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问
求助大家,cck8实验,培养基中有还原性药物,检测时是要更换培养基吗?更换成普通培养基的时候,要用PBS清洗吗?容易把细胞洗没吗?
dxyc42u
检测时是需要更换培养基,可以用pbs洗涤,不会把细胞洗掉的
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问
如何用台盼兰计数活细胞?
dxyc42u
用无血清培养基把细胞悬液稀释到200~2000个/毫升,在0.1毫升的细胞悬液中加入0.1毫升的0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色的细胞是死细胞。
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问
细胞实验中经常出现的问题有哪些?怎样规避?
loveliufudan
在细胞实验中,常见的问题包括: 1. 细胞污染:细胞污染可能是由细菌、真菌、酵母或其他细胞类型的污染引起的。为了规避这个问题,建议在实验开始前进行无菌技术操作,使用无菌培养器具和试剂,以及经常监测和检查细胞的无菌性。 2. 细胞死亡:细胞在培养过程中可能会出现死亡,可能是由于细胞培养条件不适宜、细胞老化或药物毒性等因素引起的。为了避免细胞死亡,应该选择适当的培养基和培养条件,并且定期检查细胞的健康
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问
如何知道细胞培养液被污染了,下一步怎么办?
loveliufudan
要确定细胞培养液是否被污染,可以注意以下几个指标和观察: 1. 观察培养基外观:检查培养基是否呈现异常颜色、浑浊度或悬浮物。任何异常变化都可能是细胞培养液被污染的迹象。 2. 观察细胞形态:观察培养的细胞是否显示异常形态,如变形、聚集、不规则的细胞形状等。这些变化可能是污染导致的。 3. 观察细胞生长率:如果细胞生长缓慢、停滞或减少,可能是细胞培养液受到了污染的迹象。 4. 进行细菌培养:将一小部
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问
为什么要热灭活血清?
loveliufudan
热灭活血清的主要原因: 1. 消除病毒和微生物:血清中可能存在潜在的病毒、细菌或其他微生物。通过热处理,可以有效杀灭这些病原体,从而降低血清的感染风险。这对于细胞培养和实验动物的健康非常重要。 2. 保留其他生物活性成分:血清中含有许多对细胞生长和功能非常重要的生物活性成分,如生长因子、细胞黏附分子和免疫调节因子等。热灭活血清的目的是在杀灭病原体的同时尽量保留这些生物活性成分的功能。需要注意的是,
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问
WB转膜出现这种圆点是怎么回事啊,感觉和转膜夹上的一样大小
loveliufudan
可能是转膜夹有缺陷或损坏导致的。检查转膜夹是否完整,并尽量使用新的、无损坏的转膜夹。
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问
过氧化氢诱导建模应该怎么选购呢?
loveliufudan
一般来说,购买过氧化氢应该通过专业的实验室试剂供应商或化学品供应商进行购买,这些供应商提供的过氧化氢通常符合实验室安全标准,但是去药店买“双氧水”也是可行的。
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问
小鼠鼠源性胰腺癌细胞皮下瘤,放疗增敏给多少剂量合适
feixue7758527w
放疗增敏剂一般都是按体重计算的,有的是5mg/kg,有的是870mg/kg,具体要看你用什么放疗增敏的。
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问
质粒提取浓度正常,但是比值总是超过2,是什么问题?
sswei
a260/a280大于2说明RNA没有除干净。需要对质粒纯化。
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问
用胰酶消化贴壁细胞,发现很难消化下来,该怎么办?
sswei
一、trypsin本身,胰酶没有在冰箱中放置。或者没有加入EDTA会影响其消化效果的。二、增加消化时间,提高trypsin 浓度。2*,4*的trypsin本身对细胞伤害不大。至少对cho细胞,暴露在1*trypsin溶液中,近一个小时,细胞活性没有显著下降的。所以,可以提高trypsin浓度为2*,或者消化时间延长些。三、小tricks,消化的时候,轻轻拍打方形瓶底部,或者在37摄氏度放置几分钟
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问
请问黑胶虫污染的问题如何解决呢?
loveliufudan
1. 确认污染:首先,通过使用合适的方法进行黑胶虫检测,如PCR、DNA染色、培养基检测等,确认细胞确实受到黑胶虫污染。 2. 隔离受污染细胞:将受污染的细胞与其他无污染的细胞分开,避免进一步传播。 3. 抗生素处理:使用适当的抗生素来清除黑胶虫污染。常用的抗生素包括环丙沙星、多西环素等,可以按照厂家建议的剂量和处理时间进行应用。在使用抗生素之前,可以通过培养基预处理、酸化或冻融处理等方法增强抗
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问
pH 4.5的乙酸怎么配制?
sswei
如果用冰醋酸与氢氧化钠配制。PH=PKa-lg[HAc]/[Ac-]4.5=4.75-lg[HAc]/[Ac-]lg[HAc]/[Ac-]=4.75-4.5=0.25[HAc]/[Ac-]=1.78/1需要冰醋酸的质量为0.1×1.78/2.78×60=3.8克需要氢氧化钠的质量为0.1×1/2.78×40=1.4克将两者与水配制成一升溶液即可。
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问
求助,BAF3悬浮细胞系进行质粒转染用啥转染试剂成功率高啊。
烧伤科常医生
我的经验是使用磷脂体转染试剂成功率能高一些
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问
干预CCK8检测细胞增殖
然吉儿
一般如果前期造模采用无或低血清,那么CCK8最好也用相同条件,这样保持实验条件前后一致性
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问
WB蛋白趋势对,但是条带大小 大了15-20kda,不知道怎么回事
dxyc42u
有可能是mark的问题,换个别人的试试看
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问
细胞中发现黑胶虫污染怎么办?左氧氟沙星该怎么用?
烧伤科常医生
处理方法可以换优质胎牛血清,可以用伯胺奎、磺胺、四环素、贝尼尔、庆大霉素进行洗涤。不建议使用左氧氟沙星洗涤。
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问
细胞培养过程中的小黑点
烧伤科常医生
有可能是黑胶虫,细胞碎片,凋亡小体,血清中的沉淀或者是支原体的污染。
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问
R语言gemtc包的结果里好多参数,哪个才是贝叶斯因子?
dxyc42u
要在R中通过专门的包进行转换的
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问
细胞培养浓度太低,求助?
Keven轩
可以换口径更小的培养皿,并且减少培养基的使用体积
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问
AM/PI活死细胞染色红绿荧光重叠问题
Eason老歌迷
既然发生了重叠,说明细胞都死了,可能是前期处理时细胞已经老化死亡了。
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