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实验问答

23,124,559 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问成管实验 c166细胞

土井挞克树

内皮相关实验c166都可以做，也可以做成管实验

2 回答740 围观

问在第二向电泳中，为什么溴氛蓝条带都跑到玻璃板下缘，蛋白质却只跑一半，怎么弄？

loveliufudan

在第二向电泳中，溴氟蓝条带跑到玻璃板下缘，蛋白质却只跑一半可能有以下原因：电泳时间不足：如果电泳时间不足，可能会导致溴氟蓝染料条带和蛋白质未被完全迁移。建议增加电泳时间，以确保条带和蛋白质被完全迁移。蛋白质溶液中含有大量盐或油脂：如果蛋白质溶液中含有大量盐或油脂，可能会影响电泳的迁移效果，从而导致蛋白质只跑一半。建议在蛋白质提取过程中彻底去除盐和油脂，或者使用其他蛋白质提取方法。电场强度不合适：如

2 回答462 围观

问关于使用三氯醋酸沉淀法，如何解决蛋白质难于重悬？

loveliufudan

以下是一些可能的解决方案：增加重悬缓冲液的含量：将重悬缓冲液的体积增加，可以减少蛋白质在溶液中的浓度，有利于重悬。通常，可以将重悬缓冲液的体积增加到蛋白质沉淀物的5-10倍。增加重悬缓冲液中的蛋白质还原剂：将重悬缓冲液中的蛋白质还原剂浓度增加，有助于蛋白质的还原和重悬。常用的蛋白质还原剂包括二巯基乙醇（DTE）和二巯基丙酸（DTT）等。增加重悬缓冲液的pH值：增加重悬缓冲液的pH值可以改变蛋白质的

2 回答506 围观

问这篇题为RNA介导的基因沉默实验中的注解和引用文献在哪里可以看到？

土井挞克树

可以在pubmed和中国知网上搜索到这篇文献。

1 回答408 围观

问请问一下，做的是氧化石墨烯–COOH和胶原蛋白–NH2反应，用95%乙醇做溶剂，文献中没看到要调pH，这个反应不调ph影响大吗

sswei

这个反应要调PH，不调PH有影响。

3 回答340 围观

问定点突变之后同源重组完毕，电泳显示有条带，为什么转化后的板子不长菌落

sswei

转化的时候有误，可以重新实验。目的基因和载体都切开，特别是目的基因如果是PCR后直接酶切效率会较低；载体上两个酶切位点连在一起，感受态的效率问题，转化过程对不对，如抗生素加的对不对。

3 回答1363 围观

问使用WB检测TERT蛋白，为什么分子量低于预期，为什么出现杂带！

sswei

分子量比预期低可能是由以下几个原因引起的：细胞提取和蛋白质浓度问题：如果提取细胞的质量和/或数量不足，或者蛋白质提取过程中出现问题，会导致蛋白质的含量不足。这可能会导致目的蛋白的表达水平低于预期。抗体问题：WB实验使用抗体来检测目的蛋白。如果使用的抗体出现问题，例如批次差异或失效，也可能导致目的蛋白的表达水平低于预期。转录后修饰问题：转录后修饰是指在蛋白翻译完成后对蛋白进行修饰，例如磷酸化、乙酰化

4 回答379 围观

问哪位大佬有盆腔炎大鼠造模的视频？非常感谢！在线求学习！

土井挞克树

这里没法发视频，给你发造模方法吧细菌悬液注射造模法【造模机制】人类慢性盆腔炎绝大多数为细菌感染所致,其中大肠杆菌在其发病中为主要病原微生物,病变多为单侧或一侧轻一侧重,且慢性盆腔炎患者多数有宫腔操作史。【造模方法】1、动物和菌液 Wistar 大鼠。麻醉用品(如戊巴比妥钠),细菌悬液(大肠杆榭、金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌按 2t1：1 混合,用元菌盐水稀释,浓度为 30 亿/ml混合菌)或大肠杆

1 回答496 围观

问PCR扩增后期条带很淡

loveliufudan

最可能的原因可能是模板DNA降解或消失。这可能是由于DNA质量不佳、PCR反应体系中存在抑制因素、PCR反应过程中的外界环境因素（例如温度、时间等）等因素导致的。建议您对实验过程中的样品和反应条件进行全面的评估，包括DNA质量、PCR反应体系的组成和浓度、PCR反应的温度和时间等方面。此外，如果样品存在污染，可能也会影响PCR反应的效果，因此也要注意样品的纯度和质量。最好对PCR产物进行测序确认，

3 回答4794 围观

问小鼠受精卵慢病毒显微注射后发育至2细胞就不发育了怎么回事？

loveliufudan

可能有多种原因，包括慢病毒的毒性、注射技术和实验条件等。首先，慢病毒是一种有机病毒，可以导致宿主细胞死亡，影响胚胎的发育。您使用的带GFP标签的慢病毒浓度在10^6-8的单位，也可能对小鼠受精卵造成了毒性影响。因此，建议您优化慢病毒的浓度和处理方式，以减少慢病毒对胚胎的不良影响。其次，注射技术也可能是一个问题。小鼠受精卵非常脆弱，需要非常小心和精确的技术才能成功进行显微注射。注射的位置、深度和角度

