实验问答

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问哪位大佬有盆腔炎大鼠造模的视频？非常感谢！在线求学习！

土井挞克树

这里没法发视频，给你发造模方法吧细菌悬液注射造模法【造模机制】人类慢性盆腔炎绝大多数为细菌感染所致,其中大肠杆菌在其发病中为主要病原微生物,病变多为单侧或一侧轻一侧重,且慢性盆腔炎患者多数有宫腔操作史。【造模方法】1、动物和菌液 Wistar 大鼠。麻醉用品(如戊巴比妥钠),细菌悬液(大肠杆榭、金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌按 2t1：1 混合,用元菌盐水稀释,浓度为 30 亿/ml混合菌)或大肠杆

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问请问做鸟类DNA的遗传分析需要做些什么呀？

loveliufudan

做鸟类DNA遗传分析的过程大致可以分为以下几个步骤：样本收集：首先，你需要从鸟类的组织或血液中提取DNA。这通常需要在野外捕捉鸟类并采集样本。注意，采集样本的过程需要遵循相应的道德和法规要求。DNA提取：将收集到的样本带回实验室，使用DNA提取试剂盒进行DNA提取。提取过程需要遵循试剂盒的操作说明，并确保实验过程中避免污染。微卫星分析：已知的9个微卫星座位是指具有高度多态性的鸟类微卫星。通过PCR

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问请问一下，4%多聚甲醛固定组织，可以在－20度冰箱保存吗（后续做石蜡包埋）？如果可以的话，可以保存多久呢？

loveliufudan

4%多聚甲醛固定组织可以在-20°C的冰箱中保存，但需要采取适当的措施以确保样本的完整性和质量。为了最大限度地减少样本的变性和降解，建议在冰箱内使用液氮冷冻保存容器来储存样本，并尽可能避免反复冻融。在这种条件下，固定组织样本可以保存数个月至数年不等，具体保存时间取决于样本的类型和处理方式，以及后续实验的需要。

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问Caco2细胞老化空泡化

loveliufudan

这些“坑坑洼洼”的小点可能是细胞内的空泡，这是一种正常的细胞结构，可以用于转运分泌物质、内吞、消化等生理功能。通常情况下，这些小点在细胞生长和分裂时会不断形成和消失。Caco-2细胞是一种肠上皮细胞系，通常在培养基和适宜的环境下可以快速生长和分裂。因此，如果您的细胞长得很快，并且这些小点只在细胞未长满时观察到，那么这些小点可能只是因为细胞在快速生长和分裂的过程中形成的暂时结构。

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问原代BMSC细胞培养9天，细胞脱落是怎么回事？应该如何避免？

loveliufudan

原代BMSC细胞的骨诱导培养需要复杂的培养条件和诱导液，同时需要注意一些细节问题，才能够成功地促进细胞的成骨分化。以下是一些可能的原因和相应的建议：培养基和诱导液的配方不正确：BMSC细胞的骨诱导培养需要特定的培养基和诱导液，包括适当的营养物质和生长因子。如果配方不正确或不适合该细胞系，会导致细胞死亡或脱落。建议检查培养基和诱导液的配方是否正确，并根据需要进行调整。孔板和包被的质量不佳：使用质量不

3 回答534 围观

问实验室已构建好的质粒怎么克隆扩增啊

loveliufudan

要克隆扩增已构建好的质粒，一般需要进行以下步骤：选择适当的限制性内切酶将质粒线性化。这可以通过在限制性内切酶反应体系中将质粒加入并加入相应的限制性内切酶来完成。准备DNA片段，可以通过PCR扩增、限制性内切酶切割等方法获得。DNA片段需要和质粒上的限制性内切酶切口互补配对。将线性化的质粒和DNA片段进行连接。这可以通过DNA连接酶进行连接。将连接后的混合物进行转化到适当的细菌中。可以通过热激转化、

3 回答1788 围观

问想要做细菌的定量pcr，细菌常用的内参是什么

loveliufudan

在细菌定量PCR实验中，常用的内参包括：16S rRNA基因：这是一种高度保守的基因，在细菌中广泛存在。在细菌中，16S rRNA基因的序列差异很大，因此需要根据目标细菌的种类选择合适的引物和探针。rpoB基因：这是一种编码细菌RNA聚合酶的亚基的基因，也是一种广泛存在且高度保守的基因。gyrB基因：这是一种编码细菌DNA旋转酶亚基的基因，也是一种常用的内参。

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问SIMCA 14处理代谢组学数据计算VIP值要考虑置信区间吗？

loveliufudan

在使用SIMCA软件计算VIP值时，并不需要考虑置信区间。VIP值是通过对模型中每个变量（代谢物）的贡献度进行统计计算得出的，而VIP值的大小主要取决于变量的贡献度和数据的样本大小等因素。在已经通过置换检验验证了OPLS-DA模型的可靠性之后，计算VIP值可以被认为是合理的。然而，置信区间仍然是代谢组学数据分析中的一个重要问题。在样本量较小或噪声较大的情况下，计算VIP值可能会受到较大的偏差，因此

