材料与仪器
步骤
1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物：
5X 激酶分析缓冲液 4 μl，10 mg/ml 组蛋白 2B 储存液 1 μl，[γ-32P] ATP（终浓度为 5 μCi/5 μmol/L ATP） 1 μl，水（取决于下一步所加的激酶样品的量） 0~14 μl
10X 环核苷酸依赖的蛋白质激酶分析缓冲液
20X 环核苷酸储存液
2. 往上述反应混合物中加 1~14 μl 激酶样品，开始反应。
3. 于 30℃ 反应一定时间（先做预实验，从 10 分钟时起，最好选线性反应期的某个时间点）。
4. 制备样品进行 TCA 沉淀分析、SDS-PAGE 或者用 P81 磷酸纤维素滤纸分离标记的组蛋白。
5X 激酶分析缓冲液 4 μl，10 mg/ml 组蛋白 2B 储存液 1 μl，[γ-32P] ATP（终浓度为 5 μCi/5 μmol/L ATP） 1 μl，水（取决于下一步所加的激酶样品的量） 0~14 μl
10X 环核苷酸依赖的蛋白质激酶分析缓冲液
20X 环核苷酸储存液
2. 往上述反应混合物中加 1~14 μl 激酶样品，开始反应。
3. 于 30℃ 反应一定时间（先做预实验，从 10 分钟时起，最好选线性反应期的某个时间点）。
4. 制备样品进行 TCA 沉淀分析、SDS-PAGE 或者用 P81 磷酸纤维素滤纸分离标记的组蛋白。
来源：丁香实验
