实验问答

21,912,731 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问IL-6，IL-1β，TNF-α，IL-17请问大神们这些炎症因子有无对应的aptamer？

loveliufudan

2 回答388 围观

问水迷宫小鼠活动非理想状态。

土井挞克树

可能是动物和水池大小不匹配过小的水池使动物爬上平台的偶然性增加，任务难度减小。过大的水池则会增加游泳路径，体力消耗过大，爬上站台的概率减少。推荐水池大小:大鼠180cm，小鼠120cm。

2 回答561 围观

问外源基因进入细胞主要有那些方法？

sswei

不同导入原核受体细胞的方法： ①转化：把以质粒为载体，构建的重组分子导入受体细胞的方法。 ②转导：以噬菌体或真核病毒为载体构建的重组分子导入受体细胞的方法。 ③三亲本杂交：将含有重组DNA分子的供体菌，被转化的受体菌含有辅助菌，在辅助菌作用下，将供体菌导入到受体菌中。不同导入真核受体细胞的方法： ①导入酵母中：对酵母进行转化的两种方法：a.细胞壁在CaCL2或多聚醇作用下，细胞壁具有穿透性，允许外

5 回答1057 围观

问质粒在DH5α里长，但在DH10α里不长呢？

土井挞克树

降低庆大霉素和四环素的浓度再培养。

2 回答541 围观

问求问：顺铂溶解问题

loveliufudan

Sigma品牌的顺铂粉末在溶解后，有时候会出现黄色颗粒沉淀，这是由于顺铂分子的结构和化学性质导致的。在4°C低温下保存，这种沉淀是正常的现象，不会对药效产生影响。在使用前需要将其加热使其完全溶解，一般可以使用37°C水浴锅或者将溶剂加热至50-60°C进行溶解。在加热过程中，尽量避免过高的温度或过长的时间，以免影响顺铂的稳定性和活性。需要注意的是，在顺铂的使用过程中，还需要遵守相关的安全操作规范，

3 回答1468 围观

问求教奇奇怪怪的WB

sswei

有以下几点原因：①预处理时未将膜完全均匀地浸透PVDF膜使用前要用100%甲醇浸透膜；有些NC膜需要甲醇浸湿，而有些NC膜不需要甲醇处理，只需要用转膜buffer浸透，具体根据所购买的NC膜说明书操作。②靶蛋白等电点等于或接近转移缓冲液pH值可尝试使用其他缓冲液如CAPS缓冲液(pH10.5)或使用低pH值缓冲液如乙酸缓冲液。③甲醇浓度过高过高甲醇浓度会导致蛋白质与SDS分离，从而沉淀在凝胶中，同

3 回答313 围观

问【认真修好审稿专家意见】

loveliufudan

在等待另一个审稿专家的意见期间，您可以先开始着手修改和完善您的稿件。这样做不仅可以提高您的审稿专家印象，也可以让您更加有条理地进行修改和完善。最后，祝您顺利通过审稿，稿件顺利发表。

3 回答265 围观

问求助！亚致死浓度到底是哪个区间的浓度？

土井挞克树

亚致死浓度是指在LC10-LC30这个区间的浓度，这个区间的浓度不会直接致死，但是存在累积效应的时候会致死一部分。

3 回答2763 围观

问免疫组化无色片求助

sswei

出现这种现象，有两种可能：1、真阴性结果：整个染色过程没有出现问题，组织或细胞确实不表达与抗体相关的抗原。2、假阴性结果：即此阴性结果不是真实的反映。假阴性结果又可分为两种情况：（1）切片中根本就不包含所预期检查的组织或细胞。出现这种情况，要麽是病理医生选择错了切片或抗体选错了，要麽是技术员选错了蜡块。（2）染色过程中的某一或某些环节出了问题。比如，组织未进行抗原修复，有的组织必须经过抗原修复才能

3 回答529 围观

问求助，ELISA试剂配置怎样操作能够充分混匀啊？

z流沙z

如果是管子可以涡旋振荡，如果是瓶子可以上下颠倒混匀，一孔有值一孔没值，一般是加样问题，加样后用枪头轻柔混匀，或者轻轻拍打侧壁

3 回答694 围观

问800MS曝光以后看到背景很杂连对照也有杂背景，红框的是对照，这是什么原因呢？

z流沙z

这还算可以，主要就是抗体的非特异性结合。可以延长封闭时间，室温2-3h，另外抗体可以用5%BSA或者脱脂牛奶来配制

3 回答255 围观

问有没有做个磷酸化的大神遇到过这种情况呢？只出来两三个组，同一批蛋白同个牌子的一抗，另一个指标能出来，这个指标只能出来一俩个组

z流沙z

首先有存在条带，证明整个实验基本上没有问题。至于条带弱或者有的没有条带，有可能是刺激因素不够导致蛋白没有发生磷酸化，也有可能是蛋白上样量不够导致没有显现出来，因为看着背景也比较脏，可以增加上样量和抗体浓度，注意用BSA封闭

3 回答172 围观

问石蜡免疫荧光

sswei

可能存在切片上的石蜡残留，若血清质量不好，里面可能含有纤维蛋白原(正常血清是不含有纤维蛋白原的)，一旦沾到组织上，基本洗不掉了，也会增强自发荧光信号等情况。

3 回答404 围观

问ELISA

z流沙z

不一定，看读值大不大，有时候可能只是一些非特异性的背景

3 回答421 围观

问蛋白质与糖学

z流沙z

纯化的目的是提纯，过程中会有损失，如果还有浓缩的话可能量会增多

3 回答311 围观

问怎么看免疫共沉淀的图，求助

z流沙z

lysate就是相当于普通wb，检测在细胞中转染过表达的所有蛋白是否表达，然后加入珠子和相应抗体进行富集IP，看看目的蛋白和靶蛋白之间是否相互作用，或者目的蛋白是否影响靶蛋白的泛素化水平。图中的一片smear就是泛素化条带

3 回答1343 围观

问wb统计方法

z流沙z

不能进行数据挑选，要每个样品每个组别

3 回答1603 围观

问wb条带灰度分析的数据处理

z流沙z

单次实验的对照组设为1，同次实验的实验组以及不同批次实验的对照组和实验组都以这个对照组来进行归一化就ok了

3 回答5846 围观

问回收试验

z流沙z

细菌在培养基中能否繁殖，从而扩增质粒，质粒加到培养基中是没有效果的

3 回答633 围观

问联赛图结果不显示这是为什么啊，求大神指教！

sswei

由于软件数据设置选择错误所致的。

2 回答156 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

实验小助手

扫码领资料

反馈

TOP

打开小程序