2 回答2182 围观

问单倍型系统发育树如何构建？

loveliufudan

单倍型系统发育树的构建通常需要以下几个步骤：选择适当的DNA标记：单倍型系统发育树的构建需要使用高变异性的DNA标记。不同的研究对象可能需要不同的DNA标记，例如，对于人类来说，常用的DNA标记包括线粒体DNA序列和Y染色体DNA序列。样本采集和DNA提取：采集样本并提取DNA，确保DNA的纯度和完整性。PCR扩增：使用适当的引物对DNA标记进行PCR扩增，并使用PCR产物进行序列测定。序列比对：

3 回答2206 围观

问小鼠皮肤光老化模型中每次照射时长

sswei

将紫外线照射仪置于小鼠上方30厘米处，每周照射6次，最初照射剂量为20分钟/天，每周增加10-30分钟/天，剂量维持在120分钟/天，持续8周。

3 回答1171 围观

问组织蛋白wb验证，内参跑出来一抹黑

sswei

使用过于粗糙或过于缓慢的洗膜步骤可能会导致高背景值。抗体过时或受损：过时或受损的抗体可能会导致高背景值。蛋白质降解：样品中蛋白质降解可能会导致高背景值。

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问想染小鼠脊髓的神经细胞，取完spinal cord 然后放入PBS，之后OCT frozen，忘了fix 和sucrose怎么办

loveliufudan

如果您在取完小鼠脊髓后，忘记了加入固定剂（如formalin等）或脱水剂（如sucrose等），那么这些细胞可能会受到影响，导致结果不可靠。如果您需要分析神经元的形态和分布，可以尝试使用已经固定和脱水的样本进行下一步操作。如果您需要进行免疫染色或原位杂交等实验，可以尝试使用冰冻切片来进行。在这种情况下，您可以将OCT中包裹着的脊髓组织切割成10-20微米的薄片，然后将其存储在-80°C的冰箱中。切

3 回答611 围观

问酵母双杂酵母双杂转入ad/bd质粒（作为阴性对照）后二缺板可以生长，在四缺板上也可以生长，是什么原因呀

loveliufudan

如果酵母双杂转入了AD/BD质粒，但在二缺板和四缺板上均可以生长，可能是因为所使用的培养基不同或者酵母双杂的菌株具有一些非特异性交互作用，导致假阳性的结果。一般来说，在二缺和四缺培养基上，酵母双杂只有在正常表达被检测蛋白质的条件下才能生长。在二缺培养基上，只有酵母双杂在同时表达Leu2和Trp1基因才能生长。在四缺培养基上，只有酵母双杂在同时表达Leu2、Trp1、His3和Ade2基因才能生长。

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问药效学本来就是主观性很强吗？

loveliufudan

对于实验中存在的问题，如您所提到的40只鼠只有10只被选择为实验组，剩下30只被分为对照组，可能会存在潜在的偏见和干扰。这种情况下，可以通过增加实验动物数量、进行多次实验或者使用更严格的随机分组和盲法操作，来减少偏见和误差的影响，提高实验结果的可靠性。

5 回答498 围观

问求问肿瘤细胞稳转后药筛，多久换一次培养基呀

huarenqiang5

肿瘤细胞稳转后药筛，一般2－3天换一次培养基。

6 回答457 围观

问免疫共沉淀实验，用裂解液裂解细胞后的液体非常粘稠，离心后也非常粘稠，用2.5微升枪头也没办法吸取上清，怎么办？

loveliufudan

如果进行免疫共沉淀实验时，裂解液非常粘稠，可能是因为细胞裂解不彻底或者存在大量的DNA或RNA等高分子物质，导致样品粘稠。这种情况下，可以尝试以下几种方法：1.调整细胞裂解条件：可以尝试更改裂解液的pH值、NaCl浓度、甘油浓度、Triton X-100浓度、EDTA浓度等条件，以优化细胞裂解效果。如果使用冷冻切割法等机械方法裂解细胞，则需要对样品制备过程进行优化。2.增加离心时间或速度：可以将样

3 回答3377 围观

问小鼠星形胶质细胞长到怎样的密度可以传代呢？

huarenqiang5

小鼠星形胶质细胞长到80－90%的密度可以进行传代。

6 回答445 围观

问原代培养时如果过筛后残留了大量非自己需要的细胞如何再去筛选

dxy_vg0qqx08

可以根据不同细胞贴壁时间不同来筛选或者根据细胞生长特性添加生长因子或者药物来筛选。还有就是流式分选。如果在原代培养时，经过筛选后仍然存在大量非需要的细胞，您可以尝试继续原代培养。

4 回答258 围观

问AngII皮下埋泵缓释为什么导致腹主动脉瘤造模不成功？

loveliufudan

这里我提供一些建议供您参考：重新评估给药剂量和给药方式：您可以尝试调整药物的剂量，增加给药浓度，或者改变给药方式（例如静脉注射）来观察血压的变化。同时，参考其他相关研究，了解他们在类似实验中使用的药物剂量和给药方式。检查皮下缓释泵的功能：确保皮下缓释泵的功能正常，药物能够稳定释放。请定期检查泵的工作状态，以及药物在泵中的剩余量。选择其他动物模型：ApoE敲除小鼠可能对高血压的发展和药物干预具有特异

3 回答775 围观

问回归分析中纳入的变量必须要先单因素后多因素分析再决定吗？

hehe卓

不一定，可以将与要分析的因素有关的因素加入直接进行多因素回归分析

4 回答5210 围观

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