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判断坏死性凋亡和凋亡
土井挞克树
坏死性凋亡不同于凋亡和其他形式的程序性细胞坏死,它不依赖于 caspase 活性,但需要 RIPK3 调控的 MLKL 磷酸化。这种磷酸化事件使 MLKL 在质膜上产生孔复合体,从而导致 DAMP 的分泌、细胞肿胀和膜破裂,可以通过检测MLKL磷酸化程度检测坏死性凋亡
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问
求助:肺动脉平滑肌细胞常氧下状态良好,1%缺氧48h后大量死亡是什么原因啊
土井挞克树
细胞太密,对缺氧耐受度差所以大量死亡
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问
小鼠人源细胞成瘤
土井挞克树
4t1可以用免疫抑制,先用her2转到4t1再做成瘤实验
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问
大鼠睾丸支持细胞油工O染色
土井挞克树
染色时间太短,染完多次冲洗。重新染吧,这张片子没染成功
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问
糖尿病大鼠胰岛素降血糖
土井挞克树
一般选用重组甘精胰岛素来降血糖。
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问
蛋白质序列,红色字体是什么意思?谢谢
sswei
红色字体意思是剩余重叠切片位点
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问
MCAO法小鼠造模
土井挞克树
可能是没有塞到颈内主干,没有完全把血流阻断
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问
请问水迷宫老鼠找不到平台,计120秒,怎么统计?请教,急~~
土井挞克树
这种120s的老鼠组不做重复测量的方差分析,做生存分析统计,如果120s以上的特别少也可以按丢失处理
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问
求助CC A分析
土井挞克树
不是p值,pr代表的是概率,也就是回归的概率分布
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问
要做荷瘤鼠,请问打细胞前最多传多少代??
huarenqiang5
你这传11代一般来说没有什么影响。
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问
AAV病毒用于细胞实验需要注意哪些问题?
sswei
AAV病毒用于细胞实验关键注意事项1. 启动子的选择。是选择广泛性启动子还是特异性启动子。相比于血清型的组织特异性,特异性启动子可实现细胞的特异性,因此对特异性要求较高的研究,可以选择某种细胞特异性表达的启动子。2. 血清型的选择。AAV的血清型主要由AAV衣壳蛋白的结构所决定,不同的衣壳蛋白结构识别不同的细胞表面受体,因此血清型的选择会影响AAV的感染效率、组织亲和性、和开始表达的时间。3. 病
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为何有时病毒在体实验表达效率不理想?
sswei
可能的原因为目的细胞不易感,属于难感染细胞,建议适当加大病毒量再尝试。
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问
病毒使用过程中如何进行稀释?
sswei
需要稀释病毒时,将病毒从-80℃冰箱中取出,置于冰上溶解,然后用PBS或培养基(不含血清)稀释到所需浓度后轻柔混匀,尽快使用。
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问
细胞内抗原的检测-间接免疫荧光法信号微弱的解决方法?
loveliufudan
如果您在细胞内抗原的间接免疫荧光法中遇到微弱的信号,以下是一些可能的解决方法: 1. 抗体优化:选择更高亲和力和特异性的抗体。您可以尝试不同的抗体,包括来自不同供应商或克隆株的抗体。进行一些实验,优化抗体的浓度和孵育时间。 2. 改进固定和渗透化:确保细胞固定和渗透化的步骤正确进行。不同类型的细胞可能需要不同的固定和渗透化条件。优化这些步骤,以确保抗体可以充分进入细胞内。 3. 增加孵育时间:延长
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问
pcr提取完的基因总突变,用了高保真酶也没用,有时候转化进大肠杆菌测序得到的基因序列彻底比对不上。
是TTT
可能是其他基因也共用这个引物序列,你可以用测序结果匹配一下是不是其他相似基因的序列
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问
大肠杆菌重组质粒,三四五六七分别为重组质粒发小为7000bp左右,其中三四五六七皆有12000bp以上的条带大概是什么?求解?
是TTT
这么大的片段考虑环状质粒的可能性大,可能有两种情况:一是酶切效率太低,酶切不完全导致的。二是连接酶的问题,使线性质粒发生了自连
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问
胶体金ph的测定,会堵塞ph计,请问怎么解决
dxy_mqg1dtg8
可以在测定前使用0.22微米的滤膜过滤一下除去大颗粒。
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问
核酸提取试剂盒(磁珠法),一不小心放在-20度了,本来应该放在4度的,会影响检测结果吗?
是TTT
慢慢复温就行,可以拿出来放在4℃融解
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问
Western Blot、P21
是TTT
如果一起转膜的条件下只有p21跑不出来,可以考虑换一个细胞系试一试;如果还是不行很可能是一抗不行
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问
实验设计需要将大肠杆菌基因组通过机械破碎(超声破碎)获得破碎的基因小片段,该如何设计
是TTT
1.大肠杆菌扩增:取30ml LB液接种大肠杆菌,37℃ 220rpm摇至OD600在0.6左右,4℃离心取菌体沉淀2.超声破碎:沉淀用4℃预冷的PBS洗涤两次以后,冰上超声破碎菌体沉淀3.提取菌体DNA:按试剂盒说明书操作4.DNA凝胶电泳:分出DNA不同的片段,在紫外灯下将需要基因片段的位置切割下来5.DNA凝胶回收纯化:按试剂盒说明书操作
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