实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问抑制mTOR对pAkt的影响

土井挞克树

rapamycin抑制mTOR后对pAkt表达有双重作用，表现为抑制和促进的双调整，考虑是此浓度下对pakt有抑制作用

2 回答569 围观

问求助！求一个RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染protocol

loveliufudan

以下是一个基本的RAW264.7巨噬细胞极化的CD86和CD206的流式双染实验协议。请注意，该协议可能需要根据实验条件和实验室特定要求进行优化和调整。材料：- RAW264.7巨噬细胞- 细胞培养基（适当的培养基根据实验需求选择）- 胶体金标记的抗CD86抗体- 荧光标记的抗CD206抗体- 细胞染色缓冲液（如PBS）步骤：1. 将RAW264.7巨噬细胞培养在适当的培养基中，使其达到适当的细胞

1 回答1023 围观

问细胞免疫荧光试验（myogenesis）

土井挞克树

这个颜色差异考虑是一抗二抗浓度太低，建议提高抗体浓度

2 回答1924 围观

问阿霉素干预足细胞时培养基含双抗

土井挞克树

不建议用双抗培养基可能会增强阿霉素的作用

3 回答171 围观

问小胶质细胞形态是否是静息态

麻黄连翘赤小豆

未经过处理的情况下可以认为是静息态。小胶质细胞有两种静息状态下形态，圆形或梭形。梭形在非激活状态有触角，LPS激活后触角逐渐消失（BV2细胞形态有点像小眼睛）Luteolin triggers global changes in the microglialtranscriptome leading to auniqueantiinflammatory and neuroprotective ph

4 回答1347 围观

问凝胶阻滞实验中，需要观察DNA时，可以用肝素或者SDS置换DNA，这是为什么呢，请教

sswei

SDS离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来。

3 回答1033 围观

问WB电泳求助，条带直接炸裂

huarenqiang5

考虑是电泳速度过快或电泳时温度过高或电压过高导致。

3 回答418 围观

问甲醇氯仿法提蛋白怎么测浓度？

huarenqiang5

烘干后可以使用尿素溶液进行溶解来测蛋白浓度。

4 回答2297 围观

问CO ip实验中A蛋白拉B蛋白能行，但是B拉不出A是什么原因？

balalaLy

那可能是B抗体的问题，抗原抗体结合力弱

3 回答1626 围观

问求问下卵巢早衰大鼠的模型好不好造模呀？具体怎么制备？感谢感谢回复🙏

huarenqiang5

不同剂量顺铂腹腔注射建立大鼠化疗损伤性卵巢早衰模型方法取48只雌性未生育Wisar大鼠分为6组，每组8只。在不同时间点腹腔注射不同剂量CP。对照组（A组）无处理;CP腹腔小剂量（1.5 mg/kg）注射1组（B组）、小剂量（2.0mgkg）注射2组（C组）和小剂量（2.5mg/kg）注射3组（D组），均每日1次，连续5d;CP腹腔注射大剂量 1组E组），4mg/

3 回答250 围观

问Haploview文件格式

loveliufudan

Haploview对于PED格式文件有一定的限制和要求。根据你提供的错误信息，出现了无效的性别或患病状态的错误。在PED文件中，第5列表示性别，一般使用数字来表示，其中1表示男性，2表示女性，0表示未知性别。类似地，第6列表示患病状态，通常使用数字表示，其中1表示患病，2表示不患病，0表示未知患病状态。根据你的描述，你不知道个体的性别和患病状态，因此你可以将这些未知的值用0表示。然而，根据Hapl

2 回答617 围观

问在acknowledgement中标注共同一作算吗？

loveliufudan

在学术论文中，作者的贡献通常在作者列表中进行明确标注，而不是在致谢部分。因此，如果你在论文中有共同一作的作者，最好将其明确标注在作者列表中，而不是在致谢部分。在一些期刊或会议论文的作者列表中，可能会提供一些特殊的标记或符号来表示共同一作。例如，使用星号 (~B、字母（a,b,c...）或其他符号来标识共同一作的作者。这样的标记方式可以在文章标题下的脚注或作者列表中进行说明。然而，标注共同一作的方式

3 回答662 围观

问菌移植实验的方法和技术要求

loveliufudan

进行菌移植实验时，菌种的活化与给予方式和实验设计有关。以下是一般情况下的考虑：1. 菌种活化：如果你使用的是冻存菌株或冷冻保存的菌种，需要先进行活化。活化过程包括从冷冻状态中取出并在适当培养基中培养，以恢复其生长状态和活力。具体的活化步骤取决于菌株的特性和所用的培养基，请参考相关菌株的培养条件和文献方法。2. 给予方式：菌种的给予方式可以是灌胃或灌肠，具体取决于实验设计和研究目的。灌胃是通过胃部将

3 回答830 围观

问老师们好，请问WB电泳液转膜液用太久了对结果有影响吗？原理是什么呀？

balalaLy

一般用过4、5次是没有问题的，用太多次会引入许多杂质，影响电流。

3 回答2915 围观

问请问一下，怎么鉴别制备的M13 DNA 是单链还是双链？感谢！

sswei

看碱基,有T为DNA.双链DNA分子中碱基必须符合A=T且C=G,只要有一项不符合就只能是单链.

3 回答531 围观

问12号晚上用到了疑似有白色念珠菌的板里，晚上4度保存。13号早上放到水浴锅升温后有白点，白点在室温放置了一会变淡，之后变气泡

麻黄连翘赤小豆

染菌了，升温只是看得更清楚，建议重新换板子

3 回答419 围观

问原代提取的细胞形态很奇怪张牙舞爪是什么原因

skyye

照片看细胞状态还可，但量比较少，张牙舞爪的可能是成纤维细胞吧，小的圆圆的比较像是你的目标一般。可能下次换个小的培养皿提取原代细胞比较好，细胞太少的话也会影响其生长。目前建议继续观察，多培养几天再看看

4 回答352 围观

问胆固醇造膜

loveliufudan

在使用胆固醇造膜并使用MTT检测胆固醇浓度对细胞存活率的影响时，存在一些可能导致你观察到的细胞存活率没有明显差异的原因。以下是一些可能的解释：1. 浓度范围选择：可能你选择的浓度范围过于窄，未涵盖到影响细胞存活率的有效范围。如果你只测试了几个特定的胆固醇浓度，可能错过了细胞存活率受浓度变化的敏感范围。尝试使用更广泛的浓度范围进行实验，以确定是否存在浓度相关的效应。2. 时间因素：胆固醇对细胞的影响

2 回答470 围观

问摩尔计算，实在搞不懂了

土井挞克树

浓度是150mmol/l的话每天150ml那么就是150x150/1000的摩尔数

5 回答656 围观

问免疫组化封闭液中叠氮化钠可以用其他试剂代替吗？

Leo2019

如果要用类似的产品起到抑菌作用，可以使用牛莎PC-950来替代叠氮钠

4 回答1279 围观

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