2 回答630 围观

问请问做鸟类DNA的遗传分析需要做些什么呀？

loveliufudan

做鸟类DNA遗传分析的过程大致可以分为以下几个步骤：样本收集：首先，你需要从鸟类的组织或血液中提取DNA。这通常需要在野外捕捉鸟类并采集样本。注意，采集样本的过程需要遵循相应的道德和法规要求。DNA提取：将收集到的样本带回实验室，使用DNA提取试剂盒进行DNA提取。提取过程需要遵循试剂盒的操作说明，并确保实验过程中避免污染。微卫星分析：已知的9个微卫星座位是指具有高度多态性的鸟类微卫星。通过PCR

2 回答607 围观

问请问一下，4%多聚甲醛固定组织，可以在－20度冰箱保存吗（后续做石蜡包埋）？如果可以的话，可以保存多久呢？

loveliufudan

4%多聚甲醛固定组织可以在-20°C的冰箱中保存，但需要采取适当的措施以确保样本的完整性和质量。为了最大限度地减少样本的变性和降解，建议在冰箱内使用液氮冷冻保存容器来储存样本，并尽可能避免反复冻融。在这种条件下，固定组织样本可以保存数个月至数年不等，具体保存时间取决于样本的类型和处理方式，以及后续实验的需要。

5 回答9982 围观

问Caco2细胞老化空泡化

loveliufudan

这些“坑坑洼洼”的小点可能是细胞内的空泡，这是一种正常的细胞结构，可以用于转运分泌物质、内吞、消化等生理功能。通常情况下，这些小点在细胞生长和分裂时会不断形成和消失。Caco-2细胞是一种肠上皮细胞系，通常在培养基和适宜的环境下可以快速生长和分裂。因此，如果您的细胞长得很快，并且这些小点只在细胞未长满时观察到，那么这些小点可能只是因为细胞在快速生长和分裂的过程中形成的暂时结构。

3 回答578 围观

问原代BMSC细胞培养9天，细胞脱落是怎么回事？应该如何避免？

loveliufudan

原代BMSC细胞的骨诱导培养需要复杂的培养条件和诱导液，同时需要注意一些细节问题，才能够成功地促进细胞的成骨分化。以下是一些可能的原因和相应的建议：培养基和诱导液的配方不正确：BMSC细胞的骨诱导培养需要特定的培养基和诱导液，包括适当的营养物质和生长因子。如果配方不正确或不适合该细胞系，会导致细胞死亡或脱落。建议检查培养基和诱导液的配方是否正确，并根据需要进行调整。孔板和包被的质量不佳：使用质量不

3 回答546 围观

问对于做盆腔炎大鼠的课题实验研究难嘛？后续的论文好发sci嘛？

土井挞克树

实验难度中等水平，后续还是比较好发文章的

3 回答545 围观

问酵母双杂酵母双杂转入ad/bd质粒（作为阴性对照）后二缺板可以生长，在四缺板上也可以生长，是什么原因呀

loveliufudan

如果酵母双杂转入了AD/BD质粒，但在二缺板和四缺板上均可以生长，可能是因为所使用的培养基不同或者酵母双杂的菌株具有一些非特异性交互作用，导致假阳性的结果。一般来说，在二缺和四缺培养基上，酵母双杂只有在正常表达被检测蛋白质的条件下才能生长。在二缺培养基上，只有酵母双杂在同时表达Leu2和Trp1基因才能生长。在四缺培养基上，只有酵母双杂在同时表达Leu2、Trp1、His3和Ade2基因才能生长。

3 回答4719 围观

问药效学本来就是主观性很强吗？

loveliufudan

对于实验中存在的问题，如您所提到的40只鼠只有10只被选择为实验组，剩下30只被分为对照组，可能会存在潜在的偏见和干扰。这种情况下，可以通过增加实验动物数量、进行多次实验或者使用更严格的随机分组和盲法操作，来减少偏见和误差的影响，提高实验结果的可靠性。

5 回答509 围观

问小鼠星形胶质细胞长到怎样的密度可以传代呢？

huarenqiang5

小鼠星形胶质细胞长到80－90%的密度可以进行传代。

6 回答454 围观

问原代培养时如果过筛后残留了大量非自己需要的细胞如何再去筛选

dxy_vg0qqx08

可以根据不同细胞贴壁时间不同来筛选或者根据细胞生长特性添加生长因子或者药物来筛选。还有就是流式分选。如果在原代培养时，经过筛选后仍然存在大量非需要的细胞，您可以尝试继续原代培养。

4 回答267 围观

问Flowjo 细胞周期分析为什么显示could not calculate modle

tobebetter123

记得勾选圈中的地方，就会出来图形了。

3 回答2582 围观

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