实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问做细胞凋亡和周期的时候，培养液中已凋亡细胞需要一起收集吗？

申东熙老伯

需要的，已凋亡细胞需要在检测细胞周期和凋亡的时候一起收集。

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问野外取根系后应如何保存呢？可以用液氮保存根系吗，会破坏根系活性吗？

huarenqiang5

根系收集至无菌采样袋中，密封保存。无菌采样袋立即放入生物样品采样箱中低温保存 (采样箱内提前放入冰袋或干冰)。低温运送至实验室进行根际土的收集。根际土壤样品可直接进行后续实验，或液氮速冻后，置于-80 °C超低温冰箱保存。

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问液化痰液对痰液中菌的影响

loveliufudan

首先，液化痰液可以增加呼吸道清除痰液的效率，有助于将痰液中的细菌排出体外。此外，液化痰液还可以改变呼吸道内的环境，降低细菌生长的条件，减少细菌的繁殖。然而，液化痰液并不能直接杀死痰液中的细菌。如果存在感染或严重细菌侵袭，可能需要使用抗生素等药物来处理细菌感染。液化痰液通常作为辅助治疗手段，配合其他适当的治疗方法一起使用。

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问请教大家：测大鼠机械痛和热痛行为学的时候是二者同天测还是前后2天错开测呢？同天测一般间隔多长时间合适呢？

loveliufudan

在测量大鼠的机械痛和热痛行为学时，是可以选择同一天测量二者，或者将它们错开在不同的天数进行测量。这个选择取决于您的研究目的和实验设计。 1. 同天测量：如果您希望在同一天内测量机械痛和热痛反应，可以减少动物的干扰和影响，并节省时间和资源。然而，需要注意的是，机械痛和热痛刺激可能会相互影响，导致结果的干扰。在同一天内测量时，应确保足够的间隔时间，以使动物完全恢复到基线状态。 2. 错开测量：如果您希

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问如何测定以羊血培养基为基础所培养的幽门螺旋杆菌菌液的OD值？

huarenqiang5

可以用补被动血凝测定、免疫印迹技术和酶联合吸附测定(ELISA)等进行检测。

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问Histology and histopathology期刊如何缴费

huarenqiang5

编辑部会给你缴费时间、流程、账号等相关信息。按其相关要求缴费即可。

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问亲们，谁能帮帮我，这是怎么了

申东熙老伯

配胶或者转膜问题，可能配的胶不均匀或者转膜的时候膜与胶之间滑动了。

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问Lipo3000转染

huarenqiang5

如果是顺序加错了会导致转染不成功。

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问RNA琼脂糖凝胶电泳

申东熙老伯

不稀释直接上上样量太多了，稀释之后用5×loading的量要根据稀释之后溶液的量算，稀释之后的样品体积÷4就是应该要加的5×loading的量。

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问DMF安全量级

huarenqiang5

在百分之0.1以下。用dmso作为溶剂配制的母液，在稀释时要确保工作液中dmso的终浓度在0.1%以下，不要超过0.5%，并设置相应浓度的dmso对照组。

3 回答2197 围观

问siRNA转染

申东熙老伯

中间一整块都没有细胞可能是换液是枪头吸了培养基直接打在上面了，可以从六孔板的壁上加培养基以及转染复合物，加了之后摇匀就可以了。

3 回答784 围观

问请教大家：测大鼠机械痛和热痛行为学的时候是二者同天测还是前后2天错开测呢？同天测一般间隔多长时间合适呢？

huarenqiang5

不建议同天检测，因为每种检测需要重复三至五次。建议错开每天上午做。

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问有没有老师做过大鼠精原干细胞的提取，礼貌求方法

huarenqiang5

1.SSCs的分离及纯化①机械法+两步酶法分离纯化SSCs:大鼠脱颈处死后无菌收集双侧睾丸，置于盛有HBSS的培养皿中,用眼科剪、镊仔细剥除脂肪垫、附睾、睾丸被膜，将组织剪至淤泥状，转移至清洁已消毒的10mL瓶中。加人相当于组织10倍体积的1LV型胶原酶溶液,用移液管反复吹打混匀，放人37℃培养箱中消化15min后取出再次用移液管反复吹打混匀，静置10min，吸出上清并弃之，向清洁已消毒10 mL

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问细胞细菌污染 1%抗生素的作用有多少

土井挞克树

1%的抗生素一般不会抑制很久，只会短时间抑制。

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问求助:成年小鼠心肌细胞分离

huarenqiang5

成年小鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力。因此，小鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长。大量观测表明，选择1~3 d龄小鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄小鼠心肌细胞培养效果最佳。

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问小鼠原代肝细胞提取求助

loveliufudan

可能有几个原因导致肝细胞死亡： 1. 消化液浓度过高：四型胶原酶的浓度可能过高，导致消化液对肝细胞产生毒性作用。你可以尝试降低四型胶原酶的浓度，以减少细胞损伤。 2. 灌流速度过快：灌流速度过快可能导致肝细胞无法适应环境的变化，造成细胞应激和死亡。你可以尝试降低灌流速度，给予细胞更多适应和恢复的时间。 3. 灌流液pH值不适宜：灌流液的pH值可能对细胞生存起着重要作用。确保灌流液的pH值在适宜的范

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问Wb显影膜全白有啥原因

feixue7758527w

如果丽春红也没有，就是转膜的问题，具体还是要看看跑胶有没有条带，转膜后的情况，一般都是转膜的问题的。

4 回答2048 围观

问细胞克隆形成肿瘤细胞和THP-1

huarenqiang5

是的和平常做共培养一样上下室比例为1比1.5即可。

3 回答666 围观

问CCK-8检测悬浮脾淋巴细胞

huarenqiang5

CCK-8检测脾淋巴细胞总体积200uL需要吸取100uL的细胞板内的体积，再补上不加血清的培液100uL混合均匀。

3 回答717 围观

问如何提取小鼠主动脉内皮细胞

dxy_xthqe158

组织贴壁法将主动脉清理干净，纵向剪开，剪为小的片段，置于皿底，加入刚没过组织厚度的培养基进行培养，60h后有细胞游出

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