实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问大鼠胶原诱导类风湿关节炎模型如何造？

loveliufudan

首先，胶原诱导失败可能是由于多种因素导致的，如动物模型的品系和性别，胶原的制备和质量，注射的剂量和方法等。因此，您需要仔细检查实验过程中的每一个步骤，尤其是制备和注射胶原的步骤，确保每一步都符合标准操作规程。其次，您可以尝试使用其他类型的抗原来诱导关节炎，如蛋白质或细胞提取物，或者使用其他的动物模型或品系。此外，您还可以尝试改变注射的剂量和方法，或者采用其他的实验操作，如局部创伤或骨髓刺激等。

4 回答350 围观

问朋友们！我的内参为啥跑成这个鬼样子啊，上样前看见样品孔里有一点凝胶碎屑，跟这个有关系嘛？

土井挞克树

有一定关系，凝胶孔压的杂质会污染内参，影响内参的成像

4 回答325 围观

问用基因组DNA作为模板，对目的片段进行PCr扩增，pcr结果跑胶图如图。这是什么原因呢？要怎么解决

土井挞克树

引物设计有问题，而且pcr过程中存在降解

3 回答481 围观

问mtor2信号通路要怎么研究？具体研究哪几个关键蛋白比较好呢？

huarenqiang5

研究DEPTOR，mSLT8（GβL）蛋白比较好。

4 回答307 围观

问求问从成年老鼠提取星形胶质细胞，时候，怎么去除神经元的。有没有不传代，直接分离纯化星形胶质细胞的方法，然后进行WB等测试的。万分

sswei

在没有酶促孵育的情况下，使用机械解离可以更好地得到星形胶质细胞。

3 回答290 围观

问ELISA实验中二抗用Fab还是Fc片段，如何选择？

huarenqiang5

Fab段包含完整的可变区，以及恒定区的CH1区域。 Fc段仅指Ig恒定区CH2和CH3的区域，相当于Y字结构下面那一部分。建议二抗用Fc片段，减少降解片段的干扰。

4 回答1237 围观

问流式分选抗体IgG和IgM，用来结合人PBMC中的B细胞，一般用鼠抗人抗体吗？

huarenqiang5

是的，流式分选抗体IgG和IgM，结合人PBMC中的B细胞一般用鼠抗人抗体。

4 回答528 围观

问我要给小鼠灌胃一种中药，可是该中药并不溶于水，该怎么使其溶解度增加呢

huarenqiang5

不溶的话建议使用针管打进去就可以了。

5 回答2345 围观

问人PBMC中B细胞的流式分选

huarenqiang5

步骤如下：1、将静脉血20ｍl用ACD抗凝剂以容积比血：抗凝剂＝9：1抗凝处理。2、按血：分离液＝1：2注入淋巴细胞分离液上层，400g 20℃离心30分钟。3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g，10min洗三次。4、获得细胞可做分选或其他实验。建议：1、实验中用肝素方法抗凝，效果不好，因为肝素抗凝后交接层混浊，洗涤后没有细胞。推荐使用ACD抗凝剂，效果very good

4 回答1370 围观

问TUNEL 法检测细胞凋亡需要做技术重复或是生物重复吗？

loveliufudan

TUNEL法检测细胞凋亡通常需要进行技术重复和生物重复来确保实验结果的可靠性。在进行重复时，建议同时进行技术重复和生物重复。技术重复意味着对同一样品进行多次实验，以评估实验方法和技术的可重复性。一般来说，至少应该进行三次技术重复来减小随机误差的影响。对于TUNEL法检测细胞凋亡，可以在同一样品的多个位置上进行技术重复，以确保结果的可靠性。生物重复意味着对不同样品进行实验，以评估实验结果的稳定性和可

