转染过表达或敲低，看到荧光，就是上调下调不起作用，是什么问题

过表达质粒插入了目的基因，会竞争细胞内部的营养物质，从而导致荧光蛋白的表达量下降。

上下调不起作用可能是调节蛋白存在降解或聚合，这种情况不影响荧光表现，但上下调会不起作用

如果您在转染过表达或敲低实验中看到了荧光表达，但没有观察到预期的上调或下调效果，可能存在以下问题：

1. 转染效率：确保您的转染方法具有足够的效率，使转染的表达载体或敲低工具能够进入细胞并进行表达或干扰。可以使用阳性对照来验证转染效率，例如使用荧光标记的载体。

2. 载体选择和构建：确保您选择的表达载体或敲低工具适合您的研究目的，并且已经验证其在其他实验中的有效性。在构建表达载体或敲低工具时，要仔细验证其序列和正确性。

3. 细胞类型和系统：不同的细胞类型对表达和干扰的反应可能存在差异。确保您的细胞系适合进行表达或敲低实验，并且具有适当的表达或敲低系统。

4. 实验时间点：表达或干扰的效果可能需要一定的时间才能显示出来。确保您在适当的时间点进行观察和分析，以获取准确的结果。

5. 目标蛋白质的稳定性：目标蛋白质的稳定性可能会影响其在细胞中的表达水平。某些蛋白质可能具有快速降解的特性，因此需要采取适当的措施，如添加蛋白酶抑制剂或选择稳定性较高的突变体。

6. 适当的对照组：确保设置适当的对照组，例如空载体对照、阴性对照或非靶向敲低对照。这有助于排除实验上的偶然差异或非特异性影响。

要看转染后细胞阳性荧光的比例，如果阳性比例低，那就是转染效率低，需要调整转染体系。如果阳性比例高，调控效果低，那就是质粒不行，需要重新找序列构建质粒。

可能是转染后细胞状态不好的原因导致。