原理是什么？

土井挞克树

3 回答869 围观

问提质粒时最后一步加Elution Buffer洗脱，如果没加好加到壁上导致最后的质粒少，会有什么影响吗？可以在离心前多加EB吗？

loveliufudan

如果在提取质粒时未将Elution Buffer彻底加入壁上，可能会导致一些未被溶解的DNA残留在壁上，从而导致纯化后的质粒DNA量减少。在离心前添加更多的Elution Buffer可能会有所帮助，但是需要注意的是，如果添加过多的Elution Buffer可能会导致质粒DNA的浓度过低，从而影响后续实验的结果。因此，建议在离心前仅添加足够的Elution Buffer以确保所有DNA都被溶解并

3 回答641 围观

问免疫荧光实验，阳性细胞数如何计数？

土井挞克树

阳性细胞计数为单位面积下阳性细胞数，你所说的是平均个数，还要计算面积（如1个高倍视野面积是多少平方），个/平方毫米，这样数据才有可比性。imagej可以计数，imagej很强大，很有用，希望大家共同学习，共同提高。

3 回答8756 围观

问小鼠免疫相关问题求教

洛噜啦噜啦嘞

首先，细胞免疫效果取决于抗原。正常情况下皮下接种，背部皮下即可。接种成功，其实，我们看的是一段时间之后，接种位置处是否出现溃烂，即表明有炎症产生，当然，并不是所有的免疫接种都会出现这种情况。

4 回答568 围观

问做免疫荧光时用到的免疫电镜的相关问题？

sswei

是为了更好地观测到DNA分子的超微结构。

3 回答558 围观

问这个图换一个表达样式可以怎么画？

sswei

可以做一个硫酸浓度变化反应趋势动画图。

2 回答304 围观

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