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实验问答

23,124,933 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请问鸟类的血液去除血浆后的血细胞能否提取DNA

此用户已注销

能～除红细胞血小板外～其他细胞细胞沉淀可分别提取DNA和RNA

4 回答592 围观

问细胞培养背景有不会动的黑点，是怎么回事？

此用户已注销

细胞营养不良，生长状态欠佳，或细胞老化都有可能在培养过程中出现小黑点。通常经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多。有些沉淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在37℃中欲培养此“微生物“，但在37℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖。

4 回答3140 围观

问动物实验大鼠二度、三度烧伤创面如何造模？

loveliufudan

1.准备实验器材：需要准备实验所需的大鼠、手术器械、热源等。可以选择使用热水、金属板等作为热源，其中金属板可以提供更加精确的热控制。2.麻醉大鼠：使用适当的麻醉药物将大鼠麻醉，确保大鼠处于无痛觉状态。3.制备创面区域：根据实验需要，选择在大鼠的背部或侧面制备烧伤创面。首先将创面区域的皮毛剃除或剪短，然后用清洁剂或酒精消毒。4.准备热源：将热水或金属板加热至适当温度。根据需要制造二度或三度烧伤，可设

3 回答896 围观

问常用的细胞培养基(dmem;1640)含有那些组分？

sswei

氨基酸组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。必需氨基酸包括L-谷氨酰胺、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸等。维生素维持细胞生长的生物活性物

3 回答1828 围观

问请问各位科研大佬小鼠灌胃针可以重复使用吗

Dr_劉医生

小鼠灌胃针可以重复使用，但需要进行消毒。灌胃针的消毒方法有多种，如用酒精、高锰酸钾、紫外线等。在使用前，需要对灌胃针进行消毒处理，以避免交叉感染。

4 回答2105 围观

问贴壁的hela细胞系培养过程中，培养基里总有不少飘起来不贴壁的细胞，但细胞生长速度和形态都没有问题，求解答怎么办？

秋秋欣欣

也可能是你消化过度了，导致死细胞较多

3 回答371 围观

问SH-SY5Y 90%FBS+10%DMSO冻存复苏后死细胞较多？

loveliufudan

在SH-SY5Y细胞系的冻存和复苏过程中，如果出现大量细胞死亡，可能是以下原因导致的：冻存过程中的细胞损伤：冻存过程中细胞可能会受到不可逆的损伤，这可能会导致一定比例的细胞死亡。为了减少这种损伤，建议您在进行冻存前先进行适当的细胞培养和预处理，如适当的细胞密度和培养时间。冻存液的配制：冻存液的配制是影响细胞冻存和复苏效果的重要因素之一。如果冻存液的配制不正确，可能会导致大量细胞死亡。建议您使用经过

3 回答463 围观

问培养原代小鼠心肌细胞，胰酶消化过程需要多久呢？消化了10分钟，感觉细胞就都死了。提取的组织是不是不能用PBS代替冲洗呢？

sswei

原代小鼠心肌细胞胰酶消化过程2-3分钟即可。

4 回答1561 围观

问做cck8时，为什么有趋势，但是孔颜色没有特别大的变化

loveliufudan

在您的实验中，虽然出现了趋势，但是孔颜色没有特别大的变化，可能是由于CCK-8试剂作用时间过短或者作用浓度不够高的原因。CCK-8试剂是一种细胞代谢指标，能够反映细胞代谢活性的变化，如细胞增殖、细胞毒性等。在使用CCK-8试剂时，通常需要根据细胞类型、培养条件和实验目的等因素进行优化，以确定最适宜的作用时间和浓度。如果出现趋势，建议您在进行实验前，根据细胞类型和实验目的等因素，合理控制细胞密度，避

3 回答329 围观

问自己平常的细胞冻存能不能不用FBS，为什么现在流行的无血清冻存液可以无血清

loveliufudan

在细胞冻存的过程中，通常需要使用冻存液来保护细胞的完整性和存活率。FBS作为一种常用的细胞培养液添加剂，能够提供细胞所需的营养物质和生长因子，同时还能够防止细胞因冷冻过程中的机械损伤而受到伤害。虽然使用FBS可以提高细胞冻存的存活率和质量，但并不是所有细胞都需要使用FBS。一些细胞在无血清条件下也可以存活并恢复生长，例如骨髓间充质干细胞、小鼠胚胎干细胞等。因此，在特定的情况下，可以尝试使用无血清的

