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乳腺癌细胞支原体怎么pcr检测呀?求详细试验方法
土井挞克树
为了准确判断细胞是否有支原体的污染,待测的细胞培养液样品需要取自换液后培养2-3天且汇合度在90%左右的细胞培养液上清(贴壁细胞)。悬浮培养的细胞也需要在换液传代后,让细胞生长2-3天再取培养液进行检测
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问
求大神给意见,好不容易的宝宝舍不得?
loveliufudan
16号和17号染色体缺失是一种比较罕见的染色体异常,可能会导致胎儿的生长发育受限,智力发育障碍,肾脏和泌尿系统异常,糖尿病等一系列的问题。但是,并不是所有的胎儿都会出现这些严重的症状,有些胎儿可能只有轻微的影响,甚至没有明显的异常。这取决于染色体缺失的具体位置,大小,范围和类型,以及胎儿是否有其他的染色体异常或遗传因素。因此,你需要和你的医生或遗传顾问详细了解你的具体情况,评估你的风险和预后,以及
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问
为什么span80浓度越高,液滴越不稳定?
loveliufudan
一个可能的解释是,Span80的浓度过高会导致其分子在油相中的聚集,形成胶束,从而导致液-液界面张力的增加,反而使微液滴不稳定。此外,大豆油本身也可能会影响微液滴的稳定性。一些研究表明,某些种类的植物油中存在不稳定的成分(如脂肪酸),会影响微液滴的形成和稳定性。因此,在制备微液滴时,选择合适的油相成分也非常重要。最后,水相的配方也可能会影响微液滴的稳定性。在您提供的结构中,含有羧基和磺酸基,这些官
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问
补实验的时候,以及想把同一材料的多个基因的表达放一张图,以看出来趋势的时候,如何进行板间校正?
土井挞克树
可以用image做板间校正,把所有结果放在一张图上
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问
如果RNA提取浓度太低(甚至达不到逆转要求的量)的情况下,定量是不是只能靠cDNA浓度?
土井挞克树
如果rna浓度太低,可以靠cdna进行定量,但如果二者浓度差异太大,结果误差也会增高。
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问
同一个样本做同一个基因,做了两个复孔,但是一个孔溶解曲线的温度是81.5,另外一个孔是81度,这是为什么呢?(溶解曲线都是单峰)
土井挞克树
设置的问题,溶解会有不同的温度设置,温度设置差异结果就会有差异,但是相差0.5是可以接受的
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问
qPCR每次做结果都不一样,大多时候各组没有差异,怀疑QPCR不准
土井挞克树
先检查体系是否有降解,每次都不一致的话最可能的就是体系存在降解问题。
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问
加完样本不立即上机,冻-20℃过夜可以吗?
土井挞克树
过夜的话样品很容易降解,建议尽快上机
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问
用质粒做qPCR的时候,低浓度的不同稀释倍数质粒(1undefined4-1undefined1copies/ul)CT值结果很接近,是质粒稀释的问题吗?要
土井挞克树
考虑质粒本身浓度太低,所以稀释后ct值拉不开,很接近。
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问
内参相差1个ct值的结果可以用吗?内参相差多少的结果可以用?如果内参差别比较大样品要如何处理呢?
土井挞克树
差一个ct值是可以用的,如果差的大就需要重新稀释cdna
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问
外周血PBMC提取RNA的技巧(怎么保证提取过程中RNA不被降解)
土井挞克树
减少污染和高温,可以加入稳定剂。
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问
qPCR需要保证每个样本的CDNA浓度一致吗?
土井挞克树
不需要完全一致,保持稀释倍数一致很重要
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问
直接提取并检测dna的话 引物设计有哪些注意的点?和那种mRNA逆转录成cDNA再进行检测所使用的引物以及设计过程是一样的吗?
土井挞克树
直接提取的话引物需要处理,比如把不翻译的修饰部分去掉。
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问
求助|投稿 journal of neurology的利益冲突说明在哪下载呀?
sswei
可以写一份说明各个作者在文章中的关系,盖上单位公章及各作者的签名送编辑部。
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问
新医学杂志审稿流程是什么样的
sswei
一般定稿后就录用了,可能杂志社忙,耐心等待。
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问
叶酸的性质是有多不稳定哇?有没有前辈给点建议。
dxy_a18nvxdq
注意大环境的影响,光和实验室里的环境
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问
中和抗体
sswei
这个与抗原的表位有关,有些抗体识别的是线性表位,即抗原变性后的表位,比如WB中的抗原表位是线性表位,有些抗体识别的是空间表位,即抗原的天然结构,可能变性后无法识别。但也有些抗体既能识别线性表位也能识别空间表位,具体的要看抗体说明书上的用途说明。从本质上来看,都是一种抗原抗体的特异性反应,不过中和抗体的反应体系是溶液,WB的抗体是针对固体相上的抗原,要看怎么设计的实验。
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问
肝癌huh7裸鼠容易成瘤嘛
sswei
Huh7是指人肝癌细胞系,是由Naka-bayashi等人建立的,细胞源自一个日本男性高分化肝细胞肝癌,HBV阴性,能产生一些细胞质蛋白,如白蛋白、a抗胰蛋白酶、AFP等。HUH-7人肝癌细胞是由上皮样和致瘤细胞组成的永生细胞系。大多数的HuH-7细胞是高度异质的。1000000个细胞数 细胞传代:1:2~1:4传代;每周2~3次。在裸鼠上容易成瘤。
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问
如何利用时空捕获芯片和原位RNA捕获技术,对小鼠胚胎发育过程中与出生缺陷相关的基因进行定位,并在单细胞空间组技术上实现基因与影像
sswei
采用Stereo-seq技术和原位RNA捕获技术,可对小鼠胚胎发育过程中与出生缺陷相关基因进行定位。
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问
胶原酶分种属区别吗
sswei
胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。并不分种属区別。胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞,用于哺乳动细胞的分离。
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