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问
去泛素化酶UCHL5具有什么作用?
loveliufudan
1.调控泛素降解途径:UCHL5参与调控泛素降解途径,可以从泛素化的蛋白质上去除泛素标记,从而减少它们的降解速度。UCHL5的活性还能够促进有降解目标的泛素连接酶E3的活性。2.调节蛋白稳定性:除了参与泛素降解途径外,UCHL5还能够直接调节某些蛋白的稳定性。例如,在胚胎干细胞中,UCHL5可以去除表观修饰蛋白SUZ12的泛素标记,从而增强其稳定性,维持干细胞状态。3.参与DNA损伤修复:UCHL
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问
loading buffer连到一起呈锯齿状,上样量20ul,请问为什么会出现这种情况?
loveliufudan
很可能是loading buffer 没有完全溶解或没有彻底混合。可以首先尝试充分混合和完全溶解 loading buffer。
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问
本人要做原代脂肪细胞,但是提取之后发现养着养着培养皿就开始出现小黑点,像细沙一样,请问应该怎么解决
loveliufudan
这种情况可能是由于细菌或真菌污染所致,可以考虑采取以下措施来解决问题:丢弃受污染的培养皿:如果你发现一些小黑点,可以将受污染的培养皿丢弃,以防止进一步污染其他培养皿。更换培养基:你可以更换新的培养基,并且添加适当的抗生素或抗真菌药物,以杀死任何污染的微生物。加强无菌操作:要防止细菌或真菌污染,可以加强无菌操作,如在实验室中进行操作时穿戴实验服、戴手套,使用灭菌器灭菌培养器具等等。检查供试细胞的来源
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问
这个肝的HE能看出有什么异常吗?
土井挞克树
可以看到部分炎性细胞,但仍属正常。
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问
请问一下表皮细胞常选用的细胞株是哪种呀?怎么搜索查找到皮肤相关细胞常用的细胞株呢?(新手小白真诚发问)谢谢谢谢!
loveliufudan
表皮细胞的常用细胞株包括HaCaT、HEK293T、A431、NHDF、NHEK等。如果你想查找皮肤相关细胞的常用细胞株,可以通过以下几种方式:在PubMed等学术搜索引擎上进行文献检索,使用关键词“skin cells”、“epidermal cells”、“keratinocytes”、“melanocytes”等,可以找到相关研究,其中常用的细胞株可能会被提到。到细胞库网站上搜索相关的细胞株
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问
新手求助单细胞RNA测序?
loveliufudan
在进行单细胞RNA测序前,通常需要同时提取包括细胞核RNA和细胞液RNA在内的所有RNA种类。因为RNA分布在不同的细胞组分中,细胞核RNA和细胞液RNA具有不同的生物学功能,因此同时提取这两种RNA,可以全面了解单个细胞的转录本信息。至于细胞核RNA的提取方法,可以使用一些商业化的试剂盒。这些试剂盒可以通过使用异丙醇/氯仿分离细胞核和细胞液,将细胞核RNA和细胞液RNA分离。除此之外,也可以使用
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问
RNA反转录之后的cDNA跑胶该选择多大的marker?
loveliufudan
一般而言,可以根据已知目标基因的长度来选择 Marker 的大小。如果你希望检测的目标 DNA 片段在 100bp-1000bp 左右,则建议选择 100bp DNA ladder 或者 1kb DNA ladder 作为 Marker。如果你希望检测的目标 DNA 片段比较小,则可以选择 50bp DNA ladder 作为 Marker。因此,选择合适大小的 Marker,能够更好地检测出期望
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问
EMSA实验中单独分析标记DNA可见条带(DNA已标记biotin),但1.5u g纯化蛋白和探针标记的DAN混合后上样无带
loveliufudan
这可能是由于以下原因之一导致的:可能存在过多的非特异性结合蛋白或污染物,导致特异性带的信号被掩盖或者丧失。这种情况下,我们建议优化实验条件,如调整反应温度、缓冲液组成、盐浓度、探针和蛋白的比例等,以最大限度地减少非特异性结合。没有充分优化 EMSA 实验条件,导致探针和蛋白的结合比例过低,无法形成特异性带。在这种情况下,建议尝试优化 EMSA 实验条件,以最大限度地增强探针和蛋白之间的结合,例如调
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问
体外培养巨噬细胞过程中,巨噬细胞的形态发生明显变化,体积变大。求助下这种情况是否正常?
loveliufudan
在培养的早期阶段,巨噬细胞可能会分泌多种细胞因子,通过细胞外基质与其他细胞进行交流,此时巨噬细胞的体积可能会逐渐增大。此外,当巨噬细胞处于激活状态时,它们的形态也可能会发生改变,包括伸长、分枝和细胞质的增加等。
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问
细胞培养过程中的一个疑问求助?
loveliufudan
对于其他pH缓冲系统,例如HEPES、MES和PIPES等,通常不需要使用二氧化碳培养箱来维持pH。这是因为这些pH缓冲体系不会受到CO2的影响,可以在常规的CO2无菌培养箱中稳定地维持pH值。不过,在培养细胞时,还是需要注意使用适当的pH缓冲系统,并遵循相应的操作指南,以确保细胞的正常生长和功能。
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问
酵母菌感受态制备方法
汤姆卜丽波
我们一般是1 M DTT:称取3.09gDTT,加入20 ml 的0.01 M NaOAC
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求助求助
汤姆卜丽波
我感觉可能是你电泳缓冲液的问题,因为都拖尾了,换一个新的缓冲液
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问
实验用药和临床用药一样吗
sswei
实验用药是经过研究针对某些特定疾病有特定疗效的药物,这种药物主要应用于实验,但是由于对这种药物的性能不是完全的了解,以及针对不同人体,,不同的药物配伍是否会产生其他不良反映等问题还没有确切的答案,所以这种药物不被国药局正式认可以及允许大规模的生产。而临床用药则是经过国药局认可注册的,可以用于实验用药。
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问
DAVID做GO富集
汤姆卜丽波
全是1没有变化么。那肯定是你的参数设置错了,你去筛选的是差异基因吧,然后做GO富集,先按照默认参数跑一边
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问
Elisa的结果只拍照可以吗?
汤姆卜丽波
一般来说ELisa不要求原始数据,应该没问题
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问
求助:☞蛋白质3D结构预测
sswei
先用酶降解为短的肽段,再用质谱仪分析,从谱图中识别每个肽段的氨基酸序列,再将诸多肽段的序列拼接起来成为完整的蛋白质序列。
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问
各位大佬,我这个样品跑不齐是什么原因呢
汤姆卜丽波
你的样品制备也有问题,多的那些适当降低上样量,同一批样品保证浓度一致
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问
内参GAPDH条带锯齿状,别人跑的都是直的
伏研飞2023
可能是胶的问题没凝好,也可能是电泳电压太大,主要可能还是配胶电泳的问题?
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问
线性化片段转入毕赤酵母SMD1168
汤姆卜丽波
你验证过片段是对的的话,如果是转了很多次都没有都没有阳性,那有可能是你的感受态细胞出了问题,就是转不上去
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问
请问WB条带有这种大印子是什么问题啊?
汤姆卜丽波
这个可能是你的封闭液有问题,你可以配完了过滤一下
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