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        质粒提取失败怎么办?

        相关实验:含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验

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        dxy_h67k9j30

        紧急求助,之前一直用试剂盒提质粒,最近突然用nandrop测出来浓度很高,但是qubit测只有十分之一,跑胶结果类似质粒浓度非常低,感受态 培养基 试剂盒都换过了

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        3 个回答

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        可以从以下几方面试试:1、重新挑选新菌落进行液体培养;2、更换具有相同功能的高拷贝数载体;3、不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落;4、可加大菌体用量并加倍使用溶液P1、P2和P3,可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量;5、可适当加温或延长溶解时间漂洗液洗涤后应离心尽量去除残留液体,再加入洗脱缓冲液;6、洗脱时放置1分钟可达到较好的效果。

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        土井挞克树

        有帮助

        可能是纯度不够,有污染的DNA。

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        balalaLy

        有帮助

        可以先做个转化挑单克隆做个菌p看看质粒有没有问题

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