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        关于450kd大分子量蛋白求助,内参没问题

        相关实验:用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验

        user-title

        无信号勿扰

        关于450kd大分子量蛋白求助,内参没问题,目的蛋白跑不出来?

        1.电泳(4-12%梯度胶),压平60v,30min;分离120v,1h。

        2.转膜:genscript机器电转10min

        用的是0.22um的pvdf膜

        有做过大分子量蛋白的可以告知一下,你们当时做的条件嘛,或者指出一些我做的问题,不胜感激!

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        3 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        你跑这么大分子量的蛋白,还是换用0.45um的膜比较好,然后买个跟你分子量差不多的marker,可以看到marker了,再 转膜,建议延长一下转膜时间,用marker来指示你是否转过去了。

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        大分子蛋白,你可以用湿转法转膜,然后转膜时间和电流都可以增加,可能第一次转不上,多试几次。

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        这个分子量太大了,你的转膜时间不够,而且最好用0.45um的膜

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