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        请问EdU和Ki67做免疫荧光染色,怎么同时染

        相关实验:免疫荧光技术

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        mary203

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        2 个回答

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        sswei

        有帮助

        EDU是一种新型的非放射性同位素细胞增殖检测的方法,在细胞培养、实体组织及临床研究中得到了广泛的应用。该技术可用于细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、线粒体活性检测以及病毒增殖活性检测等,EdU亦适用于活体注射。与传统的免疫荧光染色检测方法相比,EdU检测法更简单、更快速、更准确,不需要严苛的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。

        而Kⅰ67则首先将组织以10%氢氧化钠溶液进行鲜片预处理,以达到组织解剖的目的,然后,将组织进行穿透,以植入Ki67抗体并加以保护;再然后,将Ki67抗体被可见染色,以突出细胞核或细胞浆;最后,使用显微镜或荧光显微镜观察染色细胞。所以,Ki67染色一般在EDU染色之后进行。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        EdU和Ki67都是常用的细胞增殖标记物,可以通过免疫荧光染色来检测。同时染色需要注意以下几点:

        免疫荧光染色的步骤需要严格控制,避免不必要的误差。建议采用优化的协议进行实验。

        EdU和Ki67的抗体标记需要使用不同颜色的荧光染料,如EdU可以用Alexa Fluor 488,而Ki67可以用Alexa Fluor 594。

        EdU染色需要在固定和渗透化后进行,而Ki67染色需要在固定前进行。因此,可以先进行EdU染色,然后对细胞进行Ki67染色。

        在进行染色前,可以使用EdU染料和Ki67抗体标记的初步实验来确定两者的最佳染色条件。这将有助于提高实验的成功率。

        免疫染色后,需要使用荧光显微镜观察细胞标记的荧光信号。在分析荧光显微镜图像时,需要分别分析EdU和Ki67的信号,并在图像中区分两者的荧光信号。

        总之,通过合理的实验设计和优化的免疫荧光染色方案,可以同时检测EdU和Ki67的荧光信号,从而研究细胞增殖和分裂的相关问题。

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