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        大肠杆菌重组质粒,三四五六七分别为重组质粒发小为7000bp左右,其中三四五六七皆有12000bp以上的条带大概是什么?求解?

        相关实验:含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验

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        dxy_9m1ih170

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        7 个回答

        user-title

        是TTT

        有帮助

        这么大的片段考虑环状质粒的可能性大,可能有两种情况:一是酶切效率太低,酶切不完全导致的。二是连接酶的问题,使线性质粒发生了自连

        user-title

        sswei

        有帮助

        高活性酶,高浓度会导致大量非特异性扩增。

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        weiran0928

        有帮助

        12000bp的可能是环状,超螺旋形态的质粒。质粒有三种形态,线性,环状,超螺旋,电泳时线性跑得最快,在最下面,环状次之,超螺旋最慢,所以提质粒后跑胶有几条带是正常现象

        user-title

        z流沙z

        有帮助

        这么大的片段,如果提的质粒不纯那就有可能是大肠杆菌的基因组

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        土井挞克树

        有帮助

        考虑是质粒酶切失败,质粒未成功酶切就会造成条带偏大

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        dxy_xextz7w2

        有帮助

        有可能在连接过程中出现自连的情况

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        这些额外的条带可能是插入到重组质粒中的外源DNA片段,例如目标基因、选择标记基因或其他重组元件。这些条带的大小超过了重组质粒本身的大小,可能是由于插入片段的长度较大。

        要确定这些额外条带的具体内容,需要进行进一步的实验或测序分析,以确定每个条带对应的DNA序列。通过与已知的基因或序列数据库进行比对,可以确定这些条带所代表的基因或其他功能元件。


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