实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问HE染色

土井挞克树

看HE图像可以看到你的肝组织脱水过度了，需要缩短脱水时间，不然解剖是看不清楚的

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问trizol法提视网膜RNA，超声破碎仪破碎的，最终没有沉淀，浓度很低很低，求问到底是为什么？？？

loveliufudan

可能有几个原因导致您使用 Trizol 法提取视网膜 RNA 没有得到高浓度的沉淀：样品量太少：视网膜是一个很小的组织，可能需要更多的样品来得到足够的 RNA。您可以尝试使用更多的视网膜组织来提取 RNA。超声破碎不充分：超声破碎仪需要将样品完全破碎，以释放细胞内的 RNA。您可以尝试增加超声破碎的时间或使用更高功率的仪器。酚/氯仿提取不充分：在使用 Trizol 提取 RNA 时，关键的步骤是酚

1 回答1322 围观

问请问如何提取耳蜗基因组？

loveliufudan

1.收集样本首先需要收集耳蜗样本。可以使用小鼠、人类或其他动物的耳蜗组织，根据实验需要选择。2.细胞裂解将收集的样本置于液氮中，然后用组织破碎机或手工研磨器将样本细碎。加入1x PBS液体，彻底混合，最好放到冰上搅拌15-30分钟，以细胞裂解液裂解细胞膜并释放DNA。这里建议加入蛋白酶抑制剂，以防止DNA降解。3.提取DNA加入适量的DNA提取试剂（如膜分离试剂、异硫氰酸盐、酚/氯仿等），并进行高

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问蛋白纯化三条带？二分之一和二倍？

loveliufudan

可能是由以下原因导致的：1.蛋白降解：在纯化和表达过程中，蛋白可能因降解酶的作用而被切割成较小的片段。这可能解释了为什么你观察到一个较小的条带（约20 kDa）。为了避免这种情况，可以在制备和处理蛋白样品的过程中添加一定的蛋白酶抑制剂。2.蛋白聚合：另一个可能的原因是蛋白聚合。在你的描述中，你提到了一个高分子量条带（假设约80 kDa），这可能是目标蛋白的二聚体。可以尝试使用不同的表达条件、纯化方

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问2个ntc有扩增曲线和熔解曲线，另外一个没有，正常吗，原因是什么，解决方法是什么

loveliufudan

如果您的样品中的两个NTC都显示了扩增曲线和熔解曲线，而另一个NTC没有，那么可能有以下原因：该NTC的PCR反应可能失败了，没有扩增出任何产物，导致没有曲线。这可能是由于技术问题，如引物或探针的失效、反应体系中的污染物等导致的。该NTC可能含有低水平的污染物，但是污染物的浓度过低，不能产生扩增曲线或熔解曲线。

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问3t3-l1细胞进行诱导分化时密度在80%可不可以？为啥诱导分化时间越长，细胞之间的间隔会越变越大？

loveliufudan

密度在80%时，3T3-I1细胞可以进行诱导分化，但需要注意的是，细胞密度过高可能会导致细胞自身的压力过大，影响诱导分化的效果。因此，在进行诱导分化前，应该考虑到细胞密度的因素，控制好细胞的数量，以达到最佳的诱导分化效果。关于诱导分化时间越长，细胞之间的间隔会越变越大的问题，这可能是由于细胞分化后的功能和形态发生了改变，导致其对外界环境和邻近细胞的作用方式和联系发生了改变。例如，分化后的细胞可能会

3 回答384 围观

问验证某目的基因在肺腺癌细胞株中的表达，细胞株怎么选

汤姆卜丽波

你可以先在网站上用生信数据筛一下，选择有差异表达的细胞株来培养

3 回答403 围观

问大肠杆菌逆转录可以使用oligoDT吗，我的表达基因上有连续的a，能否使用oligoDT，然后做qpcr

汤姆卜丽波

可以做的，能p出来，只要有一点表达都能p出来

3 回答239 围观

问中华急危重症护理杂志

huarenqiang5

一般情况下外审后在三周左右就会进入下一步。

3 回答221 围观

问求助这个杂志Journal of clinical pharmacy and therapeutics可以投稿吗？急！

huarenqiang5

这种情况为了文章能顺利发表建议还是投其他期刊为好。

3 回答244 围观

问细胞污染

Kimser

也要考虑枪头等器材的问题，此外，建议对照其他人无问题的培养基，孵箱2-3天，多次观察

3 回答273 围观

问我要研究动脉粥样硬化内皮细胞，选择哪种内皮比较好呢

sswei

研究动脉粥样硬化内皮细胞，选择大鼠胸主动脉血管内皮细胞比较好。

4 回答686 围观

问Transwell共培养怎么提取上室细胞的蛋白

balalaLy

可以先把细胞消化下来，离心去除胰酶，再pbs洗一下，加裂解液，或者不消化直接弃掉培养基，pbs洗后加裂解液。

3 回答1394 围观

问提取小鼠原代脂肪间充质干细胞遇到的问题

汤姆卜丽波

我觉得空泡可能是你混了其他细胞进来，胞质内的黑点要注意支原体污染

2 回答473 围观

问细胞培养污染了

麻黄连翘赤小豆

细菌污染，这个细胞没法拯救了，看看培养基或者冻存细胞是否污染

3 回答465 围观

问肿瘤成球实验

汤姆卜丽波

甲基纤维素培养基是给细胞球提供类似空间效果的，生长因子是促生长的

3 回答929 围观

问HKC细胞形态

汤姆卜丽波

是在培养的细胞么，那可能是培养基用久了，营养不够了，换新的培养基试试

3 回答235 围观

问哪位大佬能帮助解读一下最后这个公式是什么意思（是荧光分光光度计使用的）

汤姆卜丽波

这个公式有点像线段法，除数Sa-B2是你的代测样品去掉其他溶剂干扰后的吸光度值，被除数是标准样品，你用的浓度是200就是200的值，也是一样的道理，然后算比值，乘标准浓度就是你样品的浓度

2 回答195 围观

问求助！HE染色染不到细胞核，然出来也分不清细胞，只能看到一大片红色，有办法拯救吗？

麻黄连翘赤小豆

伊红染色时间缩短，苏木精时间延长。可以以5秒为一个试验的时间

2 回答857 围观

问求助！我想问一下石蜡切片切的很碎有没有什么办法拯救。

dangaozhanghui

看图片中切片有刀痕更换刀片同时蜡块有些干建议重新浸蜡重新切

6 回答577 围观

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