skyye
培养的大鼠原代BMSC细胞,打算做成骨诱导的,但细胞养到第九天就脱落了部分甚至全部脱落,用了明胶包被孔板也没起作用,这个应该如何包被孔板比较好呢?又白干了,浪费了培基和诱导液,也浪费了9天时间(●°u°●) 」
loveliufudan
原代BMSC细胞的骨诱导培养需要复杂的培养条件和诱导液,同时需要注意一些细节问题,才能够成功地促进细胞的成骨分化。以下是一些可能的原因和相应的建议:
培养基和诱导液的配方不正确:BMSC细胞的骨诱导培养需要特定的培养基和诱导液,包括适当的营养物质和生长因子。如果配方不正确或不适合该细胞系,会导致细胞死亡或脱落。建议检查培养基和诱导液的配方是否正确,并根据需要进行调整。
孔板和包被的质量不佳:使用质量不佳的孔板或包被,可能会导致细胞脱落。建议使用高质量、无菌的孔板和包被,以保证培养环境的稳定和纯净。
细胞密度和传代次数的问题:如果细胞密度过高或者过低,或者传代次数过多,都可能导致细胞死亡或脱落。建议控制好细胞密度和传代次数,以保证细胞生长和增殖的稳定。
为避免细胞脱落和浪费,建议:
优化培养基和诱导液的配方:根据实验要求和BMSC细胞的生长特性,选择适合的培养基和诱导液配方,并进行优化和调整。
使用高质量的孔板和包被:选择高质量、无菌的孔板和包被,并在使用前进行充分的消毒和清洁,以避免细胞脱落和污染。
控制好细胞密度和传代次数:在接种和传代过程中,要注意控制好细胞密度和传代次数,以避免过度接种或传代导致细胞死亡或脱落。
注意操作细节问题:在操作过程中,要注意细节问题,例如避免机械创伤、避免细胞暴露在室温下等情况,以保护细胞的完整性和生命力。
土井挞克树
细胞脱落说明培养基环境不适合细胞生存,可能是细胞密度太大,或者氧气减少,局部代谢产物过多造成的,建议适当降低细胞密度
skyye
但BMSC诱导成骨分化需要培养14-21天,细胞会长得很满很满。其实有时候也能养的比较好,细胞不脱的,但这次不知道什么原因好多个孔的细胞都脱了
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1 培养基的PH值是不是合适(通常在pH7.3-7.4为合适),细胞在培养过程中,有旺盛的代谢活动,代谢产物往往会时培养基的ph值降低,培养基颜色(有酚红指示剂的)变黄,即使换液。2. 细胞的培养密度,有的细胞不能长得太密,要即时传代。3。 若刚开始出现细胞脱落,尽快换液,洗掉死细胞(某些死细胞的物质进入培养基后,能引起细胞的大量凋亡。