3 回答776 围观

问测量2-羟基对苯二甲酸荧光发射光谱，激发波长310nm，发射波长425nm可以用玻璃比色皿吗

huarenqiang5

利用荧光分光光度法测定2-羟基对苯二甲酸在425nm处的荧光强度,可以用玻璃比色皿。

4 回答747 围观

问请问我的hepg2怎么和ATCC的不一样？

Luckybabygirl

其实如果都是梭形，没有差的特别多，是勉强说的过去的，因为细胞在每个人手里养出来的不一样，状态和代数都不一样，可能到后期形态就发生改变了，但如果你这是刚买回来不久，就变样子了，就得去咨询下公司了

5 回答274 围观

问测定小鼠cTnT、LDH 、 CK-MB和BNP，是需要血清还是心脏组织

huarenqiang5

测定小鼠cTnT、LDH、CK-MB和BN P一般选用血清进行测定。

4 回答790 围观

问想问问有没有大神可以指点一下，我的小鼠造模半天内就出现死亡并且眼睛上有白点的现象，这是怎么造成的，该怎么处理提高小鼠造模成功率?

huarenqiang5

从以下几个方面来提高造模成功率：（1）挑选合适线栓，满足一下几点要求：线栓不可过硬。过硬线栓容易找手感，但是容易出现刺破蛛网膜下腔血管，导致颅内出血。同时过硬线栓还会改变血管自然形态，当线栓插入血管以后，因为线栓过硬，血管肌张力无法使得线栓改变形态，只能被线栓改变形态，导致血管处于紧绷状态，对于再灌注操作不利。选择硅胶头尽可能接近圆柱形的线栓，这样当线栓进入MCA外后，能够完全堵塞MCA，而不会出

3 回答511 围观

问大分子片段构建载体总是不成功

huarenqiang5

考虑以下问题：（1）buffer和酶切效率。同样受到内切酶的活力及buffer影响，值得注意的是不同厂家的内切酶一般匹配不同的buffer，所以在设计酶切引物时就应该优先核对buffer问题，同一厂家使用同一种buffer的两种酶酶切时可以同时加入两种酶进行酶切，节省实验时间，同时酶切效率会有所提高。（2）内切酶受到甲基化等因素影响一些限制性内切酶的酶切效率受到甲基化的影响，如MluI受GC甲基化

5 回答637 围观

问大鼠牙周缺损模型如何控制缺损大小？

huarenqiang5

按以下几点建议进行可以很好的控制缺损大小：建议在牙科显微镜下操作,可以精确地控制缺损大小,在后期实验中可以做到制备定量缺损。上颌第一磨牙近中根长度大约 4~5 mm,在做缺损前要注意不应过度磨损,以免与上颌窦穿通。用16cm血管钳撑开大鼠口腔,碘酚对上颌磨牙及近中黏膜区进行表面消毒,沿着大鼠上颌第一磨牙近中端部位用刀片割开3mm左右，上下颌完全分开,

3 回答756 围观

问请问一下，统计使用自体血细胞分离技术的数据，比较患者术后的凝血功能，使用什么统计方法啊？统计的数据中有

sswei

3 回答485 围观

问如何解决合成cDNA第一链合成的引物退火不充分？

cherish1100

可以适当的改变退火温度，高或者低2度

3 回答340 围观

问肌钙蛋白免疫荧光标记中的问题？

晴空a

建议使用 pH 7.0左右的偶联液，选择能够高度特异性结合肌钙蛋白的抗体，并进行充分的荧光微球活化和荧光标记过程控制，包括反应时间、抗体和微球的比例、荧光素的浓度等。

3 回答478 围观

问请问各位大神nrf2 蛋白wb怎么跑？

豆豆是个豆

我是用12%的胶跑的，转膜、封闭、孵二抗都是两个小时，然后洗的时候不要洗那么多次，三次，每次5min就够了，不然会洗掉。nrf2本身蛋白量67，但是做WB通常是检测100KD的条带（此时nrf2可能有和其他蛋白结合），而且同一泳道nrf2通常会分裂好几条条带。

5 回答3920 围观

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