4 回答569 围观

问western blot跑出来的内参总是不齐，可能会是啥原因呢？

土井挞克树

可能是上样量不同不均匀，调整上样量再跑，还可能是分离胶浓度太高，可以调整分离胶浓度再跑

3 回答2069 围观

问细胞冻存到液氮里，复苏第二天长势很好，之后就越来越差为什么？

sswei

细胞复苏后次日没有及时换液去除死细胞,复苏时状态较差的细胞死亡,影响正常细胞生长。

4 回答437 围观

问请问规定酿酒微生物接种量为1×106，怎样确定这个菌的接种量就是1×106？

loveliufudan

要确定酿酒微生物接种量为1×10^6，可以通过以下方法：液体培养基计数法：将酵母或细菌菌株接种到液体培养基中，经过适当的培养时间后，用计数板对细胞进行计数，然后根据菌落形成的比例来计算接种量，从而得到所需的接种量。集落计数法：将菌株接种到固体培养基上，培养适当的时间后，用集落计数板对形成的菌落进行计数，并根据菌落大小和形态来确定接种量。光密度法：通过测量细胞的光密度来确定接种量，可以通过与已知浓度

2 回答539 围观

问关于pcr特异性引物

loveliufudan

不同的PCR方法，例如qPCR、long-PCR和普通PCR，通常会使用不同的引物。这是因为不同的PCR方法需要针对不同的目的进行设计，因此需要选择适合特定PCR方法的引物。特异性引物的选择也需要考虑到共生菌的特性和目标基因序列的多样性。如果您要同时检测两种不同瓢虫体内共生菌，使用相同的特异性引物可能会导致交叉反应，从而使得结果不准确。因此，最好为每个目标共生菌设计独特的引物，以确保检测的特异性。

2 回答523 围观

问求助｜腺病毒过表达中设置NC组、WT组，两个组分别代表什么意思？

橙汁儿青柠味

NC组代表阴性对照组，WT组代表空载对照组

3 回答7046 围观

问Meta分析写作探讨

loveliufudan

关于数据提取的问题，您提到了一些常见的情况，例如一些文章只提供了O值，或者提供了多个OR值等。这些情况可能会增加数据提取的复杂性和不确定性，但是这些问题可以通过一些技巧和方法来解决。例如，如果某篇文章只提供了O值而没有OR值，您可以通过计算OR值的公式来计算OR值。如果文章提供了多个OR值，您需要确定哪个OR值最适合您的meta分析，并考虑如何进行合并。在处理这些数据时，您需要确保自己的方法是合理

2 回答519 围观

问脂质命名

土井挞克树

35:1是OH基团的位置信息，共35个碳原子，在一的位置上有基团

2 回答1270 围观

问小鼠结肠炎实验

balalaLy

固定太久对组化检测蛋白表达会有影响，但对HE观察形态不影响。

2 回答499 围观

问BMDM消化 M2与T共培养

loveliufudan

如果您想消化MO并重新铺板做M2极化，可以将MO收获后通过特定方法消化，比如使用0.05%胰蛋白酶-EDTA等试剂进行消化。消化时间可以根据实验需要和所用试剂进行优化。通常，消化时间在10-30分钟之间，可以通过观察细胞状态来决定是否需要延长或缩短消化时间。消化后重新铺板并进行M2极化，可以使用一些常规的方法，如IL-4和IL-13等促进M2极化的因子。此外，与T细胞的共培养也是可能的，但是需要具

2 回答1900 围观

问求肾小管线粒体损伤指标

烧伤科常医生

可以通过:1.尿NAG酶，该酶来自肾脏，大多数肾脏疾病损伤时，尿nag活性异常。2.尿溶菌酶，肾小管线粒体功能异常的时候，一般会出现尿溶菌酶升高。3.尿视黄醇结合蛋白尿RBP，肾小管线粒体功能损伤的时候RBP浓度升高

3 回答471 围观

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